專利名稱：：一種氯法拉濱凍干粉針劑及其制備方法
技術領域：
：本發明一種氯法拉濱凍干粉針劑及其制備方法涉及的是一種氯法拉濱的凍干制劑及其制備方法，通過本發明技術方案制備的氯法拉濱凍干粉針劑用于治療復發和難治的兒童急性淋巴細胞白血病。技術背景白血病是血液系統的惡性腫瘤，發病率約2-4/10萬人口，小兒白血病居小兒各種惡性腫瘤的首位。好發年齡從出生到14歲，波及整個小兒年齡時期，但以2-5歲多見。是15歲以下兒童主要死亡原因之一。根據發病的急緩、臨床、血液及骨髓表現等，一般分為急性與慢性。其中，以急性白血病為主，占小兒白血病總數的97%。急性白血病又可分為急性淋巴細胞白血病及急性非淋巴細胞白血病。前者占70-85%，白血病在我國和世界各地都不少見。在我國各種惡性腫瘤死亡率中居第六或第七位。現在國內對小兒白血病的治療已經有相當的水平，一般情況下，急性髓系白血病完全緩解率為60%,成人急性淋巴細胞性白血病完全緩解率可達70%,兒童急性淋巴細胞白血病完全緩解率可達90%。緩解期大多無癥狀，?？烧９ぷ骱蜕?，但化療緩解后易復發、病情惡化、免疫力破壞、全身衰竭，二次化療白細胞產生耐藥，給治療帶來難度，這種病人生存期大大縮短，急性白血病不治療，一般生存期3-6個月，慢性粒細胞白血病生存期一般3-4，年急變后中位生存期只有4個月。盡管白血病的治療取得了一些進步，但抵抗性的形成仍是兒童死于癌癥的主要原因，因此必需尋找新的抗白血病藥物和治療方法。氯法拉濱(clofarabirO,由美國阿拉巴馬州伯明翰市南方研究所研制，并授權英國Bioenvision公司和美國LLexOncology公司共同開發。經多項臨床研究表明，氯法拉濱對兒童急性淋巴細胞白血病(ALL)和急性髓系白血病(AML)確有較好的療效，可用于頑固性和復發性的ALL和AML,且耐受性良好。2004年12月28日己被美國FDA批準上市，商品名Clolar，主要用于治療復發和難治的ALL。由于氯法拉濱微溶于水，溶解度僅為1.52.0mg/ml，其水溶液在放置過程中會有微粒析出。美國上市制劑Clolar注射液為20mg氯法拉濱溶于20ml注射用水中，并用氯化鈉調節等滲，靜脈輸注前需先用0.2"01微孔濾膜過濾，再用5%葡萄糖輸液或0.9%氯化鈉輸液稀釋，給臨床應用帶來了很大不便。另外，國外注射液采用西林瓶分裝20ml氯法拉濱溶液再滅菌的制劑工藝，由于西林瓶壁較普通安瓿厚很多，傳熱差，20ml又屬于較大的體積，要保證分裝的氯法拉濱溶液無菌需要較高滅菌竭度，過高的滅菌溫度除使受熱易變形鋁塑組合蓋存在變形的可能，還有可能使氯法拉濱發生降解。同時，氯法拉濱的溶解度受溫度影響明顯，在冬季氣候很冷的北方地區的儲存過程中就有可能析出，導致藥物的浪費甚至對臨床用藥安全帶來隱患。因此，如何制備溶解性和穩定性更好的氯法拉濱注射劑一直是人們試圖解決的問題。中國專利200610038329.2，200610045474.3及200610038023.7提出了在處方中加入大劑量的增溶劑或者用特定的酸提高氯法拉濱溶解度的制劑方案，但眾所周知，增溶劑吐溫、聚乙二醇、泊洛沙姆、丙二醇和聚氧乙烯蓖麻油等都有一定的溶血性，有的增溶劑如聚氧乙烯蓖麻油還會引起嚴重的過敏反應，加入過多的酸會增加注射液對人體的刺激性，引發的疼痛往往需要額外加入苯甲醇。這些制劑方案在解決原制劑缺陷的同時帶來了新的缺陷，其他公知技術也沒有改善這些缺陷的建議。
發明內容本發明的目的是針對以上不足之處提供一種氯法拉濱凍干粉針劑，通過該方案制備的氯法拉濱凍干粉針劑，不需要加入增溶劑，也不需要用過量的酸來提高氯法拉濱溶解度，具有最小的人體刺激性和最大的臨床用藥安全性，采用非最終滅菌的無菌過濾工藝作為無菌保障，不需高溫滅菌，也沒有高溫滅菌帶來的鋁塑組合蓋存變形和氯法拉濱的降解，臨床使用方便，復溶迅速，穩定性好，不會析出。要想解決國外氯法拉濱注射液靜脈高溫滅菌時鋁塑組合蓋可能變形、氯法拉濱可能降解以及儲存過程中可能析出導致的藥物浪費和臨床用藥安全隱患等問題，最好的辦法就是將氯法拉濱制成凍干制劑。通常的，將溶解性差的藥物制備成凍干制劑，公知技術往往是采用加入表面活性劑等增溶劑以及用輔料對藥物進行包裹等手段增溶，這類方法往往帶來溶血和過敏反應，用輔料對藥物進行包裹還會改變藥物的體內行為；或者是將溶液調節到溶解性能最佳的酸堿度，這類方法有可能超出人體的酸堿耐受限度而導致較大的刺激和疼痛；又或者是配備適宜的專用溶劑，這類方法使得生產和包裝成本大大增加，臨床使用變得不便，專用溶劑中含有的許多有機溶劑同時還會導致溶血和刺激性。經過研究認為，氯法拉濱制成凍干的主要困難是如何將氯法拉濱溶解在適宜凍干的體積的溶液中(解決氯法拉濱溶解性差的問題)，如何防止灌裝于西林瓶中的氯法拉濱溶液在凍干過程中析出導致分層(解決氯法拉濱溶解度受溫度影響明顯低溫易析出的問題)，以及凍干成形后復溶的問題。通過試驗發現，采用適當的體積，這個體積通常是8~14ml，可以保證氯法拉濱溶液在灌裝過程中不會析出，但凍干過程中氯法拉濱在溶液完全固化之前便幾乎全部析出，凍干后不成形，加入20ml注射用水也無法復溶。進一步的試驗發現，每支加入適量的甘露醇或乳糖，可以減緩氯法拉濱從溶液析出，但凍干過程中氯法拉濱在溶液完全固化之前仍大量析出，凍干后分層，加入20ml注射用水也無法復溶。最后，本發明研究發現，氯法拉濱凍干無法復溶不是溶解度不夠，而是采用普通方法凍干所得粉末溶解速度過于緩慢所至。通過試驗，將氯法拉濱輕微加熱溶解于注射用水(814ml/支)中，再加入不低于200mg/支的甘露醇或乳糖，攪拌使其溶解并混合均勻，濾液灌裝于25ml或30ml西林瓶中，部分塞上丁基橡膠塞，裝盤，預先開啟凍干機，利用導熱油對板層制冷，直至板層溫度達到"4045'C，迅速將灌裝于無菌西林瓶中的氯法拉濱溶液送入凍干機，關閉箱門，并保持板層溫度"40^45'C使品溫下降，當樣品達到4(TC時，停止板冷，開啟冷凝器，同時利用摻冷繼續保持該品溫3小時，當冷凝器溫度達4(TC時，開啟真空系統，保溫結束后開始分階段升溫升華，第一階段升華迅速將板層溫度升至-10°C，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當品溫達到-2(TC時開始第二階段升華，迅速將板層溫度升至IO'C，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當品溫達到O'C時開始第三階段升華，迅速將板層溫度升至35'C，其間將前箱真空控制在1015Pa之間，當品溫達到30'C開始解析干燥，真空不控制，保持該溫度3小時，當關閉中隔閥前箱真空無明顯下降后后，壓塞，出箱，軋口，質檢，包裝即得氯法拉濱凍干粉針劑。所得的氯法拉濱凍干粉針凍干過程中無氯法拉濱析出，凍干后成形良好，獲得了溶解性能較常規凍干結晶優良的晶型，因而加入注射用水迅速復溶，徹底解決了氯法拉濱注射劑的上述問題。一種氯法拉濱凍干粉針劑及其制備方法是采用以下方案實現的一種氯法拉濱凍干粉針劑，含有活性成分氯法拉濱以及至少一種生物可接受的賦形劑，氯法拉濱和生物可接受的賦形劑的重量配比為1:1050。所述的氯法拉濱和生物可接受的賦形劑的重量配比優選為1:15~30。所述的氯法拉濱的化學名稱為2-氯-9-(2-去氧-2-氟-e-0-阿拉伯呋喃)-'犯-嘌呤-6-胺，結構式為所述的生物可接受的賦形劑選自甘露醇和乳糖中的一種，優選的是甘露醇。一種氯法拉濱凍干粉針劑的制備方法，其特征在于其制備方法為取氯法拉濱置無菌容器中，加入注射用水，輕微加熱使溶解，再加入賦形劑，攪拌使其溶解并混合均勻，測定中間體含量，合格后在無菌條件下，用0.22ym微孔濾膜過濾至澄明，濾液灌裝于無菌的西林瓶中，部分塞上丁基橡膠塞，裝盤，預先開啟凍干機，利用導熱油對板層制冷，直至板層溫度達到4045'C，迅速將灌裝于無菌西林瓶中的氯法拉濱溶液送入凍干機，關閉箱門，并保持板層溫度"4045TM吏品溫下降，當祥品達到40'C時，停止板冷，開啟冷凝器，同時利用摻冷繼續保持該品溫3小時，當冷凝器溫度達-40'C時，開啟真空系統，保溫結束后開始分階段升溫升華，第一階段升華迅速將板層溫度升至-IO'C，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當品溫達到-2(TC時開始第二階段升華，迅速將板層溫度升至l(TC，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當分子式為C1()HC1FN503分子量為303.7品溫達到O'C時開始第三階段升華，迅速將板層溫度升至35。C，其間將前箱真空控制在1015Pa之間，當品溫達到3(TC開始解析干燥，真空不控制，保持該溫度35小時，當關閉中隔閥前箱真空無明顯下降后后，壓塞，出箱，軋口，質檢，包裝；所述的氯法拉濱和生物可接受的賦形劑的重量配比為1:1050,優選的是l:1530。所述的生物可接受的賦形劑選自甘露醇和乳糖中的一種，優選的是甘露醇。所述的氯法拉濱和注射用水的重量配比為1:400700，優選的是l:500。所述的西林瓶體積選自25ml和30ml。所述的氯法拉濱凍干粉針劑，在使用大劑量甘露醇作為賦形劑時，還可以加入氯化鈉以防止內容物在-20-25'C因氫鍵斷裂急劇膨脹導致的炸瓶。所述氯化鈉占所述凍干粉針劑重量的1~5%。本發明一種氯法拉濱凍干粉針劑，通過該方案不需要加入增溶劑，沒有增溶劑吐溫、聚乙二醇、泊洛沙姆、丙二醇和聚氧乙烯蓖麻油等帶來的溶血性和過敏反應，也不需要用過量的酸來提高氯法拉濱溶解度，避免了加入過多的酸引發刺激性和疼痛。由于采用的都是最常規的安全性有充分保證的注射級輔料，因而有最小的人體刺激性和最大的臨床用藥安全性。采用非最終滅菌的無菌過濾工藝作為無菌保障，不需高溫滅菌，避免了高溫滅菌帶來的鋁塑組合蓋存變形和氯法拉濱的降解。采用特殊的凍干工藝，凍干過程中無氯法拉濱析出，凍干后成形良好，獲得了溶解性能較常規凍干結晶優良的晶型，復溶迅速，穩定性好，復溶輸液不會析出，臨床使用方便。本發明大大提高了氯法拉濱凍干粉針劑在制備過程中的穩定性，制備所得的氯法拉濱凍干粉針劑有關物質含量更低，質量均一穩定，貯存和運輸更加方便。本發明制備工藝簡單，方便可行，重復性好，很容易實現工業化大生產，凍干時間短，廢品率低，燈檢剔廢難度低，節約人力，較短的生產周期、較低的廢品率和更低的人力成本，使生產成本大幅度降低，作為復發和難治的兒童急性淋巴細胞白血病臨床治療的又一個可靠選擇，可以產生可觀的經濟和社會效益。具體實施方式下面通過實施例來進一步說明本發明。應該正確理解的是本發明的實施例僅僅是用于說明本發明而給出，而不是對本發明的限制，所以，在本發明的方法前提下對本發明的簡單改進均屬本發明要求保護的范圍。實施例l:普通方法制備氯法拉濱凍干粉針劑(-25'C)處方氯法拉濱20g甘露醇500g注射用水.加至15000ml共制成1000瓶取處方量氯法拉濱置容器中，加80%量的注射用水，攪拌使其溶解并混合均勻，再加入處方量甘露醇，攪拌使其溶解并混合均勻，測定中間體含量，合格后加入注射用水定容至全量，在無菌條件下，用0.22ym微孔濾膜過濾至澄明，濾液灌裝于無菌的西林瓶中，部分塞上丁基橡膠塞，裝盤，送入凍干機，關閉箱門，開啟凍干機，利用導熱油對板層制冷，使品溫下降，當樣品達到共熔點時(約-IO'C)，繼續冷凍至品溫低于-25'C時，停止板冷，開啟冷凝器，當冷凝器溫度達"4(TC時，開啟真空系統，開始升溫升華，品溫控制在每小時上升23'C,當品溫升達IO'C以上時，使品溫每小時上升45'C，最后干燥溫度品溫為35'C，保持該溫度3小時后，壓塞，出箱，軋口。在凍干過程中通過觀察窗發現氯法拉濱在預凍階段溶液完全固化之前大量析出，凍干后所得氯法拉濱凍干粉針劑分層，加入20ml注射用水無法復溶。有極少量炸瓶。實施例2:普通方法制備氯法拉濱凍干粉針劑("40'C)處方氯法拉濱20g甘露醇800g注射用水加至15000ml共制成1000瓶取處方量氯法拉濱置容器中，加80%量的注射用水，攪拌使其溶解并混合均勻，再加入處方量甘露醇，攪拌使其溶解并混合均勻，測定中間體含量，合格后加入注射用水定容至全量，在無菌條件下，用0.22"m微孔濾膜過濾至澄明，濾液灌裝于無菌的西林瓶中，部分塞上丁基橡膠塞，裝盤，送入凍干機，關閉箱門，開啟凍千機，利用導熱油對板層制冷，使品溫下降，當樣品達到共熔點時(約-l(TC)，繼續冷凍至品溫低于4(TC時，停止板冷，開啟冷凝器，當冷凝器溫度達"40'C時，開啟真空系統，開始升溫升華，品溫控制在每小時上升23'C，當品溫升達IO'C以上時，使品溫每小時上升45°C,最后干燥溫度品溫為35'C，保持該溫度3小時后，壓塞，出箱，軋口。在凍干過程中通過觀察窗發現氯法拉濱在預凍階段溶液完全固化之前大量析出，凍干后所得氯法拉濱凍干粉針劑分層，加入20ml注射用水無法復溶。有少量炸瓶。實施例3:處方氯法拉濱20g甘露醇200g注射用水加至8000m共制成1000瓶取處方量氯法拉濱置無菌容器中，加入注射用水，輕微加熱使溶解，再加入處方量甘露醇，攪拌使其溶解并混合均勻，測定中間體含量，合格后在無菌條件下，用0.22nm微孔濾膜過濾至澄明，濾液灌裝于無菌的25ml西林瓶中，部分塞上丁基橡膠塞，裝盤，預先開啟凍干機，利用導熱油對板層制冷，直至板層溫度達到"4045'C，迅速將灌裝于無菌西林瓶中的氯法拉濱溶液送入凍干機，關閉箱門，并保持板層溫度"4045'C使品溫下降，當樣品達到"40'C時，停止板冷，開啟冷凝器，同時利用摻冷繼續保持該品溫3小時，當冷凝器溫度達40。C時，開啟真空系統，保溫結束后開始分階段升溫升華，第一階段升華迅速將板層溫度升至-10'C，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當品溫達到-2(TC時開始第二階段升華，迅速將板層溫度升至IO'C,其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當品溫達到O'C時開始第三階段升華，迅速將板層溫度升至35°C，其間將前箱真空控制在1015Pa之間，當品溫達到3(TC開始解析干燥，真空不控制，保持該溫度3小時，當關閉中隔閥前箱真空無明顯下降后后，壓塞，出箱，軋口，質檢，包裝即得氯法拉濱凍干粉針劑。在凍干過程中通過觀察窗發現在預凍階段溶液完全固化之前無析氯法拉濱出，凍干后所得氯法拉濱凍干粉針劑外形良好，加入20ml注射用水迅速復溶。無炸瓶。實施例4:處方氯法拉濱20g乳糖200g注射用水加至8000ml共制成1000瓶取處方量氯法拉濱置無菌容器中，加入注射用水，輕微加熱使溶解，再加入處方量乳糖，攪拌使其溶解并混合均勻，測定中間體含量，合格后在無菌條件下，用0.22um微孔濾膜過濾至澄明，濾液灌裝于無菌的25ml西林瓶中，部分塞上丁基橡膠塞，裝盤，預先開啟凍干機，利用導熱油對板層制冷，直至板層溫度達到40^45°C，迅速將灌裝于無菌西林瓶中的氯法拉濱溶液送入凍干機，關閉箱門，并保持板層溫度"40^45'C使品溫下降，當樣品達到"4(TC時，停止板冷，開啟冷凝器，同時利用摻冷繼續保持該品溫3小時，當冷凝器溫度達40'C時，開啟真空系統，保溫結束后開始分階段升溫升華，第一階段升華迅速將板層溫度升至-10'C，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當品溫達到-2(TC時開始第二階段升華，迅速將板層溫度升至l(TC，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當品溫達到0。C時開始第三階段升華，迅速將板層溫度升至35'C，其間將前箱真空控制在1015Pa之間，當品溫達到30'C開始解析干燥，真空不控制，保持該溫度3小時，當關閉中隔閥前箱真空無明顯下降后后，壓塞，出箱，軋口，質檢，包裝即得氯法拉濱凍干粉針劑。在凍干過程中通過觀察窗發現在預凍階段溶液完全固化之前無析氯法拉濱出，凍干后所得氯法拉濱凍干粉針劑外形良好，加入20ml注射用水迅速復溶。實施例5:處方氯法拉濱20g甘露醇500g注射用水加至10000ml共制成1000瓶取處方量氯法拉濱置無菌容器中，加入注射用水，輕微加熱使溶解，再加入處方量甘露醇，攪拌使其溶解并混合均勻，測定中間體含量，合格后在無菌條件下，用0.22Pm微孔濾膜過濾至澄明，濾液灌裝于無菌的30ml西林瓶中，部分塞上丁基橡膠塞，裝盤，預先開啟凍干機，利用導熱油對板層制冷，直至板層溫度達到"4045t:，迅速將灌裝于無菌西林瓶中的氯法拉濱溶液送入凍干機，關閉箱門，并保持板層溫度"4045'C使品溫下降，當樣品達到40'C時，停止板冷，開啟冷凝器，同時利用摻冷繼續保持該品溫3小時，當冷凝器溫度達40'C時，開啟真空系統，保溫結束后開始分階段升溫升華，第一階段升華迅速將板層溫度升至-1(TC，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當品溫達到-2(TC時開始第二階段升華，迅速將板層溫度升至IO'C，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當品溫達到O'C時開始第三階段升華，迅速將板層溫度升至35°C，其間將前箱真空控制在1015Pa之間，當品溫達到30'C開始解析干燥，真空不控制，保持該溫度4小時，當關閉中隔閥前箱真空無明顯下降后后，壓塞，出箱，軋口，質檢，包裝即得氯法拉濱凍干粉針劑。在凍干過程中通過觀察窗發現在預凍階段溶液完全固化之前無析氯法拉濱出，凍千后所得氯法拉濱凍干粉針劑外形良好，加入20ml注射用水迅速復溶。有極少量炸瓶。實施例6:處方氯法拉濱20g甘露醇500g氯化鈉25g注射用水加至10000ml共制成1000瓶取處方量氯法拉濱置無菌容器中，加入注射用水，輕微加熱使溶解，再加入處方量甘露醇和氯化鈉，攪拌使其溶解并混合均勻，測定中間體含量，合格后在無菌條件下，用0.22um微孔濾膜過濾至澄明，濾液灌裝于無菌的30ml西林瓶中，部分塞上丁基橡膠塞，裝盤，預先開啟凍干機，利用導熱油對板層制冷，直至板層溫度達到^045'C,迅速將灌裝于無菌西林瓶中的氯法拉濱溶液送入凍干機，關閉箱門，并保持板層溫度40^45'C使品溫下降，當樣品達到"4(TC時，停止板冷，開啟冷凝器，同時利用摻冷繼續保持該品溫3小時，當冷凝器溫度達"40'C時，開啟真空系統，保溫結束后開始分階段升溫升華，第一階段升華迅速將板層溫度升至-l(TC,其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當品溫達到-2(TC時開始第二階段升華，迅速將板層溫度升至l(TC，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當品溫達到O'C時開始第三階段升華，迅速將板層溫度升至35'C,其間將前箱真空控制在1015Pa之間，當品溫達到3(TC開始解析干燥，真空不控制，保持該溫度4小時，當關閉中隔閥前箱真空無明顯下降后后，壓塞，出箱，軋口，質檢，包裝即得氯法拉濱凍干粉針劑。在凍干過程中通過觀察窗發現在預凍階段溶液完全固化之前無析氯法拉濱出，凍干后所得氯法拉濱凍干粉針劑外形良好，加入20ml注射用水迅速復溶。無炸瓶。實施例7:處方氯法拉濱20g甘露醇lOOOg氯化納10g注射用水加至M000ml共制成1000瓶取處方量氯法拉濱置無菌容器中，加入注射用水，輕微加熱使溶解，再加入處方量甘露醇和氯化納，攪拌使其溶解并混合均勻，測定中間體含量，合格后在無菌條件下，用0.22"m微孔濾膜過濾至澄明，濾液灌裝于無菌的30ml西林瓶中，部分塞上丁基橡膠塞，裝盤，預先開啟凍干機，利用導熱油對板層制冷，直至板層溫度達到"40"45'C，迅速將灌裝于無菌西林瓶中的氯法拉濱溶液送入凍干機，關閉箱門，并保持板層溫度~40^45'C使品溫下降，當樣品達到40'C時，停止板冷，開啟冷凝器，同時利用摻冷繼續保持該品溫3小時，當冷凝器溫度達40'C時，開啟真空系統，保溫結束后開始分階段升溫升華，第一階段升華迅速將板層溫度升至-l(TC，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當品溫達到-20'C時開始第二階段升華，迅速將板層溫度升至IO'C，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當品溫達到0'C時開始第三階段升華，迅速將板層溫度升至35'C，其間將前箱真空控制在1015Pa之間，當品溫達到30'C開始解析干燥，真空不控制，保持該溫度5小時，當關閉中隔閥前箱真空無明顯下降后后，壓塞，出箱，軋口，質檢，包裝即得氯法拉濱凍干粉針劑。在凍干過程中通過觀察窗發現在預凍階段溶液完全固化之前無析氯法拉濱出，凍干后所得氯法拉濱凍千粉針劑外形良好，加入20ml注射用水迅速復溶。無炸瓶。實施例8:<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>取處方量氯法拉濱置無菌容器中，加入注射用水，輕微加熱使溶解，再加入處方量甘露醇和氯化納，攪拌使其溶解并混合均勻，測定中間體含量，合格后在無菌條件下，用0.22um微孔濾膜過濾至澄明，濾液灌裝于無菌的30ml西林瓶中，部分塞上丁基橡膠塞，裝盤，預先開啟凍干機，利用導熱油對板層制冷，直至板層溫度達到40~45'C,迅速將灌裝于無菌西林瓶中的氯法拉濱溶液送入凍干機，關閉箱門，并保持板層溫度4045'C使品溫下降，當樣品達到4(TC時，停止板冷，開啟冷凝器，同時利用摻冷繼續保持該品溫3小時，當冷凝器溫度達4(TC時，開啟真空系統，保溫結束后開始分階段升溫升華，第一階段升華迅速將板層溫度升至-10'C，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當品溫達到-2(TC時開始第二階段升華，迅速將板層溫度升至IO'C，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當品溫達到O'C時開始第三階段升華，迅速將板層溫度升至35'C，其間將前箱真空控制在1015Pa之間，當品溫達到30'C開始解析干燥，真空不控制，保持該溫度5小時，當關閉中隔閥前箱真空無明顯下降后后，壓塞，出箱，軋口，質檢，包裝即得氯法拉濱凍干粉針劑。在凍干過程中通過觀察窗發現在預凍階段溶液完全固化之前無析氯法拉濱出，凍干后所得氯法拉濱凍干粉針劑外形良好，加入20ml注射用水迅速復溶。無炸瓶。實施例9:處方氯法拉濱20g乳糖800g注射用水加至10000ml共制成1000瓶取處方量氯法拉濱置無菌容器中，加入注射用水，輕微加熱使溶解，再加入處方量乳糖，攪拌使其溶解并混合均勻，測定中間體含量，合格后在無菌條件下，用0.22ym微孔濾膜過濾至澄明，濾液灌裝于無菌的30ml西林瓶中，部分塞上丁基橡膠塞，裝盤，預先開啟凍干機，利用導熱油對板層制冷，直至板層溫度達到4045t:,迅速將灌裝于無菌西林瓶中的氯法拉濱溶液送入凍干機，關閉箱門，并保持板層溫度"4045'C使品溫下降，當樣品達到"4(TC時，停止板冷，開啟冷凝器，同時利用摻冷繼續保持該品溫3小時，當冷凝器溫度達一(TC時，幵啟真空系統，保溫結束后開始分階段升溫升華，第一階段升華迅速將板層溫度升至-l(TC，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當品溫達到-20'C時開始第二階段升華，迅速將板層溫度升至l(TC,其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當品溫達到O'C時開始第三階段升華，迅速將板層溫度升至35'C,其間將前箱真空控制在1015Pa之間，當品溫達到30'C開始解析干燥，真空不控制，保持該溫度5小時，當關閉中隔閥前箱真空無明顯下降后后，壓塞，出箱，軋口，質檢，包裝即得氯法拉濱凍干粉針劑。在凍干過程中通過觀察窗發現在預凍階段溶液完全固化之前無析氯法拉濱出，凍干后所得氯法拉濱凍干粉針劑外形良好，加入20ml注射用水迅速復溶。實施例10:氯法拉濱凍干粉針劑有關物質測定照高效液相色譜法(中國藥典2005年版二部)測定色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-水(12.5:87.5)為流動相；柱溫為35'C，檢測波長為263nm。精密稱取氯法拉濱對照品、a-異構體適量，加流動相溶解并稀釋制成每lml中各含0.05mg的溶液，精密量取20pl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，氯法拉濱峰與a-異構體峰之間分離度符合規定，理論塔板數以氯法拉濱峰計不低于2000。取氯法拉濱凍干粉針劑內容物適量，加流動相溶解并制成每lml中約含0.5mg的溶液，作為供試品溶液。精密量取lml，置100ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。精密量取對照溶液20nl，注入液相色譜儀，調節檢測靈敏度，使氯法拉濱峰的峰高約為滿量程的20%~30%。精密量取供試品溶液和對照溶液各2(^1，分別注入液相色譜儀，記錄供試品色譜圖至主成分峰保留時間的45倍。供試品溶液色譜圖中如顯雜質峰，量取除輔料峰外各雜質峰面積之和，計算即得氯法拉濱凍干粉針劑有關物質百分含量。實施例U:氯法拉濱凍干粉針劑含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2005年版二部)測定色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-水(12.5:87.5)為流動相；柱溫為35°C，檢測波長為263nm。精密稱取氯法拉濱對照品、ct-異構體適量，加流動相溶解并稀釋制成每lml中各含0.05mg的溶液，精密量取20pl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，氯法拉濱峰與a-異構體峰之間分離度符合規定，理論塔板數以氯法拉濱峰計不低于2000。取氯法拉濱凍干粉針劑內容物，混勻，精密稱取適量，加流動相溶解并稀釋成每lml中約含O.Olmg的溶液，精密量取20^1注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取氯法拉濱對照品適量，加流動相稀釋成每lml中含O.Olmg的溶液，同法測定，按外標法以峰面積計算，即得氯法拉濱凍干粉針劑的含量。實施例12:氯法拉濱凍干粉針劑水分測定取氯法拉濱凍干粉針劑內容物，照水分測定法(中國藥典2005年版二部)測定。實施例13:取所述氯法拉濱凍干粉針劑，按實施例10、實施例11、及實施例12進行加速(40°C±2°C、RH75%±5%)和長期(25°C±2°C、RH60%±10%)條件下放置進行穩定性試驗考察，實驗結果見表l、表2。表1注射用氯法拉濱加速試驗考察結果<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>表2注射用氯法拉濱長期試驗考察結果<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>定試驗結果表明，所述氯法拉濱凍干粉針劑經加速試驗(40'C±2°C、RH75%±5%)放置6個月，經長期試驗(25。C±2°C、RH60%±10%)留樣6個月，各項考察指標，包括性狀、溶液的顏色和澄清度、酸度、含量、有關物質、無菌等與放置前比較均無明顯變化，質量穩定可靠。實施例14:取所述氯法拉濱凍干粉針劑經南京醫科大學溶血試驗，確定氯法拉濱凍干粉針劑在試管內終濃度為0.04mg/ml時對兔紅細胞無溶血現象，臨床使用對人體不會造成溶血。實施例15:取所述氯法拉濱凍干粉針劑經南京醫科大學豚鼠全身主動過敏試驗，未見動物有抓鼻、噴嚏、豎毛、抽搐等過敏癥狀發生，表明氯法拉濱凍干粉針劑對豚鼠無明顯致敏作用。實施例16:取所述氯法拉濱凍干粉針劑經南京醫科大學對兔血管壁刺激試驗，肉眼觀察，給藥側耳緣靜脈未見充血水腫等刺激現象。組織學檢查顯示，給藥側靜脈內皮細胞結構基本完整，無炎性細胞浸潤等病理改變。表明氯法拉濱凍干粉針劑對兔耳緣靜脈無明顯刺激反應。權利要求1、一種氯法拉濱凍干粉針劑，其特征在于含有活性成分氯法拉濱以及至少一種生物可接受的賦形劑，氯法拉濱和生物可接受的賦形劑的重量配比為1:2、根據權利要求1所述的氯法拉濱凍干粉針劑，其特征在于所述的氯法拉濱和生物可接受的賦形劑的重量配比優選為1:15~30。3、根據權利要求1所述的氯法拉濱凍干粉針劑，其特征在于所述的氯法拉濱的化學名稱為2-氯-9-(2-去氧-2-氟-e-D-阿拉伯呋喃)-9H-嘌呤-6-胺，結構式為4、根據權利要求1所述的氯法拉濱凍干粉針劑，其特征在于所述的生物可接受的賦形劑選自甘露醇和乳糖中的一種，優選的是甘露醇。5、權利要求1所述的氯法拉濱凍干粉針劑的制備方法，其特征在于其制備方法為取氯法拉濱置無菌容器中，加入注射用水，輕微加熱使溶解，再加入賦形劑，攪拌使其溶解并混合均勻，測定中間體含量，合格后在無菌條件下，用0.22um微孔濾膜過濾至澄明，濾液灌裝于無菌的西林瓶中，部分塞上丁基橡膠塞，裝盤，預先開啟凍干機，利用導熱油對板層制冷，直至板層溫度達到"4045'C，迅速將灌裝于無菌西林瓶中的氯法拉濱溶液送入凍干機，關閉箱門，并保持板層溫度"40^45'C使品溫下降，當樣品達到KTC時，停止板冷，開啟冷凝1050。分子式為C1QHC1FN503分子量為303.7器，同時利用摻冷繼續保持該品溫3小時，當冷凝器溫度達"4(TC時，開啟真空系統，保溫結束后開始分階段升溫升華，第一階段升華迅速將板層溫度升至-10'C，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當品溫達到-20'C時開始第二階段升華，迅速將板層溫度升至IO'C，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當品溫達到0。C時開始第三階段升華，迅速將板層溫度升至35'C，其間將前箱真空控制在1015Pa之間，當品溫達到30'C開始解析干燥，真空不控制，保持該溫度35小時，當關閉中隔閥前箱真空無明顯下降后后，壓塞，出箱，軋口，質檢，包裝；所述的氯法拉濱和生物可接受的賦形劑的重量配比為1:1050，優選的是l:1530。6、根據權利要求5所述的氯法拉濱凍干粉針劑的制備方法，其特征在于所述的生物可接受的賦形劑選自甘露醇和乳糖中的一種，優選的是甘露醇。7、根據權利要求5所述的氯法拉濱凍干粉針劑的制備方法，其特征在于所述的氯法拉濱和注射用水的重量配比為1:400700，優選的是l:500。8、根據權利要求5所述的氯法拉濱凍干粉針劑的制備方法，其特征在于所述的西林瓶體積選自25ml和30ml。9、根據權利要求5所述的氯法拉濱凍干粉針劑的制備方法，其特征在于使用甘露醇作為賦形劑時，還可以加入氯化鈉。10、根據權利要求5所述的氯法拉濱凍干粉針劑的制備方法，其特征在于所述氯化鈉占所述凍干粉針劑重量的1~5%。全文摘要本發明涉及一種氯法拉濱凍干粉針劑及其制備方法，含有氯法拉濱以及至少一種生物可接受的賦形劑，氯法拉濱和賦形劑的重量配比為1∶10～50，所述的賦形劑選自甘露醇和乳糖中的一種，優選的是甘露醇。其制備方法為取氯法拉濱加注射用水使溶，再加入賦形劑，攪拌混勻，過濾，灌裝，部分加塞，裝盤，預先開啟凍干機，利用導熱油對板層制冷，直至板層溫度達到-40～-45℃，迅速將灌裝于無菌西林瓶中的氯法拉濱溶液送入凍干機，關閉箱門，并保持板層溫度-40～-45℃使品溫下降，當樣品達到-40℃時，停止板冷，開啟冷凝器，同時利用摻冷繼續保持該品溫3小時，當冷凝器溫度達-40℃時，開啟真空系統，保溫結束后開始分四階段升溫升華干燥，壓塞，出箱，軋口。文檔編號A61P35/00GK101120925SQ20071013090公開日2008年2月13日申請日期2007年8月23日優先權日2007年8月23日發明者東葉,艷戴,王宏響申請人:江蘇奧賽康藥業有限公司