專利名稱：一種具有促進骨折愈合作用的中藥提取物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一組中藥提取物的制備方法，特別涉及一組具有促進骨折愈合作用的中藥提取物的制備方法。
背景技術(shù)：
海南九節(jié)I3Sychotria hainanensis為茜草科植物，又名山大刀、青龍吐珠，為長綠性灌木，耐陰性極強，喜溫暖多濕陽光的環(huán)境。根葉用藥，味苦、澀，性涼，有清熱解毒、消腫拔毒、祛風(fēng)除濕、活血止痛之效，主治感冒、白喉、痢疾、跌打損傷和無名腫痛等。國外的學(xué)者從茜草科九節(jié)屬植物I^syehotriaforstcrianaA. Gray.中分離出了多聚假吲哚生物堿(九節(jié)屬植物中多聚假吲哚生物堿與核苷酸之間的相互作用[J].國外醫(yī)藥植物藥分冊，1990， 5(5) :230-231.)。在我國海南島，黎族人民用其莖和葉治療骨折、跌打損傷。草海桐為草海桐科植物草海桐kaevola scricea Vahl.，生長于海邊，通常在海邊沙地上或海岸峭壁上。在臺灣、福建、廣東、廣西等省區(qū)均有分布，在海南島主產(chǎn)于文昌、 昌江、東方等地。其莖、葉用藥，黎族地區(qū)用其莖和葉治療骨髓炎。落地生根，別名土三七，打不死，為景天科植物落地生根Bryophyllum pirmatum(L.f.)0ken。根及全株入藥，味苦、酸，性寒。具有止血涼血，清熱解毒的作用，主治吐血，外傷出血，跌打損傷，疔瘡癰腫，乳痛，丹毒，潰瘍，燙傷，胃痛，關(guān)節(jié)痛，咽喉痛，肺熱咳嗽等癥。近代藥理研究表明，落地生根葉的甲醇提取物對多種細(xì)菌的生長具有抑制作用， 水提物具有鎮(zhèn)痛、抗炎、抗糖尿病等活性。在海南島黎族地區(qū)用其全株治療骨折、跌打損傷。 目前對以上三種黎藥提取物促進骨折愈合作用的實驗研究還未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種具有促進骨折愈合作用的中藥提取物的制備方法。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為提供一種具有促進骨折愈合作用的中藥提取物的制備方法，其特征在于如下步驟(1)、將海南九節(jié)葉或草海桐或落地生根藥材粉碎，保存?zhèn)溆茫幉姆勰┠繑?shù)為 10 60目；O)、將步驟(1)得到的藥材粉末用蒸餾水進行提取，過濾藥渣，合并濾液，濃縮， 得到藥材蒸餾水提取濃縮液，干燥，計算提取率；其中提取次數(shù)為1 10次，每次提取時間為1 10小時，提取溶劑與藥材的物料比(mL/g)為1 1 30 1，干燥方式包括水浴蒸干，減壓干燥和真空凍干；(3)、將步驟O)中的藥渣曬干，用乙醇進行二次提取，過濾藥渣，合并濾液，回收溶劑，得到藥材乙醇提取濃縮液，干燥，計算提取率；其中乙醇提取的方式包括回流提取，索式提取和超生提取；乙醇濃度為30% 95%，優(yōu)選95% ；提取次數(shù)為1 10次，每次提取時間為1 15小時，藥材濃縮液的干燥方式包括水浴蒸干，減壓干燥和真空凍干，藥材濃縮液真空凍干的時間包括0 72小時。
較佳地，所述步驟O)中，藥材粉末用蒸餾水進行提取次數(shù)優(yōu)選為3次，第一次2 小時，第二次15.小時，第三次1小時。較佳地，所述步驟O)中，藥材粉末用蒸餾水進行提取，提取提取溶劑與藥材的物料比(mL/g)優(yōu)選為15 I0較佳地，所述步驟O)中藥材濃縮液的干燥方式優(yōu)選真空凍干方式，藥材濃縮液真空凍干的時間優(yōu)選為M小時。較佳地，所述步驟(3)中的乙醇提取的方式優(yōu)選為回流提取，提取次數(shù)優(yōu)選為2 次，第一次提取時間優(yōu)選為2小時，第二次提取時間優(yōu)選為1. 5小時。較佳地，所述步驟(3)中藥材濃縮液的干燥方式優(yōu)選為真空凍干方式，藥材濃縮液真空凍干的時間包括優(yōu)選為M小時。
具體實施例方式下面結(jié)合優(yōu)選實施例對本發(fā)明作進一步說明，但本發(fā)明決不限于下述實施例。實施例1海南九節(jié)葉提取物的制備海南九節(jié)葉粉碎，過60目篩，保存?zhèn)溆谩?一 )海南九節(jié)葉蒸餾水提取試驗1、提取次數(shù)的篩選設(shè)定提取溶劑與藥材的物料比(mL/g)為15 1，每次提取 2. 5h，分別提取1、2、3、4、5次，以確定合適的提取次數(shù)。2、提取時間的篩選設(shè)定提取次數(shù)為3次，提取溶劑與藥材的物料比(mL/g)為 15 1，在此條件下，每一次分別提取0. 5h、2. 5h、3. 5h、5h、7. 5h，10h，以確定每一次合適的提取時間。3、提取溶劑與藥材的物料比(mL/g)的篩選設(shè)定提取次數(shù)為3次，提取時間3 次分別為2.0h、ljh、1.0h，在此條件下，將提取溶劑與藥材的物料比分別設(shè)定為1 1、 5 UlO 1、15 1,20 1,30 1進行試驗，以確定合適的提取溶劑與藥材的物料比。4、藥材濃縮液液干燥方式的篩選對經(jīng)提取濃縮得到的藥材濃縮液進行干燥，分別采取水浴蒸干，減壓干燥和真空凍干的方式進行，以確定合適的干燥方式。5、真空干燥時間的確定采取真空凍干的方式對提取濃縮得到的藥材濃縮液進行干燥，分別干燥5h、10h、15h、Mh、48h、72h，以確定合適的干燥時間。( 二)海南九節(jié)葉蒸餾水提取后藥渣的乙醇提取試驗1、乙醇提取方式的篩選海南九節(jié)葉經(jīng)蒸餾水提取后的藥渣曬干，采用95%乙醇分別進行回流提取、超聲提取和索式提取，以確定合適的提取方式。2、乙醇濃度的篩選海南九節(jié)葉經(jīng)蒸餾水提取后的藥渣曬干，分別采用30%、 60%,70%,80%,95%乙醇進行回流提取，以確定合適的提取用乙醇濃度。3、提取次數(shù)的篩選海南九節(jié)葉經(jīng)蒸餾水提取后的藥渣曬干，采取95%乙醇回流提取法式進行提取，分別提取1、2、3、4、5次，以確定合適的提取次數(shù)。4提取時間的篩選海南九節(jié)葉經(jīng)蒸餾水提取后的藥渣曬干，采取95%乙醇回流提取法式進行提取，提取次數(shù)為2次，每一次分別提取0. 5h、2. 5h、3. 5h,5h,7. 5h，IOh,以確定每一次合適的提取時間。5 藥材濃縮液液干燥方式的篩選對經(jīng)提取濃縮得到的藥材濃縮液進行干燥，分別采取水浴蒸干，減壓干燥和真空凍干的方式進行，以確定合適的干燥方式。6、真空干燥時間的確定采取真空凍干的方式對提取濃縮得到的藥材濃縮液進行干燥，分別干燥5h、10h、15h、Mh、48h、72h，以確定合適的干燥時間。(三)海南九節(jié)葉促進骨折愈合提取物的制備稱取海南九節(jié)葉藥材100g，粉碎，過60目篩，加入1500mL蒸餾水浸泡1小時，然
后進行第一次水提取，水提取時間為2個小時，提取完畢，過濾藥渣，收集濾液。藥渣再加入 1500mL蒸餾水進行第二次水提取，提取時間為1.5個小時，提取完畢，過濾藥渣，收集濾液。 藥渣再加入1500mL蒸餾水繼續(xù)進行第三次水提取，提取時間為1個小時，提取完畢，過濾藥渣，收集濾液。合并三次水提液，濃縮，得到水提濃縮液。水提濃縮液經(jīng)真空凍干對小時后， 對凍干粉末進行稱重，計算提取率。結(jié)果約得到12. 5g干燥粉末，海南九節(jié)葉的蒸餾水提取率約為12.5%。海南九節(jié)葉藥渣經(jīng)蒸餾水提取后自然曬干，進行乙醇回流提取。加入約10 倍量95%乙醇進行第一次回流提取，提取時間為2個小時，過濾藥渣，收集濾液。藥渣繼續(xù)加入約10倍量95%乙醇進行第二次回流提取，提取時間為1.5個小時，過濾藥渣，收集濾液。合并兩次乙醇提取液，回收溶劑，得到海南九節(jié)葉的95%乙醇提取浸膏，真空凍干M小時，對凍干粉末進行稱重，計算提取率。結(jié)果約得到3. 7g干燥粉末，海南九節(jié)葉的95%乙醇提取率約為3.7%。實施例二草海桐提取物的制備稱取草海桐藥材100g，粉碎，過60目篩，加入1500mL蒸餾水浸泡1小時，然后進行第一次水提取，水提取時間為2個小時，提取完畢，過濾藥渣，收集濾液。藥渣再加入1500mL 蒸餾水進行第二次水提取，提取時間為1. 5個小時，提取完畢，過濾藥渣，收集濾液。藥渣再加入1500mL蒸餾水繼續(xù)進行第三次水提取，提取時間為1個小時，提取完畢，過濾藥渣，收集濾液。合并三次水提液，濃縮，得到水提濃縮液。水提濃縮液經(jīng)真空凍干M小時后，對凍干粉末進行稱重，計算提取率。結(jié)果約得到12. 5g干燥粉末，草海桐的蒸餾水提取率約為 12.5%。草海桐藥渣經(jīng)蒸餾水提取后自然曬干，進行乙醇回流提取。加入約10倍量95%乙醇進行第一次回流提取，提取時間為2個小時，過濾藥渣，收集濾液。藥渣繼續(xù)加入約10倍量95%乙醇進行第二次回流提取，提取時間為1.5個小時，過濾藥渣，收集濾液。合并兩次乙醇提取液，回收溶劑，得到草海桐的95%乙醇提取浸膏，真空凍干M小時，對凍干粉末進行稱重，計算提取率。結(jié)果約得到3. 7g干燥粉末，草海桐的95%乙醇提取率約為3. %。實施例三落地生根提取物的制備稱取落地生根藥材100g，粉碎，過60目篩，加入1500mL蒸餾水浸泡1小時，然后
進行第一次水提取，水提取時間為2個小時，提取完畢，過濾藥渣，收集濾液。藥渣再加入 1500mL蒸餾水進行第二次水提取，提取時間為1.5個小時，提取完畢，過濾藥渣，收集濾液。 藥渣再加入1500mL蒸餾水繼續(xù)進行第三次水提取，提取時間為1個小時，提取完畢，過濾藥渣，收集濾液。合并三次水提液，濃縮，得到水提濃縮液。水提濃縮液經(jīng)真空凍干對小時后， 對凍干粉末進行稱重，計算提取率。結(jié)果約得到12. 5g干燥粉末，落地生根的蒸餾水提取率約為12.5%。落地生根藥渣經(jīng)蒸餾水提取后自然曬干，進行乙醇回流提取。加入約10倍量95%乙醇進行第一次回流提取，提取時間為2個小時，過濾藥渣，收集濾液。藥渣繼續(xù)加入約10倍量95%乙醇進行第二次回流提取，提取時間為1.5個小時，過濾藥渣，收集濾液。 合并兩次乙醇提取液，回收溶劑，得到落地生根的95%乙醇提取浸膏，真空凍干M小時，對凍干粉末進行稱重，計算提取率。結(jié)果約得到3. 7g干燥粉末，落地生根的95%乙醇提取率約為3. 7%。 以上所揭露的僅為本發(fā)明的較佳實施例而已，當(dāng)然不能以此來限定本發(fā)明之權(quán)利范圍，因此依本發(fā)明權(quán)利要求所作的等同變化，仍屬于本發(fā)明所涵蓋的范圍。
權(quán)利要求
1.一種具有促進骨折愈合作用的中藥提取物的制備方法，其特征在于如下步驟(1)、將海南九節(jié)葉或草海桐或落地生根藥材粉碎，保存?zhèn)溆茫幉姆勰┠繑?shù)為10 60目；O)、將步驟(1)得到的藥材粉末用蒸餾水進行提取，過濾藥渣，合并濾液，濃縮，得到藥材蒸餾水提取濃縮液，干燥，計算提取率；其中提取次數(shù)為1 10次，每次提取時間為 1 10小時，提取溶劑與藥材的物料比(mL/g)為1 1 30 1，干燥方式包括水浴蒸干， 減壓干燥和真空凍干；(3)、將步驟O)中的藥渣曬干，用乙醇進行二次提取，過濾藥渣，合并濾液，回收溶劑， 得到藥材乙醇提取濃縮液，干燥，計算提取率；其中乙醇提取的方式包括回流提取，索式提取和超生提取；乙醇濃度為30% 95%，優(yōu)選95% ；提取次數(shù)為1 10次，每次提取時間為1 15小時，藥材濃縮液的干燥方式包括水浴蒸干，減壓干燥和真空凍干，藥材濃縮液真空凍干的時間包括0 72小時。
2.如權(quán)利要求1所述的具有促進骨折愈合作用的中藥提取物的制備方法，其特征在于所述步驟O)中，藥材粉末用蒸餾水進行提取次數(shù)優(yōu)選為3次，第一次2小時，第二次 15.小時，第三次1小時。
3.如權(quán)利要求1所述的具有促進骨折愈合作用的中藥提取物的制備方法，其特征在于所述步驟( 中，藥材粉末用蒸餾水進行提取，提取提取溶劑與藥材的物料比(mL/g)優(yōu)選為15 1。
4.如權(quán)利要求1所述的具有促進骨折愈合作用的中藥提取物的制備方法，其特征在于所述步驟O)中藥材濃縮液的干燥方式優(yōu)選真空凍干方式，藥材濃縮液真空凍干的時間優(yōu)選為M小時。
5.如權(quán)利要求1所述的具有促進骨折愈合作用的中藥提取物的制備方法，其特征在于所述步驟(3)中的乙醇提取的方式優(yōu)選為回流提取，提取次數(shù)優(yōu)選為2次，第一次提取時間優(yōu)選為2小時，第二次提取時間優(yōu)選為1. 5小時。
6.如權(quán)利要求1所述的具有促進骨折愈合作用的中藥提取物的制備方法，其特征在于所述步驟(3)中藥材濃縮液的干燥方式優(yōu)選為真空凍干方式，藥材濃縮液真空凍干的時間包括優(yōu)選為M小時。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種具有促進骨折愈合作用的中藥提取物的制備方法，其特征在與海南九節(jié)葉、草海桐、落地生根藥材粉碎后，首先應(yīng)用蒸餾水進行提取，提取溶劑與藥材的物料比按照15∶1進行，總共提取3次，每次的提取時間采用等量遞減的方式進行，分別為2小時、1.5小時和1小時。提取完畢，過濾藥渣，收集合并濾液，濃縮，得到藥材的蒸餾水提取濃縮液。藥渣曬干后再應(yīng)用95％乙醇進行回流提取，總共提取2次，提取時間分別為2小時和1.5小時。提取完畢，過濾藥渣，收集合并濾液，回收溶劑，得到藥材的95％乙醇提取濃縮液。以上兩種提取濃縮液經(jīng)真空冷凍干燥24小時后，得到藥材干粉，對藥材真空干燥后得到的干粉進行稱重，分別計算蒸餾水提取和乙醇提取的提取率。
文檔編號A61K36/74GK102429973SQ201110384829
公開日2012年5月2日 申請日期2011年11月28日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月28日
發(fā)明者仁兆平, 張小坡, 李洪福, 鐘霞, 陳年根, 黃劍 申請人:海南醫(yī)學(xué)院