專利名稱：1,2,4－苯并三嗪氧化物的口服凝膠膠囊配方的制作方法
背景技術：
發明領域本發明涉及癌瘤的治療領域。更具體說，本發明涉及用含在口服的膠囊包封懸浮液中的1，2，4-苯并三嗪氧化物治療癌瘤。
報道的進展用膠囊包封的懸浮液和溶液作為藥物載體在現有技術中是已知的。比如美國專利No.4,701,327公開了由其中包裹了鬼臼乙叉甙溶液的軟明膠殼體構成的鬼臼乙叉甙軟膠囊；歐洲專利說明書出版號No.0 341,584B1公開了包括了在聚乙二醇溶液中的吡苯氧磺鈉的軟膠囊制劑；而英國專利申請書No.2,229,094公開了由脂肪酸甘油酯和/或礦物油或液體石蠟構成的作為呋喃硝胺的載體的明膠膠囊。
軟膠囊或硬膠囊的液體充填物提供了將藥物進行配方的有用的和有利的手段，使得活性物能以半固態、液態或膏狀物的形態加入。在大多數由現有技術提供的軟凝膠膠囊中，主要的目標包括儲存期穩定性和有效的吸收性能或生物利用度。
在癌瘤治療領域中，抗癌藥物的快速和有效的吸收是最重要的，所以為成功地攻擊癌細胞制定劑量/時間服藥法。比如，當準備增大化療藥物對實體癌瘤的毒性時，就給病人服用增強細胞毒的化合物，在隨后的某個時間周期內服用化療藥物，以使該藥物具有增效作用。真對這兩種藥物的迅速和完全的吸收使得醫生可以設定服藥的時間間隔，以得到最大的功效。對于抗腫瘤藥物，腸道外給藥是最普遍的。然而，這樣的給藥方式是有痛感的，而且由醫生操作不方便且費用高。在治療癌瘤時，口服的給藥途徑將消除這個缺點。
本發明的目標是提供用1，2，4-苯并三嗪氧化物制劑的膠囊，當給病人服用此膠囊時，1，2，4-苯并三嗪氧化物能從中快速而完全地被吸收。此外，在儲存期該制劑是穩定的。
1，2，4-苯并三嗪氧化物是已知的化合物。美國專利No.3,980,779公開了如下式的3-氨基-1，2，4-苯并三嗪-1，4-二氧化物組合物作為用于促進牲畜生長的抗生素組合物
其中R和R1中有一個是氫、鹵素、低級烷基、鹵代低級烷基、低級烷氧基、氨基甲酰基、亞磺酰氨基。羧基或羰基低級烷氧基，而R和R1中的另一個是鹵素、低級烷基、鹵代低級烷基、低級烷氧基、氨基甲酰基、亞磺酰氨基、羧基或羰基低級烷氧基。
1992年12月29日發行的美國專利5,175,287公開了使用1，2，4-苯并三嗪氧化物與放射線一起治療腫瘤。1，2，4-苯并三嗪氧化物使腫瘤細胞對射線敏感化，使其對這種治療方式更適合。
霍爾頓(Holden)等人(1992)在《在FSaIIC鼠纖維肉瘤中使用SR-4233增強烷基化試劑的活性》(載JNCI 84187-193)公開了與抗腫瘤烷基化試劑一起使用SR-4233，即3-氨基-1，2，4-苯并三嗪-1，4-氧化物，也是已知的，在下文中有時將其稱作Tirapazamine。對順鉑、環磷酰胺、卡氮芥和苯丙胺酸氮芥四種抗腫瘤烷基化試劑每一種進行了測試，以檢驗Tirapazamine克服缺氧腫瘤細胞對抗腫瘤烷基化試劑耐受力的活性。單獨地和與各種不同數量的抗腫瘤烷基化試劑協同地測試了Tirapazamine。當用單劑的環磷酰胺、卡氮芥或苯丙卡氮芥治療之前服用SR-4233時，觀察到導致對腫瘤細胞的增效細胞毒效果的明顯的劑量增強作用。
國際申請號No.PCT/US89/01037公開了1，2，4-苯并三嗪氧化物作為放射增敏劑和選擇性細胞毒試劑。其他的有關專利包括公開了1，2，4-苯并三嗪氧化物的制備方法的美國專利3,868,372和4,001,410和公開了1，2，4-苯并三嗪氧化物衍生物的美國專利3,991,189和3,957,799。
發明概要本發明提供了包括以精椰子油制劑或大豆油制劑為載體，混合有式(I)的化合物或所述化合物的可藥用鹽的膠囊制劑
式中X是氫、(1-4碳)烴基、OH，NH2，NHR或NRR取代的(1-4碳)烴基、鹵素、羥基、(1-4碳)烷氧基、NH2、NHR或NRR，其中R獨立地選自(1-4碳)低級烷基和(1-4碳)低級酰基，以及被羥基、NH2、(1-4碳)烷基的仲氨基和二((1-4碳)烷基)叔氨基、(1-4碳)烷氧基或鹵素取代的(1-4碳)低級烷基和(1-4碳)低級酰基；當X是NRR時，兩個R一起直接或通過一個氧橋形成嗎啉環、吡咯烷環或哌啶環；n是0或1；以及Y1和Y2獨立地是H、硝基、鹵素、(1-14碳)烴基[包括環烴和不飽和烴基，可任意地被一個或兩個選自鹵素、羥基、環氧基、(1-4碳)烷氧基、(1-4碳)烷硫基、伯氨基(NH2)、(1-4碳)烷基仲氨基、二((1-4碳)烷基)叔氨基、其中兩個烷基連在一起形成嗎啉環、吡咯烷環或哌啶環的二((1-4碳)烷基)叔氨基、(1-4碳)酰氧基、(1-4碳)酰氨基及其硫代的類似物、(1-4碳的)乙酰胺烷基、羧基、(1-4碳)烷氧羰基、氨基甲酰基、(1-4碳)烷基氨基甲酰基、(1-4碳)烷基磺酰基或(1-4碳)烷基磷酰基的取代基取代]，其中該烴基可任意地插入一個單醚鍵(-O-)；或Y1和Y2也可以獨立地是嗎啉基、吡咯烷基、哌啶基、NH2、NHR’、NR’R’O(CO)R’、NH(CO)R’、O(SO)R’或O(POR’)R’，其中R’是可以任意地被羥基、氨基、(1-4碳)烷基仲氨基、二((1-4碳)烷基)叔氨基、嗎啉基、吡咯烷基、哌啶基、(1-4碳)烷氧基或鹵素取代的(1-4碳)烴基。
在本發明中使用的優選化合物是3-氨基-1，2，4-苯并三嗪氧化物(Tirapazamine)。
本發明也涉及一種癌瘤的治療方法，該方法包括給需要進行此治療的哺乳動物服用有效數量的如本文所定義的口服制劑。
該口服制劑裝在軟的或硬的明膠膠囊中。膠囊的總重量含量為200～2000mg，包括5～50％(w/w)的式(I)化合物；50～95％(w/w)的精椰子油或大豆油的油質賦形劑；0～30％(w/w)，優選10～20％(w/w)的單一的或混用的粘度改進劑，其例子為加氫植物油、黃蠟和一硬脂酸甘油酯；以及0～10％(w/w)，優選2～8％(w/w)的單一的或混用的可藥用表面活性劑，其例子為單月桂酸縮水山梨糖醇酯，聚山梨酸酯20、40、60和80，卵磷脂和Potoxamer 124、188、237、338和407。
發明的詳細敘述抗腫瘤劑本發明提供一種治療哺乳類動物的癌瘤，包括人類癌瘤，特別是實體癌瘤的組合物和治療方法。在本發明的這一方面，給生有癌瘤并需要這樣治療的哺乳動物，在施用有效量的癌瘤敏感的化療藥劑之前大約半小時至大約24小時，施用含在軟凝膠膠囊中的有效量的如在本文中所定義的式(I)的化合物。在1993年9月22日登記的美國專利申請系列號No.125,609中敘述了式(I)和化合物的測試，其內容全部引入本文作為參考。
正如在本文中使用的，將腫瘤對化療藥劑的敏感性看作是一種化療藥劑通過任何機理，比如殺死腫瘤細胞、減少細胞增殖或減小腫瘤大小，可以發揮的治療效果。也是正如在本文中使用的，有效量的如本文所定義的式(I)化合物指的是能夠殺死腫瘤細胞或能夠與化療藥劑協同殺死腫瘤細胞的數量。有效量的化療藥劑指的是能夠殺死癌細胞或產生別樣的治療效果，比如減小腫瘤的尺寸或減緩腫瘤細胞生長和增殖的化療藥劑的量。
抗腫瘤藥劑的凝膠膠囊載體在制備本發明的軟凝膠膠囊時，進行了廣泛的研究，提供了將給出相同的穩定性和可快速吸收的軟凝膠膠囊的特性。適當的載體包括精椰子油花生油大豆油PEG 400按照如下的方法進行初步的制備將1.0g Tirapazamine加到各9.0g的每種載體中，放到帶羅口蓋子的玻璃瓶中，進行物理穩定性和化學穩定性評價。
物理穩定性 將藥物/載體混合物(在羅口玻璃瓶中5mL)進行每24小時的溫度循環(5℃～40℃)，并在第0、1、2和4周進行顆粒度監測。
化學穩定性 將藥物/載體混合物(在羅口玻璃瓶中5mL)在70℃儲存4周，將物理穩定性(顆粒度增加)方面顯示出極小變化或沒有變化的試樣進行分析測試化學穩定性。
物理/化學研究表明，精椰子油和大豆油將適合進一步的實驗，而花生油和PEG400發現是不能接受的。化學穩定性的數據示于表1。因此，使用理論確定的有效藥物量制備含有表面活性劑的精椰子油和大豆油制劑(實施例1和2)1.稱量所需數量的藥物。
2.將油和乳化劑混合物加入到藥物中。
3.在大約40℃下熔化混合脂(20％的黃蠟+80％w/w的加氫植物油)并加到步驟2中。
4.在Ultra Turrax均化器中均化混合物3×1分鐘。
表I在70℃6周后用液相色譜測定Tirapazamine/載體的重量估計總不均勻度(ETI)百分數70℃/4周載體初始 A B精椰子油0.30 0.26 0.21花生油 0.24 1.92 1.94大豆油 0.27 1.91 1.90PEG 400 0.24 19.11 19.13實施例1Tirapazamine50mg精椰子油269mg單月桂酸脫水山梨(糖)醇酯13mg黃蠟25.8mg加氫植物油 103.2mg總計 441mg實施例2Tirapazamine50mg大豆油 245mg卵磷脂 5mg黃蠟25.2mg加氫植物油 101.8mg總計 427mg對制劑實施例1和2進行了顆粒度和化學分析，結果列在表II和表III中。
表II對制劑實施例1和實施例2在70℃下儲存4周用激光衍射測定平均顆粒度(μm)顆粒度μm時間點(周) 實施例4 實施例50 90.8 143.11 113.2120.22 133.9147.14 136.7149.7在5℃/40℃循環下4周相對于ETI兩個制劑都是穩定的。
表III在70℃和5℃/40℃之間溫度循環下儲存4周后，用液相色譜測定制劑實施例1和實施例2的重量估計總不均勻度(ETI)的百分數70℃ 5-40℃制劑初始 4周 4周實施例1 0.27 3.41 0.15實施例2 0.20 3.11 0.16無論是用精椰子油還是大豆油制劑，在4周內藥物的顆粒度都沒有明顯的變化。雖然在70℃/4周后觀察到明顯的降解。當儲存在5℃/40℃時，兩種制劑都是化學穩定的。
制備好的膠囊其目標充填重量是280mg(+/-10％)，因此必須對制劑實施例1和2進行調節。得到的制劑顯示在實施例3和4中。
實施例3Tirapazamine50mg精椰子油175.9mg單月桂酸脫水山梨(糖)醇酯9.30mg黃蠟8.96mg加氫植物油 35.84mg總計 280mg
實施例4Tirapazamine 50mg大豆油178.5mg卵磷脂3.68mg黃蠟 7.56mg加氫植物油30.26mg總計 270mg在17周的時期內，和在不同的儲存條件下進行制劑實施例3和4的化學分析。結果示于表IV。
表IV在儲存17周后，用液相色譜測定Tirapazamine的制劑實施例3和4的估計總不均勻度(ETI)百分數在儲存17周后精椰子油制劑的ETI結果初始0.411周 4周17周條件 A B A B A B5℃ 0.28 0.3230℃ 0.370.27 0.38 0.22 0.50 0.4730℃/75％ 0.220.18 0.24 0.32 0.46 0.49RH40℃ 0.210.25 0.38 0.48 1.15 2.87在儲存17周后大豆油制劑的ETI結果初始2.3917周條件 A B30℃ 0.941.0230℃/75％RH0.840.7440℃ 4.524.06A和B表示雙份分析在40℃17周后兩個制劑實施例3和4都顯示出明顯的降解。大豆油制劑實施例在30℃表現出一些降解，而精椰子油制劑則無。
單位劑量/mg的優選制劑和物理/化學穩定性顯示在制劑實施例5中。
實施例5Tirapazamine50mg精椰子油175.9mg單月桂酸脫水山梨(糖)醇酯9.26mg加氫植物油 37mg黃蠟7.4mg總計 280mg以2.1Kg的規模制造制劑實施例5。將加氫植物油和黃蠟稱量到容器中。將容器加熱并攪拌內容物直至熔化。充分混合精椰子油和單月桂酸脫水山梨(糖)醇酯，然后加入到熔融的加氫植物油/黃蠟混合物中。溫熱得到的混合物并攪拌，直至得到均勻的混合物。然后邊攪拌邊向混合物中加入Tirapazamine。將得到的懸浮液進行均勻化。
制劑實施例5對于向膠囊充填顯示出良好的物理特性。這種膏狀物表現出良好的剪切稀化流動特性，在放置18小時以后也不分離。發現這種制劑可以在軟明膠膠囊充填機上加工。表V顯示在制造2.1Kg一批的制劑實施例5的過程中所取的“在線”數據。表VI顯示在將此懸浮物充填到軟明膠膠囊的過程中所取的“在線”數據。
表V對于Tirapazamine軟明膠膠囊懸浮物制備中的在線分析(用紫外線檢測)試樣點Mg/280權利要求的％50mg/280mg頂47.62 95.2446.71 93.42底48.22 96.4448.65 97.30中間 47.80 95.60
表VI在充填軟凝膠膠囊時所取的在線試樣的分析在充填的開始、中間和結束時所取的膠囊(5個膠囊的平均值)進桿液相色譜試驗取樣點 Mg/膠囊 理論值的％ ％相對標準偏差開始 50.12100.2 2.18中間 50.67101.3 0.70末尾 48.7797.50.98在充填的開始、中間和結束時所取的膠囊(5個膠囊的平均值)的重量均勻度取樣點mg范圍/mg開始 284.97278.09-288.19中間 286.09285.14-286.87末尾 282.03278.71-284.41參考優選實施方案敘述了本發明，應該理解，在本發明范圍內的任何改變對本領域的專業人員都是不言而喻的。
權利要求
1.一種包括了明膠殼體內所包封的約200～約2000mg的總內容物重量的如下成分的明膠膠囊大約5～約50％(w/w)的如下式抗癌化合物或所述化合物的可藥用的鹽
式中X是氫；(1-4碳)烴基；OH，NH2，NHR或NRR取代的(1-4碳)烴基；鹵素；羥基；(1-4碳)烷氧基；NH2；NHR或NRR，其中R獨立地選自(1-4碳)低級烷基和(1-4碳)低級酰基，以及被羥基、NH2、(1-4碳)烷基的仲氨基和二((1-4碳)烷基)叔氨基、(1-4碳)烷氧基或鹵素取代的(1-4碳)低級烷基和(1-4碳)低級酰基；當X是NRR時，兩個R一起直接或通過一個氧橋形成嗎啉環、吡咯烷環或哌啶環；n是0或1；以及Y1和Y2獨立地是H、硝基、鹵素、(1-14碳)烴基[包括環烴和不飽和烴，可任意地被一個或兩個選自鹵素、羥基、環氧基、(1-4碳)烷氧基、(1-4碳)烷硫基、伯氨基(NH2)、(1-4碳)烷基仲氨基、二((1-4碳)烷基)叔氨基、其中兩個烷基連在一起形成嗎啉環、吡咯烷環或哌啶環的二((1-4碳)烷基)叔氨基、(1-4碳)酰氧基、(1-4碳)酰氨基及其硫代的類似物、(1-4碳)的乙酰胺烷基、羧基、(1-4碳)烷氧羰基、氨基甲酰基、(1-4碳)烷基氨基甲酰基、(1-4碳)烷基磺酰基或(1-4碳)烷基磷酰基的取代基取代]，其中該烴基可任意地插入一個單醚鍵(-O-)；或Y1和Y2也可以獨立地是嗎啉基、吡咯烷基、哌啶基、NH2、NHR’、NR’R’O(CO)R’、NH(CO)R’、O(SO)R’或O(POR’)R’，其中R’是可以被羥基、氨基、(1-4碳)烷基仲氨基、二((1-4碳)烷基)叔氨基、嗎啉基、吡咯烷基、哌啶基、(1-4碳)烷氧基或鹵素取代的(1-4碳)烴基；大約50％～大約95％(w/w)的選自大豆油和精椰子油的油質賦形劑；大約0％～大約30％(w/w)的粘度改良劑；大約0％～大約10％(w/w)的可藥用表面活性劑。
2.如權利要求1的明膠膠囊，其中所述的抗癌瘤化合物是3-氨基-1，2，4-苯并三嗪。
3.如權利要求1的明膠膠囊，其中所述的抗癌瘤化合物的含量占所述制劑的大約10％～大約25％(w/w)。
4.如權利要求1的明膠膠囊，其中所述的油質賦形劑占所述制劑的大約60％～大約80％(w/w)。
5.如權利要求1的明膠膠囊，其中所述的粘度改良劑選自加氫植物油和黃蠟和一硬脂酸甘油酯。
6.如權利要求1的明膠膠囊，其中所述的可藥用表面活性劑選自單月桂酸脫水山梨(糖)醇酯和卵磷酯。
7.如權利要求1的明膠膠囊，其中所述的粘度改良劑的含量占所述制劑的大約10％～大約20％(w/w)。
8.如權利要求1的明膠膠囊，其中所述的表面活性劑的含量占所述制劑的大約2％～大約8％(w/w)。
9.如權利要求1的明膠膠囊，其中所述的明膠膠囊是軟明膠膠囊。
10.治療哺乳動物癌瘤的方法，該方法包括給需要進行這種治療的所述哺乳動物施用有效量的權利要求1的明膠膠囊。
全文摘要
公開了含有1,2,4－苯并三嗪氧化物和選自大豆油和精椰子油的油質賦形劑的抗癌瘤軟明膠膠囊。
文檔編號A61K47/14GK1200669SQ96197966
公開日1998年12月2日 申請日期1996年8月21日 優先權日1995年9月12日
發明者S·布朗, R·布倫德爾 申請人:圣諾菲藥品有限公司