專利名稱：新的甾酯類的制作方法
技術領域：
本發明涉及新的、具有消炎和抗過敏活性的化合物及其制備方法。本發明還涉及含有這些化合物的藥物組合物和所述組合物的藥理學應用方法。
本發明的目的是提供具有消炎、免疫抑制和抗過敏活性的糖皮質甾類或其藥物組合物，所述糖皮質甾類或其藥物組合物在給藥部位(如呼吸道內、皮膚上、直腸內、關節內或眼內)具有很高的活性，在將其直接給于既定的目標區域時，由此而造成的糖皮質激素全身反應很低。
本發明的另一目的是為了改善藥物釋放和最大限度地降低治療副作用，提供了含有脂質體的藥物組合物，該脂質體包覆著本發明的具有藥理活性的甾族脂肪酸酯。
糖皮質甾類(GCS)是用于緩解氣喘和鼻炎的最有價值的藥物。一般認為GCS在呼吸道和肺組織內通過消炎和抗過敏作用而發揮其療效。但由于它們在肺區外會引起嚴重的副作用，這就大大限制了GCS的長期口服應用。因此，一般只有極少數患者能夠耐受口服GCS治療。采用吸入法給予GCS較為安全。但是，目前臨床上廣泛使用的有效的吸入GCS(氯地米松17α，21-二丙酸酯和丁地去炎松)安全范圍相當窄，據報道，采用推薦吸入劑量的上限服用上述兩個藥物，會在全身循環體系內引起不希望的GCS作用。
脂質體是由與親水性腔隙交替的同心雙分子脂質層列組成的膜樣囊泡。為改善藥物釋放并最大限度地降低治療的副反應，已將脂質體用作不同種類的藥物活性化合物的載體。
糖皮質甾類只能以很低的濃度摻入脂質體，并且在囊泡中的滯留時間很短。將GCS的21位用脂肪酸酯化，可以增加該甾類在囊泡中的摻入程度和滯留時間。已經證實該脂肪酸鏈起著疏水性“固定器(anchor)”的作用，該“固定器”將甾核束縛在磷脂的水合極性頭部基團中，由此改善了糖皮質甾類和脂質體之間的相互作用。
已有文獻(M.De Silva等人，Lancet 8130，1320(1979))描述了用于治療的脂質體包覆的糖皮質甾類，美國專利說明書4693999號描述了用于吸入的糖皮質甾類的脂質體制劑。
本發明的目的之一是提供新的GCS化合物。所述新化合物的特征是在用藥部位具有消炎、免疫抑制和抗過敏的效力，特別是它們可以明顯地改善該效力與在治療區域外誘發GCS作用的活性之間的關系。當用藥部位是在呼吸道內時，吸入法是所述新化合物的優選給藥方式。
本發明的另一目的是提供一種具有消炎和抗過敏作用的、用于局部給藥(主要用于呼吸道)的、含有甾族酯脂質體的藥物組合物。這種組合物通過延長甾族酯在呼吸道的滯留時間、并使藥物定向地作用于特定的靶細胞來改進甾族酯的治療性質。
本發明化合物可用下式Ⅰ或其立體異構體來表征
式中，1，2-位之間為飽和的或者是雙鍵，R1是氫或含有1-4個碳原子的直鏈或支鏈烴鏈，R2是氫或含有1-10個碳原子的直鏈或支鏈烴鏈，R3是含有1-20個碳原子、直鏈或支鏈、飽和或不飽和的烴鏈的酰基，X1是氫或鹵素，X2是氫或鹵素，其前提是1)R1和R2不能同時為氫，2)X1和X2不能同時為氫，3)當1，2-位是雙鍵時，R1和R2不能同時為甲基，4)當1，2-位是雙鍵、R1是氫原子而R2是含有1-10個碳原子的直鏈或支鏈烴鏈時，R3是含有11-20個碳原子的?；?br> 所述?；苌?br> CH3COOH乙酸;
C2H5COOH丙酸;
C3H7COOH丁酸;
C4H9COOH戊酸;
C5H11COOH己酸;
C6H13COOH庚酸;
C7H15COOH辛酸;
C8H17COOH壬酸;
C9H19COOH癸酸;
C10H19COOH十一酸;
C11H23COOH十二酸;
C12H25COOH十三酸;
C13H27COOH十四酸;
C14H29COOH十五酸;
C15H31COOH十六酸;
C16H33COOH十七酸;
C17H35COOH十八酸;
C17H33COOH油酸;
C17H31COOH亞油酸;
C17H29COOH亞麻酸;
C18H37COOH十九酸;
C19H39COOH二十酸。
優選的?；苌贑11H23COOH十二酸;
C13H27COOH十四酸;
C15H31COOH十六酸;
C17H35COOH十八酸;
C17H33COOH油酸;
C17H31COOH亞油酸;
C17H29COOH亞麻酸，特別優選的是十六酸。
含有1-4個碳原子的直鏈或支鏈烴鏈優選含有1-4個碳原子的烷基，特別是甲基。
含有1-10個碳原子的直鏈或支鏈烴鏈優選含有1-10個碳原子，最好是1-4個碳原子的烷基，特別優選的是甲基或丙基。
本說明書中的鹵原子是氟、氯或溴。優選的鹵原子是氟。
本發明的優選化合物是下式Ⅰ化合物，其中1，2-位是飽和的，R1是氫或含有1-4個碳原子的直鏈或支鏈烴鏈，R2是氫或含有1-10個碳原子的直鏈或支鏈烴鏈，R3是含有1-20個碳原子、直鏈或支鏈、飽和或不飽和烴鏈的?；?，X1是氫或鹵素，X2是氫或鹵素，并且其前提是1)R1和R2不能同時為氫，2)X1和X2不能同時為氫。
本發明的特別優選的化合物是下述式Ⅰ化合物，其中1，2-位是飽和的，R1是氫原子，R2是丙基，R3是含有11-20個碳原子的?；?，X1是氟，X2是氟。
本發明更加優選的化合物是下述式Ⅰ化合物，其中
1，2-位是雙鍵，R1是氫原子，R2是丙基，R3是十六?；琗1是氟，X2是氟。
最優選的本發明化合物具有下述結構式
本發明的優選實施方案是含有與脂質體結合的本發明優選化合物的組合物。
如果本發明的目的是提供含有脂質體的藥物組合物，那么，該組合物的活性化合物應該是式中R3是含有11-20個碳原子的?；氖舰窕衔铩?br> 如果本發明的目的是提供不含脂質體的藥物組合物，那么，該組合物的活性化合物應該是式中R3是含有1-10個碳原子、優選5-10個碳原子的?；氖舰窕衔铩?br> 由于其22位碳原子是手性的，并根據R2取代基的取向，可以按下述方法描述存在于前述式(Ⅰ)甾類化合物混合物中的各個立體異構體
優選的立體異構體具有22R構型。
采用任何一種下述可供選擇的方法，可制得下式甾族酯
式中St是
X1、X2、R1、R2的定義如前文所述，R4是含有1-19個碳原子的直鏈或支鏈、飽和或不飽和的烷基，1，2-位是飽和的或者是雙鍵。
A.由式St-OH化合物(式中St的定義如前文所述)與下式化合物反應
式中，R4的定義如前文所述。
采用已知的方法可以將21-羥基化合物酯化，例如，最好是在三氟乙酐存在下，并且優選在酸催化劑例如對甲苯磺酸的存在下，使母體21-羥基甾族化合物與適宜的羧酸反應。
該反應最好在有機溶劑(如苯或二氯甲烷)中進行;在20-100℃下可方便地進行該反應。
B.式St-OH化合物(式中St的定義如前文所述)與下述化合物反應
式中R4如前文所限定，X是鹵原子(如氯、溴、碘和氟)或下式基團
式中R4如前文所限定。
優選在溶劑，例如在鹵代烴(如二氯甲烷)或醚(如二噁烷)中，在堿(如三乙胺或吡啶)存在下，優選在低溫(如-5℃至+30℃)下，用適宜的羧酸酰鹵或酸酐處理母體21-羥基化合物。
C.式St-Y化合物與下式化合物反應
式中R4的定義如前文所述，A⊕是陽離子，在式St-Y中，St的定義如前文所述，Y選自鹵素(如Cl、Br和I)或選自甲磺酸酯基或對甲苯磺酸酯基。
適宜羧酸的堿金屬鹽(如鋰鹽、鈉鹽或鉀鹽)或三乙基銨鹽或三丁基銨鹽可以與適宜的式St-Y烷化劑反應。該反應優選在極性溶劑(如丙酮、甲乙酮、二甲基甲酰胺或二甲亞砜)中進行，其反應溫度一般為25-100℃。
在方法A-C中的任一方法中，如果要求得到純的差向異構體，那么用于將差向異構混合物拆分成各異構體的最后一步反應都是必要的。
根據炎癥部位不同，可以通過各種局部給藥的方式使用本發明化合物，例如，經皮膚給藥、非胃腸道給藥，或者通過吸入法在呼吸道內局部給藥。配方設計的主要目的是使活性甾體成份達到最佳生物利用度。就用于經皮給藥的配方而言，如果所述甾體以高熱力學活性溶解在載體中，那么它就利于達到上述目的。采用適宜的體系或溶劑即可達到這一效果。所述體系或溶劑包括適宜的二醇，例如，丙二醇或1，3-丁二醇，這些二醇既可直接使用，也可以與水混合使用。
借助于表面活性劑作為加溶劑，也可能使甾體完全或部分溶解在親脂相中。經皮給藥的組合物可以是軟膏、水包油霜劑、油包水霜劑或洗液。在乳劑載體中，包括被溶解活性成份的體系可以形成分散相及連續相。甾體也可以以微粉化的固體物質的形式存在于上述組合物中。
甾體的加壓氣霧劑是用于經口腔吸入或鼻吸入給藥的劑型。該氣霧劑體系的設計方法使得每一釋放劑量含有10-1000μg，優選20-250μg活性甾體?；钚宰罡叩溺摅w的給藥劑量應在上述劑量范圍中的較低劑量。微粉化甾體由基本上小于5μm的顆粒組成，這些顆粒借助于分散劑懸浮于拋射劑混合物中，所述分散劑的例子有脫水山梨醇三油酸酯，油酸，卵磷脂或二辛基磺基琥珀酸鈉鹽。
也可借助于干粉吸入器服用甾體。
一種可行的方法是將微粉化的甾體與諸如乳糖或葡萄糖之類的載體物質混合。將該粉末混合物分裝于硬明膠膠囊中，每粒中含有所期劑量的甾體。然后將該膠囊放入粉末吸入器中，該藥劑通過吸入送入患者的呼吸道。
另一種可行的方法是將微粉化粉末加工成在服藥期間會破裂的小球體。將該球化后的粉末裝入多劑吸入器(如Turbuhaler)中的儲藥器中。將計量表調至所期劑量，然后使患者吸入。采用這一系統，將含或不含載體物質的甾體給予患者。
也可以將甾體加入設計用來治療腸炎類疾病(或口服或直腸給藥)的配方中。用于口服的配方組成應使甾體到達腸道的發炎部位。將腸內釋放和/或緩釋或控制釋放的原理做不同的組合，即可達到這一目的。就直腸給藥而言，灌腸型配方是適用的。
脂質體組合物的制備用于本發明的卵磷脂含有不同長度的脂肪酸鏈，因此具有不同的轉相溫度。所采用的卵磷脂的實例是得自雞蛋和大豆的卵磷脂以及像二肉豆蔻酰基卵磷脂(DMPC)、二棕櫚酰基卵磷脂(DPPC)和二硬脂?；蚜字?DSPC)之類的合成卵磷脂。通過控制卵磷脂的結構，就可以制得具有不同生物降解性質的穩定載體。這樣就能夠延長包覆甾族酯的釋放。
甾族酯與例如二棕櫚?；蚜字?DPPC)載體的相互作用程度取決于該酯的鏈長，據觀察隨著鏈長的增加，相互作用程度也增加。
由于膽甾醇或膽甾醇衍生物具有增加脂質體穩定性的作用，因此，在脂質體配方中摻入膽甾醇或膽甾醇衍生物已極為普遍。
制備本發明所述脂質體的前幾步操作可按文獻中所述方法方便地進行，即，將各成份溶解在溶劑(如乙醇或氯仿)中，然后蒸除溶劑。繼之將所得脂質層分散在所選擇的含水介質中，然后振蕩或超聲處理該溶液。本發明的脂質體直徑優選在0.1和10μm之間。
除了形成脂質體的主要成份脂質(通常為磷脂)外，還可以加入占總脂質0-40%(W/W)的其他脂質(如膽甾醇或膽甾醇硬脂酸酯)，借以改善脂質體膜的結構。為了使脂質體的攝取達到最佳，還可摻入提供負電荷的第三種組份(例如，二棕櫚酰基磷脂酰甘油)或提供正電荷的第三種組份(例如，硬脂胺乙酸鹽或氯化十八烷基吡啶鎓)。
根據所采用的脂質和條件，在構成期間，可采用各種不同比例的甾族酯和脂質?？梢栽谌樘谴嬖谙聦⒅|體干燥(冷凍干燥或噴霧干燥)，而且在最終組合物中乳糖含量可為0-95%。
特別優選的本發明組合物含有脂質體和(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮。給藥方式包括粉末氣霧劑法、灌注、噴霧法和加壓氣霧劑法。
下文非限定性實施例進一步說明本發明。在實施例中，制備層析操作所采用的流速為2.5ml/cm2·h-1。所有實施例中的分子量采用化學電離質譜法(CH4為試劑氣體)測定，用Leitz Wetzlar熱載臺顯微鏡測定熔點。除特別指明外，用μBcndapak C18柱(300×3.9mm i.d.)、以1.0ml/分的流速、以乙醇/水(其比例在40∶60和60∶40之間)作為流動相進行HPLC(高效液相色譜)分析。
實施例1 (22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮將十六烷酰氯(1.2g)在10ml二噁烷中的溶液滴加到(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β，21-二羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮(200mg)在25ml吡啶中的溶液中。將該反應混合物在室溫下攪拌16小時。加入二氯甲烷(150ml)，依次用1M的鹽酸、5%碳酸鉀水溶液和水洗滌該溶液，干燥。蒸發后，將粗產物在Sephadex LH-20柱(87×2.5cm)上層析純化，用氯仿作為流動相。收集級份210-255ml，蒸發后得到203mg(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝87-90℃;分子量為706(計算值707.0)，純度為96%(HPLC分析)。
實施例2 (22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮將(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β，21-二羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮(50mg)和十六烷酰氯(35mg)溶解在10ml二氯甲烷中，滴加三乙胺(13mg)在2ml二氯甲烷中的溶液。將該反應混合物在室溫下攪拌2小時。再加50ml二氯甲烷，按照實施例1對該反應混合物進行后處理。在Sephadex LH-20柱(85×2.5cm)上將粗產物純化，采用氯仿作為流動相，收集級份210-250ml，蒸發后得到34mg(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮。分子量為706(計算值為707.0)，純度為95%(HPLC-分析)。
實施例3 (22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮將十六烷酰氯(0.4ml)在10ml二噁烷中的溶液滴加到(22S)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β，21-二羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮(70mg)在25ml吡啶中的溶液中。將該反應混合物在室溫下攪拌16小時，按實施例1進行后處理。在Sephadex LH-20柱(87×2.5cm)上將粗產物純化，采用氯仿作為流動相。收集級份225-265ml，蒸發后得到92mg(22S)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，為油狀物。分子量為706(計算值為707.0)。純度為97%(HPLC-分析)。
實施例4 (22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基-21-十四烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮將十四烷酸(7.0g)和亞硫酰氯(9ml)在三氯乙烯(100ml)中回流3小時，合成了十四烷酰氯。然后蒸掉溶劑。
將十四烷酰氯(32mg)加到(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β，21-二羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮(51mg)在10ml二氯甲烷中的溶液中，然后加入溶解在二氯甲烷(5ml)中的三乙胺(13mg)。將該反應混合物在室溫下攪拌4小時。補加二氯甲烷，依次用0.1M鹽酸和水(3×50ml)洗滌該混合物，經干燥、蒸發后，將殘留物在Merck Kieselgel 60上進行層析純化，用庚烷∶丙酮(6∶4)作為流動相，得到27mg(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基-21-十四烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮。分子量678(計算值678.9)。純度96.8%(HPLC-分析)。
實施例5 (22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基-21-十二烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮將十二烷酰氯(28ml)加到(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β，21-二羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮(51mg)在5ml二氯甲烷中的溶液中，然后加入溶解在2ml二氯甲烷中的三乙胺(13mg)。將該反應混合物在室溫下攪拌3小時，補加二氯甲烷，依次用0.1M鹽酸和水(3×30ml)洗滌有機相。經干燥、蒸發后，在Merck Kieselgel 60上將殘留物層析純化，采用己烷∶丙酮(6∶4)作為流動相。所得產物進行第二次層析純化，用石油醚∶乙酸乙酯(3∶2)作為流動相，得到33mg(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基-21-十二烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮。分子量650(計算值650.8)。純度96.9%(HPLC-分析)。
實施例6 (22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮將十六烷酰氯(2.3ml)在15ml二噁烷中的溶液滴加到(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β，21-二羥基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮(700mg)在30ml吡啶中的溶液中。將該反應混合物在室溫下攪拌過夜，按實施例1進行后處理。在Sephadex LH-20柱(76×6.3cm)上將粗產物純化，用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作為流動相。收集級份1020-1350ml，蒸發后得到752mg(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮。m.p.141-145℃;〔α〕25D＝+71.6°(c＝0.204;CH2Cl2);分子量704(計算值704.9)。純度97.7%(HPLC-分析)。
實施例7 (22S)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮將十六烷酰氯(0.5ml)在5ml二噁烷中的溶液滴加到(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β，21-二羥基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮(150mg)在10ml吡啶中的溶液中。將該反應混合物在室溫下攪拌過夜，按實施例1進行后處理。將粗產物在Sephadex LH-20柱(89×2.5cm)上純化，用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作為流動相。收集級份215-315ml，蒸發后得到132mg(22S)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮。m.p.＝176-180℃;〔α〕25D＝+47.5°(c＝0.198;CH2Cl2);分子量704(計算值704.9)。純度99%(HPLC-分析)。
實施例8 (22R)-21-乙酰氧基-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮將乙酰氯(38mg)在5ml二噁烷中的溶液滴加到(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β，21-二羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮(75mg)在5ml吡啶中的溶液中。將該反應混合物在室溫下攪拌16小時。蒸發后加入二氯甲烷(75ml)，依次用冷的5%碳酸鉀水溶液和飽和氯化鈉溶液洗滌該溶液。蒸發后，在Sephadex LH-20柱(85×2.5cm)上將粗產物純化，采用氯仿作為流動相。收集級份365-420ml，蒸發后得到57mg(22R)-21-乙酰氧基-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝182-189℃;〔α〕25D＝+112.0°(c＝0.225;CH2Cl2);分子量510(計算值510.6);純度99.0%(HPLC-分析)。
實施例9 (22R)-16，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基-21-戊酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮將戊酰氯(60mg)在5ml二噁烷中的溶液滴加到(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β，21-二羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮(75mg)在5ml吡啶中的溶液中。將該反應混合物在室溫下攪拌16小時。蒸發后，加入二氯甲烷(75ml)，依次用冷的5%碳酸鉀水溶液和飽和氯化鈉溶液洗滌該溶液。蒸發后，粗產物在Sephadex LH-20柱(85×2.5cm)上層析純化，用氯仿作流動相。收集級份265-325ml，蒸發，得到50mg(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基-21-戊酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝181-185℃;〔α〕25D＝+109.4°(c＝0.212;CH2Cl2);分子量552(計算值552.7)。純度99.8%(HPLC-分析)。
實施例10 (22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基-21癸酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮將癸酰氯(0.2ml)在3ml二噁烷中的溶液滴加到(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β，21-二羥基孕甾-1，4-烯-3，20-二酮(100mg)在6ml吡啶中的溶液中。將該反應混合物在室溫下攪拌過夜，按照實施例1進行后處理。在Sephadex LH-20柱(71×6.3cm)上將粗產物純化，采用氯仿作為流動相。收集級份1470-1725ml，蒸發后得到113mg(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基-21-癸酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮。m.p.＝182-184℃?！拨痢?5D＝+71.5°(c＝0.186;CH2Cl2);分子量620(計算值620.9)。純度97.7%(HPLC-分析)。
實施例11 6α，9α-二氟-11β，21-二羥基-16α，17α-〔(1-甲基亞乙基)二氧基〕孕甾-4-烯-3，20-二酮在室溫、常壓下，將0.9g氯化三(三苯膦)銠在250ml脫氣甲苯中的懸液氫化45分鐘。加入1.0g16α，17α-膚輕松(fluocinolone 16α，17α-acetonide)在100ml無水乙醇中的溶液，然后再氫化40小時。蒸發反應產物，采用閃式硅膠層析法純化殘余物，以丙酮-石油醚作為流動相，借以除去大部分催化劑。將洗脫液蒸發，在Sephadex LH-20柱(72.5×6.3cm)上將殘余物進一步純化，以氯仿作為流動相。收集級份3555-4125ml，蒸發后得到0.61g6α，9α-二氟-11β，21-二羥基-16α，17α-〔(1-甲基亞乙基)二氧基〕孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝146-151℃。〔α〕25D＝+124.5°(c＝0.220;CH2Cl2)。分子量454(計算值454.6)。純度98.5%(HPLC-分析)。
實施例12 6α，9α-二氟-11β-羥基-16α，17α-〔(1-甲基亞乙基)二氧基〕-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮將十六烷酰氯(2.1ml)在15ml二噁烷中的溶液滴加到6α，9α-二氟-11β，21-二羥基-16α，17α-〔(1-甲基亞乙基)二氧基〕孕甾-4-烯-3，20-二酮(310mg)在30ml吡啶中的溶液中。將該反應混合物在室溫下攪拌過夜，按實施例1進行后處理。將粗產物在Sephadex LH-20柱(76×6.3cm)上純化，用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作為流動相。收集級份1035-1260ml，蒸發后得到158mg6α，9α-二氟-11β-羥基-16α，17α-〔(1-甲基亞乙基)二氧基〕-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝82-86℃。〔α〕25D＝+85.3°(c＝0.232;CH2Cl2)。分子量692(計算值692.9)。純度98.6%(HPLC-分析)。
實施例13 (22R)-和(22S)-21-乙酰氧基-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β-羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮將(22RS)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮(68mg)溶解在1ml吡啶中。加入乙酐(1ml)，將該反應混合物在室溫下攪拌1小時，倒入冰-水中，用3×25ml二氯甲烷提取。將提取液干燥，蒸發。通過在Sephadex LH-20柱(89×2.5cm)上層析，以庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作為流動相來拆分殘留的22RS-混合物。分別收集級份380-400ml(A)和420-440ml(B)，蒸發。
級份A從二氯甲烷-石油醚中沉淀后得到14mg(22S)-21-乙酰氧基-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β-羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝179-186℃?！拨痢?5D＝+86.2°(c＝0.188;CH2Cl2)。分子量492(計算值492.6)。純度97.5%(HPLC-分析)。
級份B經沉淀后，得到20mg(22R)-21-乙酰氧基-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β-羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝169-172℃?！拨痢?5D＝+139.0°(c＝0.200;CH2Cl2)。分子量492(計算值492.6)。純度97.9%(HPLC-分析)。
實施例14 (22RS)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮將1170mg6α-氟-11β，16α，17α，21-四羥基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮在250ml無水乙醇中的溶液加到1.4g氯化三(三苯膦)銠在300ml甲苯中的懸液中。在室溫、常壓下，將該混合物氫化22小時，蒸發。殘留物從丙酮-氯仿沉淀，得到661mg6α-氟-11β，16α，17α，21-四羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮。分子量396(計算值396.5)。純度96.6%(HPLC-分析)。
將6α-氟-11β，16α，17α，21-四羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮(308mg)分次加到丁醛(115mg)和70%高氯酸(0.2ml)在50ml二噁烷中的溶液中。將該混合物在室溫下攪拌6小時。加入二氯甲烷(200ml)，依次用10%碳酸鉀水溶液和水洗滌該溶液，干燥。蒸發后，殘余物在Sephadex LH-20柱(87×2.5cm)上純化，用氯仿作流動相。收集級份420-500ml，蒸發，得到248mg(22RS)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝85-96℃?！拨痢?5D＝+119.8℃(c＝0.192;CH2Cl2)。分子量450(計算值450.6)。純度96.1%(HPLC-分析)。22R-和22S-差向異構體之間的比例是59/41(HPLC-分析)。
將十六烷酰氯(0.21ml)在3ml二噁烷中的溶液滴加到(22RS)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮(50mg)在6ml吡啶中的溶液中。將該反應混合物在室溫下攪拌過夜，按實施例1進行后處理。在Sephadex LH-20柱(89×2.5cm)上將粗產物純化，用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作為流動相。收集級份185-230ml，蒸發，得到42mg(22RS)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，為油狀物。分子量688(計算值688.97)。純度99.0%，22R和22S差向異構體之間的比例為15/85(HPLC-分析)。
實施例15 (22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮采用制備HPLC，在μBondapak C18柱(150×19mm)上，以乙醇∶水(40∶60)作流動相，分次拆分(22RS)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮(225mg)。收集集中于265ml處的級份(A)和310ml處的級份(B)，蒸發。經從二氯甲烷-石油醚中沉淀后，由級份A得到68mg(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝180-192℃。〔α〕25D＝+138.9°(c＝0.144;CH2Cl2)。分子量450(計算值450.6)。純度99.4%(HPLC-分析)。
級份B經沉淀后得到62mg(22S)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝168-175℃。〔α〕25D＝+103.7°(c＝0.216;CH2Cl2)。分子量450(計算值450.6)。純度99.5%(HPLC-分析)。
將十六烷酰氯(0.22ml)在5ml二噁烷中的溶液滴加到(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮(32mg)在10ml吡啶中的溶液中。將該反應混合物在室溫下攪拌過夜，按實施例1進行后處理。在Sephadex LH-20柱(87×2.5cm)上將粗產物純化，用氯仿作流動相。收集級份215-250ml，蒸發，得到38mg(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，為油狀物。分子量688(計算值688.97)。純度96.0%(HPLC-分析)。
實施例16 (22S)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮將(22RS)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮(68mg)溶解在1ml吡啶中。加入乙酐(1ml)，將該反應混合物在室溫下攪拌1小時，倒入冰-水中，用3×25ml二氯甲烷提取。將提取液干燥，蒸發。在Sephadex LH-20柱(89×2.5cm)上層析拆分殘留的22RS差向異構體混合物，以庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作為流動相。收集級份380-400ml(A)和420-440ml(B)，蒸發。
經從二氯甲烷-石油醚中沉淀后，從級份A得到14mg(22S)-21-乙酰氧基-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β-羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝179-186℃。〔α〕25D＝+86.2°(c＝0.188;CH2Cl2)。分子量492(計算值492.6)。純度97.5%(HPLC-分析)。
經沉淀后，從級份B得到20mg(22R)-21-乙酰氧基-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β-羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝169-172℃?！拨痢?5D＝+139.0°(c＝0.200，CH2Cl2)。分子量492(計算值492.6)。純度97.9%(HPLC-分析)。
將2ml 2M鹽酸加到14mg(22S)-21-乙酰氧基-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β-羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮在2ml乙醇中的溶液中。于60℃攪拌5小時后，用飽和碳酸氫鈉水溶液中和該反應混合物，用二氯甲烷(3×25ml)提取。合并提取液，用水洗滌，干燥，蒸發。在Sephadex LH-20柱(87×2.5cm)上將殘留物純化，以氯仿作為流動相。收集級份455-510ml，蒸發，得到7mg(22S)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮。分子量450(計算值450.6)。純度96.6%。
將十六烷酰氯(195mg)在5ml二噁烷中的溶液滴加到(22S)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮(32mg)在10ml吡啶中的溶液中。將該反應混合物在室溫下攪拌過夜，按實施例1進行后處理。在Sephadex LH-20柱(89-2.5cm)上將粗產物純化，以庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作為流動相。收集級份205-245ml，蒸發，得到37mg(22S)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，為油狀物。分子量688(計算值688.97)。純度96.4%(HPLC-分析)。
實施例17 (22RS)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β-羥基-21-十二烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮將十二烷酰氯(0.4ml)在3ml二噁烷中的溶液滴加到(22RS)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮(50mg)在6ml吡啶中的溶液中。將該反應混合物在室溫下攪拌過夜，按實施例1進行后處理。在Sephadex LH-20柱(89×2.5cm)上將粗產物純化，用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作為流動相。收集級份215-250ml，蒸發，得到15mg(22RS)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β-羥基-21-十二烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝125-143℃。〔α〕25D＝+92.8°(c＝0.208;CH2Cl2)。分子量632(計算值632.9)。純度96.2%(HPLC-分析)。22R-與22S-差向異構體之間的比例為58/42(HPLC-分析)。
實施例18 (22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮將6α-氟-11β，16α，17α，21-四羥基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮(400mg)分次加到丁醛(0.18ml)和70%高氯酸(0.2ml)在50ml二噁烷中的溶液中。將該反應混合物在室溫下攪拌16小時。加入二氯甲烷(200ml)，用10%碳酸鉀水溶液和水洗滌該溶液，干燥。蒸發后，在Sephadex LH-20柱(75×6.3cm)上純化所得殘留物，以氯仿作為流動相。收集級份2880-3300ml，蒸發，得到1209mg(22RS)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羥基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮。分子量448(計算值448.5)。純度95.7%;22R-和22S-差向異構體之間的比例為55/45(HPLC-分析)。
在Sephadex LH-20柱(89×2.5cm)上層析(22RS)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羥基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮(36mg)，用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作為流動相。收集級份1720-1800ml(A)和1960-2025ml(B)，蒸發。從二氯甲烷-石油醚中沉淀，得到兩個產物。經1H-NMR和質譜鑒定，來自級份(A)的產物(12mg)為(22S)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羥基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮，來自級份(B)的產物(10mg)是22R差向異構體。
所述差向異構體具有下述性質差向異構體22Sm.p.＝172-180℃;〔α〕25D＝+62.3°(c＝0.132;CH2Cl2);分子量448(計算值448.5)。差向異構體22Rm.p.＝95-106℃;〔α〕25D＝+105.9°(C＝0.152;CH2Cl2);分子量448(計算值448.5)。經HPLC分析測得差向異構體22S的純度為98.9%;差向異構體22R的純度為97.7%。
將十六烷酰氯(172mg)在5ml二噁烷中的溶液滴加到(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羥基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮(56mg)在10ml吡啶中的溶液中。將該反應混合物在室溫下攪拌過夜，按實施例1進行后處理。將粗產物在Sephadex LH-20柱(89×2.5cm)上純化，用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作為流動相。收集級份225-285ml，蒸發，得到31mg(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮。m.p.＝95-100℃?！拨痢?5D＝+68.0°(c＝0.200;CH2Cl2)。分子量686(計算值686.95)。純度97.7%(HPLC-分析)。
實施例19 (22S)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮將十六烷酰氯(110mg)在5ml二噁烷中的溶液滴加到(22S)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β，21-二羥基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮(46mg)在10ml吡啶中的溶液中。將該反應混合物在室溫下攪拌過夜，按實施例1進行后處理。將粗產物在Sephadex LH-20柱(89×2.5cm)上進行純化，用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作為流動相。收集級份185-225ml，蒸發，得到37mg(22S)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α-氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮。m.p.＝65-68℃?！拨痢矰＝+53.0°(c＝0.200;CH2Cl2)。分子量686(計算值686.95)。純度95.9%(HPLC-分析)。
實施例20 6α-氟-11β，21-二羥基-16α，17α-〔(1-甲基亞乙基)二氧基〕孕甾-4-烯-3，20-二酮在室溫、常壓下，將2.1g氯化三(三苯膦)銠在500ml甲苯中的懸液氫化45分鐘，此時催化劑溶解。加入2.0g6α-氟-11β，21-二羥基-16α，17α-〔(1-甲基亞乙基)二氧基〕孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮在1000ml無水乙醇中的溶液，再繼續氫化65小時。將該反應混合物蒸發，將殘留物在Sephadex LH-20柱(71×6.3cm)上進行純化，用氯仿作為流動相。收集級份2010-2445ml，蒸發，得到1.51g6α-氟-11β，21-二羥基-16α，17α-〔(1-甲基亞乙基)二氧基〕孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝209-219℃。〔α〕25D＝+133.5°(c＝0.230;CH2Cl2)。分子量436(計算值436.5)。純度99.6%(HPLC-分析)。
實施例21 6α-氟-11β-羥基-16α，17α-〔(1-甲基亞乙基)二氧基〕-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮將十六烷酰氯(0.21ml)在3ml二噁烷中的溶液滴加到6α-氟-11β，21-二羥基-16α，17α-〔(1-甲基亞乙基)二氧基〕孕甾-4-烯-3，20-二酮在6ml吡啶中的溶液中。將該反應混合物在室溫下攪拌過夜，按實施例1進行后處理。將粗產物在Sephadex LH-20柱(76×6.3cm)上進行純化，用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作為流動相。收集級份1035-1230ml，蒸發，得到63mg6α-氟-11β-羥基-16α，17α-〔(1-甲基亞乙基)二氧基〕-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝99-101℃?！拨痢?5D＝+89.8°(c＝0.206;CH2Cl2)。分子量674(計算值674.94)。純度97.9%(HPLC-分析)。
實施例22 9α-氟-11β，21-二羥基-16α，17α-〔(1-甲基亞乙基)二氧基〕孕甾-4-烯-3，20-二酮在室溫、常壓下，將675mg氯化三(三苯膦)銠在200ml甲苯中的溶液氫化45分鐘。加入1g16α，17α-丙酮縮去炎松在100ml無水乙醇中的溶液，再繼續氫化40小時。將該反應混合物蒸發，通過閃式層析、以丙酮∶石油醚(b.p.40-60℃)(40∶60)作為流動相，除去大部分催化劑。將粗產物在Sephadex LH-20柱(72.5×6.3cm)上進一步純化，用氯仿作為流動相。收集級份2746-3195ml，蒸發，得到404mg 9α-氟-11β，21-二羥基-16α，17α-〔(1-甲基亞乙基)二氧基〕孕甾-4-烯-3，20-二酮。m.p.＝238-41℃。〔α〕25D＝+145.2°(c＝0.288;CH2Cl2)。分子量436(計算值436.5)。純度99%(HPLC-分析)。
實施例23 9α-氟-11β-羥基-16α，17α-〔(1-甲基亞乙基)二氧基〕-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮將十六烷酰氯(0.69ml)在10ml二噁烷中的溶液滴加到9α-氟-11β，21-二羥基-16α，17α-〔(1-甲基亞乙基)二氧基〕孕甾-4-烯-3，20-二酮在20ml吡啶中的溶液中。將該反應混合物在室溫下攪拌過夜，按實施例1進行后處理。將粗產物用Sephadex LH-20柱(89×2.5cm)進行純化，用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作為流動相。收集級份240-305ml，蒸發，得到102mg 9α-氟-11β-羥基-16α，17α-〔(1-甲基亞乙基)二氧基〕-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，為油狀物。分子量674(計算值674.94)。純度98%(HPLC-分析)。
實施例24 (22RS)-16α，17α-亞丁基二氧基-9α-氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮將新蒸過的丁醛(100mg)和0.2ml高氯酸(70%)溶解在50ml經過純化、干燥的二噁烷中，攪拌下，在20分鐘內，分小批量加入9α-氟-11β，16α，17α，21-四羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮(340mg)。將該反應混合物在室溫再攪拌5小時。加入二氯甲烷(200ml)，用碳酸鉀水溶液和水洗滌該溶液，用無水硫酸鎂干燥，蒸發后，所得粗產物在Sephadex LH-20柱(72.5×6.3cm)上進行純化，用氯仿作為流動相。收集級份2760-3195ml，蒸發，得到215mg(22RS)-16α，17α-亞丁基二氧基-9α-氟-11β，21-二羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮。分子量450(計算值450.6)。純度97.4%(HPLC-分析)。
將十六烷酰氯(0.13ml)在2.5ml二噁烷中的溶液滴加到(22RS)-16α，17α-亞丁基二氧基-9α-氟-11β，21-二羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮(40ml)在5ml吡啶中的溶液中。將該反應混合物在室溫下攪拌過夜，按實施例1進行后處理。將粗產物在Sephadex LH-20柱(87×2.5cm)上進行純化，用氯仿作流動相。收集級份220-300ml，蒸發，得到(22RS)-16α，17α-亞丁基二氧基-9α-氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，為油狀物。分子量688(計算值688.97)。22R-和22S-差向異構體之間的比例為61/39(HPLC-分析)。
實施例25 (22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-9α-氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮采用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)混合物作為流動相，通過在Sephadex LH-20柱(76×6.3cm)上進行層析，拆分(22RS)-16α，17α-亞丁基二氧基-9α-氟-11β，21-二羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮(200mg)。收集級份7560-8835ml(A)和8836-9360ml(B)，蒸發。經1H-NMR和質譜鑒定，來自級份A的產物(128mg)是(22S)-16α，17α-亞丁基二氧基-9α-氟-11β，21-二羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮，而來自級份B的產物(50mg)是22R-差向異構體。
各差向異構體的性質如下差向異構體22Sm.p.＝180-190℃;〔α〕25D＝+105.6°(c＝0.214;CH2Cl2)，分子量450(計算值405.6)。差向異構體22Rm.p.＝147-151℃;〔α〕25D＝+133.7°(C＝0.196;CH2Cl2);分子量450(計算值450.6)。經HPLC-分析測定22S-差向異構體的純度為95.6%;22R-差向異構體的純度為98.2%。
將十六烷酰氯(0.34ml)在5ml二噁烷中的溶液滴加到(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-9α-氟-11β，-二羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮(50mg)在10ml中的溶液中。將該反應混合物在室溫下攪拌過夜，按實施例1進處理。將粗產物在Sephadex LH-20柱(89×2.5cm)行純化，用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作流動相。收份180-205ml，蒸發，得到(22R)-16α，17α-基二氧基-9α-氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-烯-3，20-二酮，為油狀物。純度為96.3%(HPLC-)。分子量688(計算值688.97)。
例26 (22S)-16α，17α-亞丁基二氧基-9α-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-將十六烷酰氯(0.14ml)在15ml二噁烷中的溶液滴加到2S)-16α，17α-亞丁基二氧基-9α-氟-11β，-二羥基孕甾-4-烯-3，20-二酮(41mg)在3ml中的溶液中。將該反應混合物在室溫下攪拌過夜，按實施例1進處理。將粗產物在Sephadex LH-20柱(89×2.5cm)行純化，用庚烷∶氯仿∶乙醇(20∶20∶1)作為流動相。級份215-260ml，蒸發，得到26mg(22S)-α，17α-亞丁基二氧基-9α-氟-11β-羥基-21-烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮，為油狀物。純度4%(HPLC-分析)。分子量688(計算值688.97)。
例27 (22R)-16，17α-亞丁基二氧基-9α-氟-1β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，-二酮將十六烷酰氯(75mg)在2.5ml二噁烷中的溶液滴加到(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-9α-氟-11β，21-二羥基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮(25mg)在5ml吡啶中的溶液中。將該反應混合物在室溫下攪拌過夜，按實施例1進行后處理。將粗產物在Sephadex LH-20柱(85×2.5cm)上進行純化，用氯仿作流動相。收集級份235-285ml，蒸發，得到27mg(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-9α-氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮。m.p.＝116-121℃;〔α〕25D＝+67.4°(c＝0.172;CH2Cl2)。分子量686(計算值687.0)。純度96.5%(HPLC-分析)。
實施例28 藥物制劑下述非限定性實施例說明用于不同局部給藥方式的配方。在經皮給藥的配方中，活性甾體的用量一般為0.001-0.2%(W/W)，優選0.01-0.1%(W/W)。
配方1 軟膏微粉化甾體 0.025g液體石蠟 10.0g軟白蠟 加至100.0g配方2 軟膏甾體 0.025g丙二醇 5.0g脫水山梨醇倍半油酸酯 5.0g液體石蠟 10.0g
軟白蠟 加至100.0g配方3 水包油霜劑甾體 0.025g十六醇 5.0g單硬脂酸甘油酯 5.0g液體石蠟 10.0gCetomacrogol 1000 2.0g檸檬酸 0.1g檸檬酸鈉 0.2g丙二醇 35.0g水 加至100.0g配方4 水包油霜劑微粉化甾體 0.025g軟白蠟 15.0g液體石蠟 5.0g十六醇 5.0gSorbimacrogol stearate 2.0g脫水山梨醇單硬脂酸酯 0.5g山梨酸 0.2g檸檬酸 0.1g檸檬酸鈉 0.2g水 加至100g配方5 油包水霜劑甾體 0.025g
軟白蠟 35.0g液體石蠟 5.0g脫水山梨醇倍半油酸酯 5.0g山梨酸 0.2g檸檬酸 0.1g檸檬酸鈉 0.2g水 加至100.0g配方6 洗劑甾體 0.25mg異丙醇 0.5ml羧基乙烯基聚合物 3mgNaOH 適量水 加至1.0g配方7 注射用懸浮液微粉化甾體 0.05-10mg羧甲基纖維素鈉 7mgNaCl 7mg聚氧乙烯(20)脫水山梨醇單油酸酯 0.5mg苯甲醇 8mg無菌水 加至1.0ml配方8 用于口腔和鼻吸入的氣霧劑微粉化甾體 0.1%W/W脫水山梨醇三油酸酯 0.7%W/W三氯氟甲烷 24.8%W/W
二氯四氟乙烷 24.8%W/W二氯二氟甲烷 49.6%W/W配方9 霧化溶液甾體 7.0mg丙二醇 5.0g水 加至10.0g配方10 用于吸入的粉劑用下述成份的混合物填充明質膠囊微粉化甾體 0.1mg乳糖 20mg借助于吸入裝置吸入該粉末配方11 用于吸入的粉劑將球化的粉劑裝入多劑粉末吸入器，每劑含有微粉化甾體 0.1mg配方12 用于吸入的粉劑將球化的粉劑裝入多劑粉末吸入器。每劑含有微粉化甾體 0.1mg微粉化乳糖 1mg配方13 用于治療小腸疾患的膠囊劑甾體 1.0mg小糖球 321mgAquacoat ECD 30 6.6mg乙酰檸檬酸三丁酯 0.5mg吐溫-80 0.1mg
Eudragit L100-55 17.5mg檸檬酸三乙酯 1.8mg滑石粉 8.8mg消泡劑MMS 0.01mg配方14 用于治療大腸疾患的膠囊劑甾體 2.0mg小糖球 305mgAquocoat ECD 30 5.0mg乙酰檸檬酸三丁酯 0.4mg吐溫-80 0.14mgEudragit NE 30 D 12.6mgEudragit S100 12.6mg滑石粉 12.6mg配方15 直腸灌腸劑甾體 0.02mg羧甲基纖維素鈉 25mg乙二胺四乙酸二鈉 0.5mg對羥基苯甲酸甲酯 0.8mg對羥基苯甲酸丙酯 0.2mg氯化鈉 7.0mg無水檸檬酸 1.8mg吐溫-80 0.01mg純水 加至1.0ml配方16 含有被脂質體包覆的甾體的配方
A.滴注配方的制備在一玻璃管中混合合成的二棕櫚?；蚜字?45mg)，二肉豆蔻?；蚜字?7mg)，二棕櫚酰基磷脂酰甘油(1mg)和(22R)-16α，17α-亞丁基二氧基-6α，9α-二氟-11β-羥基-21-十六烷酰氧基孕甾-4-烯-3，20-二酮(5mg)。將所有組份溶解在氯仿中。用N2蒸發掉大部分溶劑，然后減壓，由此，在玻璃管表面形成脂質薄膜。在該脂質中加入水溶液(0.9%NaCl)。在高于脂質的轉相溫度下形成脂質體。振蕩該溶液或用超聲波探頭對該溶液進行超聲處理，借以形成脂質體。所得懸液含有大小范圍為極小囊泡至2μm的脂質體。
B.吸入用配方的制備按實施例A制備脂質體，其中的水溶液含有10%乳糖。乳糖與脂質之比為7∶3。將該脂質體懸液用干冰冷凍，并且進行冷凍干燥。將干燥產物微粉化，所得顆粒的質均空氣動力學直徑(MMAD)約為2μm。
藥理學采用下述呼吸道模型可以舉例說明局部消炎活性的選擇性。
吸入后的GCS絕大部分沉積在咽部，吞咽在腸中消失。這一部分GCS由于其作用于預計治療的區域(肺)之外，因此而引起不希望的甾體副作用。因此，最好是使用口服后在肺部具有高局部消炎作用，但GCS誘發作用低的GCS。為此而進行的研究是為了確定在肺部局部給藥后以及經口服給藥后GCS誘發的作用，并且，按下述方法檢驗治療肺區中和該區域之外糖皮質甾醇激素作用之間的差別。
試驗模型
A)在呼吸道粘膜(左肺葉)上進行的所期局部消炎作用的試驗模型用Ephrane使Sprague Dawley大鼠(250g)輕度麻醉，以0.5ml/kg的體積將糖皮質甾類試驗制備物(包覆于脂質體中，并懸浮在鹽水中)滴注到左肺葉(只滴入左肺葉)。兩個小時后，將Sephadex懸液(5mg/kg，體積為1ml/kg)滴入氣管叉上方的氣管中，這樣，使懸液既進入左肺葉也進入右肺葉。20小時后，將大鼠處死，分離出左肺葉，稱重。對照組用賦形劑代替糖皮質甾類制備物，用鹽水代替Sephadex懸液，以確定非藥物處理的Sephadex水腫的重量和正常肺的重量。
B)檢測口服吸收糖皮質甾類引起的不希望的體內作用的試驗模型用Ephrane使Sprague Dawley大鼠(250g)輕度麻醉，并口服給予GCS試驗制備物，用藥體積為1.0ml/kg。兩小時后將Sephadex懸液(5mg/kg，體積為1ml/kg)滴入氣管叉上方的氣管中，這樣使得懸液既能進入左肺葉也能進行右肺葉。20小時后，處死大鼠，將肺葉稱重。對照組用賦形劑代替糖皮質甾類制備物，用鹽水代替Sephadex懸液，借以測定非用藥處理的Sephadex水腫和正常重量。
表1列出了比較研究的結果。比較本發明化合物的藥理分布和用脂質體包覆的丁地去炎松-21-十六烷酸酯及氟地塞米松-21-十六烷酸酯的藥理分布。在肺中局部給藥后，所有本發明甾體的局部消炎作用效力都高于脂質體包覆的丁地去炎松-21-十六烷酸酯。此外，這些結果也證實與選用的先有技術化合物相比，本發明受試化合物具有較高的肺選擇性，其理由是與局部給藥于肺部時抑制肺水腫所需藥物劑量相比，口服上述化合物抑制肺水腫所需劑量(ED50)分別高于前者158倍(實施例3)、247倍(實施例7)和559倍(實施例1)，而口服丁地去炎松-21-十六烷酸酯和氟地塞米松-21-十六烷酸酯的ED50則分別高于前者66倍和8倍。
由此可以得出結論本發明化合物特別適用于皮膚及身體各種腔體(如肺、鼻子、腸和關節)之炎癥的局部治療。
權利要求
1.通式Ⅰ化合物或其立體異構體，
1，2-位是飽和的或者是雙鍵，R1是氫或含有1-4個碳原子的直鏈或支鏈烴鏈，R2是氫或含有1-10個碳原子的直鏈或支鏈烴鏈，R3是含有1-20個碳原子、直鏈或支鏈、飽和或不飽和烴?；琗1是氫或鹵素，X2是氫或鹵素，其前提是1)R1和R2不能同時為氫，2)X1和X2不能同時為氫，3)當1，2-位是雙鍵時，R1和R2不能同時是甲基，4)當1，2-位是雙鍵，R1是氫原子和R2是含有1-10原子的直鏈或支鏈烴鏈時，R3是含有11-20個碳原子的?；?。
2.按照權利要求1的化合物，其中，在通式Ⅰ中，1，2-位是飽和的，R1是氫或含有1-4個碳原子的直鏈或支鏈烴鏈，R2是氫或含有1-10個碳原子的直鏈或支鏈烴鏈，R3是含有1-20個碳原子、直鏈或支鏈、飽和或不飽和烴鏈的?；?，X1是氫或鹵素，X2是氫或鹵素，其前提是1)R1和R2不能同時為氫，2)X1和X2不能同時為氫。
3.按照權利要求1-2中任一項所述的化合物，其中，R3是含有11-20個碳原子的?；?。
4.按照權利要求1-2中任一項所述的化合物，其中，R3是含有1-10個碳原子的?；?。
5.按照權利要求3的化合物，其中，1，2-位是飽和的，R1是氫原子，R2是丙基，X1是氟和X2是氟。
6.按照權利要求1的化合物，其中，1，2-位是雙鍵，R1是氫原子，R2是丙基，R3是十六烷?；?，X1是氟，X2是氟。
7.按照權利要求1的化合物，具有下式
8.制備權利要求1限定的通式Ⅰ化合物的方法，其特征在于a)使下式化合物與式R4COOH化合物反應，
式中R1、R2、X1和X2如權利要求1所限定，式R4COOH中，R4是含有1-19個碳原子的、直鏈或支鏈、飽和或不飽和的烷基，或b)由下式化合物與式R4COX化合物反應，
式中，R1、R2、X1和X2如權利要求1所限定，在式R4COOX中，R4如前文所限定，X是鹵原子或-OOCR4，或c)由下式化合物與式R4COO
A
化合物反應，
式中，R1、R2、X1和X2如權利要求1所限定，Y是鹵素、甲磺酸酯基或對甲苯磺酸酯基，在式R4COO
A⊕中，R4如前文所限定，A⊕是陽離子，然后，如果由此所得的化合物是一差向異構體混合物，而希望得到純的差向異構體，則將該差向異構體混合物拆分為其立體異構體。
9.按照權利要求8的方法，其特征在于制備的是權利要求2-7中任一項的化合物。
10.一種藥物制劑，它包括作為活性成份的、權利要求1-7中任一項的化合物。
11.按照權利要求10的藥物制劑，它含有包覆有權利要求3的藥理活性化合物的脂質體。
12.單位劑量形式的權利要求10-11的藥物制劑。
13.按照權利要求10-12的藥物制劑，它包括所述活性成份及可藥用載體。
14.按照權利要求1-7中任一項的化合物作為治療活性物質的應用。
15.權利要求1-7中任一項的化合物在制備具有消炎和抗過敏活性的藥物中的應用。
16.用于治療哺乳動物，包括人類炎癥和過敏性疾病的方法，其特征在于使需要這種治療的病主服用有效量的權利要求1-7中任一項的化合物。
17.如權利要求1-16所要求保護的、基本上如上所述的化合物及其制備方法，含有這些化合物的藥物組合物，以及它們在治療炎癥和過敏性疾病中的應用。
全文摘要
通式I化合物或其立體異構體，式中，各個取代基的定義如說明書中所述；它們的制備方法；含有它們的藥物制劑以及所述化合物在治療炎癥和過敏癥中的應用。
文檔編號A61K31/57GK1064078SQ9210079
公開日1992年9月2日 申請日期1992年2月3日 優先權日1991年2月4日
發明者B·I·阿克塞爾, R·L·布拉特桑德, L·A·卡爾斯特倫, A·B·塔倫 申請人:阿斯特拉公司