專利名稱：酸棗仁解郁安神組合物及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種具有解郁安神功效，治療失眠癥、抑郁癥的酸棗仁組合物及其制 備方法，屬于中藥領域。
背景技術：
失眠是一種最常見的睡眠障礙；抑郁癥是一種常見的情感性精神障礙，以顯著而 持久的心境低落為主要特征的綜合癥。我國傳統中醫學認為，不寐即失眠；抑郁癥屬“郁 證”，不寐與郁證均屬于情志疾病范疇，均是由于情志刺激導致人體陰陽氣血失調，臟腑功 能紊亂，以至心神失養或不安所致，是人體致病的重要因素。祖國醫學多從調肝養血安神入 手治療情志異常，臨床療效顯著。現代醫學認為失眠不單是睡眠生理紊亂過程，同時還是 一個心理紊亂過程。研究表明失眠癥的患者多伴有焦慮、抑郁和其它精神病理癥狀。隨著 社會競爭的日益加劇、生活節奏的加快，抑郁癥、失眠等情志疾病的發病率正急劇上升。目 前臨床應用的抗抑郁與鎮靜催眠類藥物多為西藥，毒副作用明顯，價格昂貴，有成癮性等缺 點o人們在長期環境壓力下可導致各種情緒障礙，以抑郁為常見的表現，而失眠又是 精神疾病早期和常見的癥狀。臨床研究表明抑郁癥患者在情緒低落的同時，又常表現出心 煩意亂，焦慮等特征，有80%的病人還可出現嚴重的失眠，因此采用安神開竅中藥治療實屬 必要。現今國內外研究解郁安神類中藥，還是分別按照抗抑郁、鎮靜催眠類西藥的研究思路 進行，不能體現中藥多途徑、多靶點的整體作用。而臨床常采用安神類中藥治療抑郁癥，說 明此類中藥常同時表現解郁、安神兩方面的藥理活性，按照西藥研究模式把它們分割開來， 不符合中醫藥傳統理論和用藥方式。在對近10年來抗抑郁復方中藥的組成及治法進行分析，發現各類抗抑郁藥物中 以安神藥出現頻率為最高，而單味藥中，使用最多的是酸棗仁、遠志。酸棗仁為傳統的解郁 安神類中藥，具有養肝寧心、斂汗生津之功效，用于治療虛煩不眠、神經衰弱、體虛多汗等， 常以單方或復方形式用于虛煩不眠。近年來的化學研究表明酸棗仁藥材中包括皂苷、黃酮、 生物堿類成分，雖有文獻報道酸棗仁皂苷、黃酮類部位均有鎮靜催眠作用，但也有研究對皂 苷的鎮靜催眠藥效表示質疑。而本課題組多年的研究表明酸棗仁生物堿類也具有明顯的鎮 靜催眠和抗抑郁作用，說明這些有效部位的不同配伍變化(包括部位組成和比例的改變) 可引起功效上發生改變。基于上述研究思路，本發明以中醫藥整體理論為基礎，以“解郁安 神”為治療原則，研制出一種治療失眠癥、抑郁癥的中藥有效部位組合物。

發明內容
本發明的目的是提供一種治療失眠癥、抑郁癥的藥物組合物。本發明的另一目的是提供酸棗仁各有效部位的制備方法。本發明的配方的原料組成及重量配比為酸棗仁總皂苷16-200份，酸棗仁總生物堿4-30份，酸棗仁總黃酮0_50份。
優選的原料組成及用量為酸棗仁總皂苷90-160份，酸棗仁總生物堿12-16份，酸 棗仁總黃酮0-10份。最佳方案的原料組成及用量為酸棗仁總皂苷92份，酸棗仁總生物堿13份。本發明中所用酸棗仁(SEMEN ZIZIPHI SPIN0SAE)為鼠李科植物酸棗Ziziphus jujubaMill. var. spinosa (Bunge) Hu ex H. F. Chou 的干燥成熟禾中子。所用藥材為市售的經過檢驗合格的中藥材。在本發明中，所述中藥組合物的劑型可為口服液、片劑、膠囊、軟膠囊、滴丸、合劑 和顆粒劑等，優選為口服液。制備本發明的有效部位的方法包括以下工藝步驟①酸棗仁粉碎，通過40目篩，以石油醚脫脂后，加入6 10質量倍的體積百分濃 度為60% 80%的乙醇水溶液，加熱回流提取2 3次，每次1 3小時，濾過，合并提取 液，濾液濃縮乙醇至無醇味后用2 6倍量水溶解，18% HC1調pH 5，用正丁醇萃取4-6次， 得正丁醇液1及酸水液；②酸水液先以正丁醇萃取4-6次，得正丁醇液2，然后酸水液加氨水調pH12，用 2 5倍量乙酸乙酯萃取3-6次，回收溶劑，濃縮物真空干燥，粉碎，即為酸棗仁總生物堿粉 末；③將正丁醇液1與正丁醇液2合并，得正丁醇中間提取液A液，中間提取液A液以 1 % NaOH洗滌6-10次，合并堿水層，用5% HC1調pH 5，再以正丁醇萃取4_6次，回收溶劑， 濃縮物真空干燥，粉碎，即為酸棗仁總黃酮粉末；④中間提取液A液以NaOH洗滌后的正丁醇液，回收溶劑，濃縮物真空干燥，粉 碎，即為酸棗仁總皂苷粉末；⑤將酸棗仁有效部位酸棗仁皂苷16-200份，生物堿4-30份，黃酮0_50份混合均 勻，加入適宜藥用輔料，按常規方法制成各種制劑。上述制備方法中步驟①中優選方法為酸棗仁粉碎，通過40目篩，以石油醚脫脂 后，加入8質量倍的體積百分濃度為70 %的乙醇水溶液，加熱回流提取2次，每次2小時，濾 過，合并提取液，濾液濃縮乙醇至無醇味后用4倍量水溶解，18% HC1調pH 5，用正丁醇萃取 5次，得正丁醇液1及酸水液。優化方法為步驟②中酸水液先以正丁醇萃取5次，得正丁醇液2。然后酸水液加氨 水調pH12，用3倍量乙酸乙酯萃取5次，回收溶劑，濃縮物真空干燥，粉碎，即為酸棗仁總生 物堿粉末。優化方法為步驟③中將正丁醇液1與正丁醇液2合并，得正丁醇中間提取液A液。 中間提取液A液以1 % NaOH洗滌8次，合并堿水層，用5% HC1調pH 5，再以正丁醇萃取5 次，回收溶劑，濃縮物真空干燥，粉碎，即為酸棗仁總黃酮粉末。優化方法為步驟⑤中酸棗仁總皂苷為92份，酸棗仁總生物堿為13份。本發明的有益效果為根據酸棗仁各部位的極性與酸堿性不同，采用酸堿和溶液 萃取法分離純化的工藝制得，制備方法簡單，產品價格適中。在現有制備工藝中未見同時分 離酸棗仁中三種有效部位的報道。與現有技術相比，以本發明制備的酸棗仁各有效部位組 合而成的組合物，其解郁安神藥理活性超過酸棗仁藥材，且進一步制成的制劑可減少服用 量，增強藥物的順應性，無毒副作用。


圖1酸棗仁各有效部位提取、分離流程圖。
具體實施例方式以下通過實施例來進一步闡述本發明所述藥物組合物的有益效果。實施例實施例1-8的藥材處理方法相同，不同之處僅在于三種酸棗仁有效部位重量配比 的差異，如表1所示，藥材處理方法如下a.酸棗仁粉碎，通過40目篩，以石油醚脫脂后，加入8質量倍的體積百分濃度為 70%的乙醇水溶液，加熱回流提取2次，每次2小時，濾過，合并提取液，濾液濃縮乙醇至無 醇味后用4倍量水溶解，18% HC1調pH 5，用正丁醇萃取5次，得正丁醇液1及酸水液。b.酸水液先以正丁醇萃取5次，得正丁醇液2。然后酸水液加氨水調pH12，用3倍 量乙酸乙酯萃取5次，回收溶劑，濃縮物真空干燥，粉碎，即為酸棗仁總生物堿粉末。c.將正丁醇液1與正丁醇液2合并，得正丁醇中間提取液A液。中間提取液A液 以1 % NaOH洗滌8次，合并堿水層，用5% HC1調pH 5，再以正丁醇萃取5次，回收溶劑，濃 縮物真空干燥，粉碎，即為酸棗仁總黃酮粉末。d.中間提取液A液以NaOH洗滌后的正丁醇液，回收溶劑，濃縮物真空干燥，粉 碎，即為酸棗仁總皂苷粉末。e.將酸棗仁的有效部位酸棗仁總皂苷、酸棗仁總生物堿、酸棗仁總黃酮等如表1 所示混合均勻，加入適宜藥用輔料，按常規方法制成口服液。表18組中藥組合物口服液的原料配比(單位mg)
組別酸棗仁總生物堿酸棗仁總黃酮酸棗仁總皂苷1510652830200
3115020414015551720062040110713092
8200200對8組實施例制成的口服液進行藥效學比較1.材料1. 1實驗動物雄性ICR小鼠(SPF級，體重20士2g)購于中國醫學科學院中國協 和醫科大學實驗動物研究所，合格證號SCXK(京)2009-0008。實驗前在實驗室飼養1周， 適應環境。室溫22士2°C，相對濕度65% 70%。日光照12h，自由飲食、攝水。1.2藥物與試劑鹽酸氟西汀分散片(美國禮來公司，批號9705A，20mg/片)；
6戊巴比妥鈉(廣州化學試劑廠，CP)；利血平注射液(廣東邦民制藥廠有限公司，批號 090918,1ml lmg)；解郁安神顆粒(吉林百姓堂藥業有限公司，批號20100103075，5g/袋)。1. 3實驗儀器水槽、秒表、MC-3數字式溫度體溫計2.灌胃藥液的配置2. 1不同配比復方灌胃藥液的配置將表1中酸棗仁有效部位按不同劑量混合均勻，以蒸餾水溶解，折合成小鼠的等 效劑量按照0. lml/10g灌胃給藥。2. 2陽性對照藥的制備取鹽酸氟西汀分散片(20mg/片)1片，以40ml蒸餾水溶解，配成0. 5mg/ml的藥液， 按照0. 15ml/10g給藥，即為抗抑郁陽性對照組。取解郁安神顆粒(5g/袋)1袋，以40ml蒸餾水溶解，配成0. 125mg/ml的藥液，按 照0. lml/10g給藥，即為催眠陽性對照組。2. 3酸棗仁藥材藥液的配置酸棗仁粉碎，通過40目篩，加入8質量倍的體積百分濃度為70 %乙醇溶液，加熱回 流提取3次，每次2小時，濾過，合并提取液，濾液濃縮至浸膏，真空干燥得酸棗仁粗提物，加 蒸餾水配成79. 4mg/ml的藥液。3.不同配比的復方酸棗仁口服液藥效學評價3. 1將實驗動物按表2分組及給藥，于每日上午9:00 10:00灌胃一次，連續灌胃 14天。分別于第1，5，10天監測體重。3. 2與閾上劑量戊巴比妥鈉協同實驗各組小鼠于給藥第6天，灌胃0. 5h后腹腔 注射閾上劑量戊巴比妥鈉，劑量為40mg/kg。注射后開始計時，記錄睡眠潛伏期及睡眠時間。 以翻正反射消失時為睡眠起始時間，翻正反射恢復為睡眠結束時間。腹腔注射后到睡眠起 始這段時間為睡眠潛伏期，潛伏期超過15min，按15min記錄。3. 3小鼠強迫游泳實驗給藥方案同上，末次給藥后lh進行實驗。實驗前(即第 13天)小鼠訓練游泳6min, 24h后測試將小鼠放入水深10cm的5000ml燒杯內(高20cm, 直徑14cm)，水溫25士2°C。觀察6min，記錄比較各組后4min內小鼠的不動時間。3. 4動物不動行為的評判標準懸尾實驗中動物不動行為的評判標準是小鼠頭部 向下，四肢自然下垂，脊背未向兩側彎曲。小鼠前肢有微幅移動仍視為不動。強迫游泳實驗 中，小鼠微卷軀體，頭部露出，但保持總體水平姿勢漂浮于水面，即為不動時間。3. 5拮抗利血平誘發的小鼠體溫降低實驗動物分組及給藥方案同上。體溫測定 采用數字式電子體溫計。事先用少許硅油涂擦電子體溫計，使之潤滑，將體溫計探頭輕輕插 入小鼠肛門l_2cm，當溫度顯示穩定后記錄讀數，作為基礎體溫。之后灌胃給予相應藥物，lh 后腹腔給藥利血平注射液2. 5mg/kg，然后分別在1、4及24小時后測定體溫，以體溫降低值 (AT = 作為指標，進行統計分析。4統計學分析數據以均值士標準差的形式表示。采用單因素方差分析法進行統計學分析。數 據由SPSS軟件處理，p < 0. 05或p < 0. 01具有顯著性差異。表2實驗動物分組及給藥方案
5 結果本實驗所得數據以均值士標準差的形式表示。數據由SPSS軟件處理，采用單因 素方差分析法進行統計學分析，P < 0. 05或p < 0. 01具有顯著性差異。統計內容包括與 閾上劑量戊巴比妥鈉協同實驗中睡眠潛伏期及睡眠時間、小鼠強迫游泳實驗中不動時間和 拮抗利血平誘發小鼠體溫降低幅度。5.1小鼠體重檢測各組小鼠在第1，5，10，15天的體重統計見表3。結果表明，各組間小鼠體重均無顯 著性差異，且體重變化的幅度和趨勢較為隨意，說明藥物對小鼠體質無明顯影響。表3小鼠體重監測值(g) (x ) 5. 28組實施例的中藥組合物對閾上劑量戊巴比妥鈉鎮靜催眠協同作用的影響各組小鼠睡眠潛伏期和睡眠時間結果見表4。表48組實施例的中藥組合物對小鼠閾上劑量戊巴比妥鈉鎮靜催眠協同作用的影 響(x ±s) 注廣與模型對照組比較p < 0. 05，“與模型對照組比較p < 0. 01由表4結果顯示給藥3、4、5、6、8組與模型對照組比較，睡眠潛伏期差異有高度統計學意義(P <0.01)，明顯縮短各給藥組小鼠睡眠潛伏期。給藥2、3、4、5、6、7、8組與模型 對照組比較，睡眠時間差異有高度統計學意義(P < 0.01)，可以顯著延長各給藥組小鼠閾 上劑量戊巴比妥鈉所致睡眠時間。5. 38組實施例的中藥組合物對小鼠強迫游泳不動時間的影響各組小鼠強迫游泳不動時間結果見表5。表58組實施例的中藥組合物對小鼠強迫游泳實驗不動時間的影響G ) 注與模型對照組比較ρ < 0. 05，#與模型對照組比較ρ < 0. 01小鼠在強迫游泳模型中表現的不動狀態反映了動物的絕望行為，可模擬人類的抑 郁狀態。從表中可以看出，酸棗仁各部位不同配比藥液組與模型對照組比較均能不同程度 的縮短強迫游泳小鼠的不動時間，藥液1、4、6、8組及酸棗仁藥材組與模型對照組比較能顯 著縮短強迫游泳小鼠的不動時間，有統計學意義(P < 0. 01，ρ < 0. 05)。其他組雖能不同 程度地縮短強迫游泳小鼠不動時間，但差異較小。特別是藥液7組小鼠不動時間減少百分 率達到61. 54%，與模型對照組相比較有顯著性差異(ρ < 0. 01)。5. 48組實施例的中藥組合物對利血平誘發小鼠體溫變化的影響實驗結果見表6。表68組實施例的中藥組合物對利血平誘發小鼠體溫變化的影響G ) 注與模型對照組比較ρ < 0. 05，#與模型對照組比較ρ < 0. 01從表中可以看出，腹腔注射利血平Ih時，各組體溫均開始下降，4h內體溫明顯下 降，且24h后體溫并未恢復。解郁安神顆粒對照組、藥液1、2、3、4、5、7組在Ih內具有明顯 拮抗體溫下降的作用，與模型組比較有統計學意義。4h后體溫下降幅度最大，1、2、3、5、7 組體溫下降幅度較模型對照組小，具有明顯拮抗體溫下降的作用體溫變化有統計學意義(P <0. 05或P <0.01)，其余給藥各組也不同程度地降低了利血平的作用幅度，但并無統計學 意義。表6可知，24h時，各組體溫較4h時均有不同程度的恢復。其中藥液3、4、5、7、8組體 溫上升，尤其是藥液4、7組回升明顯。
權利要求
一種酸棗仁解郁安神組合物，其特征在于，它由下列重量份的酸棗仁有效部位所組成酸棗仁總皂苷16 200份，酸棗仁總生物堿4 30份，酸棗仁總黃酮0 50份。
2.根據權利要求1所述酸棗仁解郁安神組合物，其特征在于，它由下列重量份的酸棗 仁有效部位所組成酸棗仁總皂苷90-160份，酸棗仁總生物堿12-16份，酸棗仁總黃酮0-10份。
3.根據權利要求1所述酸棗仁解郁安神組合物，其特征在于，所述酸棗仁總皂苷92份， 酸棗仁總生物堿13份。
4.根據權利要求1-3任意一項所述酸棗仁解郁安神組合物，其特征在于，通過以下方 法制得①酸棗仁粉碎，通過40目篩，以石油醚脫脂后，加入6 10質量倍的體積百分濃度為 60% 80%的乙醇水溶液，加熱回流提取2 3次，每次1 3小時，濾過，合并提取液，濾 液濃縮乙醇至無醇味后用2 6倍量水溶解，18% HC1調pH 5，用正丁醇萃取4-6次，得正 丁醇液1及酸水液；②酸水液先以正丁醇萃取4-6次，得正丁醇液2，然后酸水液加氨水調pH12，用2 5 倍量乙酸乙酯萃取3-6次，回收溶劑，濃縮物真空干燥，粉碎，即為酸棗仁總生物堿粉末；③將正丁醇液1與正丁醇液2合并，得正丁醇中間提取液A液，中間提取液A液以 NaOH洗滌6-10次，合并堿水層，用5 % HC1調pH 5，再以正丁醇萃取4_6次，回收溶劑，濃縮 物真空干燥，粉碎，即為酸棗仁總黃酮粉末；④中間提取液A液以NaOH洗滌后的正丁醇液，回收溶劑，濃縮物真空干燥，粉碎，即 為酸棗仁總皂苷粉末；⑤將酸棗仁有效部位酸棗仁總皂苷16-200份，酸棗仁總生物堿4-30份，酸棗仁總黃酮 0-50份混合均勻，加入適宜藥用輔料，按常規方法制成各種制劑。
5.根據權利要求1-3任意一項所述酸棗仁解郁安神組合物，其特征在于，所述組合物 的劑型為口服液、片劑、膠囊劑、滴丸劑和顆粒劑中的一種。
6.一種酸棗仁解郁安神組合物的制備方法，其特征在于，該方法包括以下步驟①酸棗仁粉碎，通過40目篩，以石油醚脫脂后，加入6 10質量倍的體積百分濃度為 60% 80%的乙醇水溶液，加熱回流提取2 3次，每次1 3小時，濾過，合并提取液，濾 液濃縮乙醇至無醇味后用2 6倍量水溶解，18% HC1調pH 5，用正丁醇萃取4-6次，得正 丁醇液1及酸水液；②酸水液先以正丁醇萃取4-6次，得正丁醇液2，然后酸水液加氨水調pH12，用2 5 倍量乙酸乙酯萃取3-6次，回收溶劑，濃縮物真空干燥，粉碎，即為酸棗仁總生物堿粉末；③將正丁醇液1與正丁醇液2合并，得正丁醇中間提取液A液，中間提取液A液以 NaOH洗滌6-10次，合并堿水層，用5 % HC1調pH 5，再以正丁醇萃取4_6次，回收溶劑，濃縮 物真空干燥，粉碎，即為酸棗仁總黃酮粉末；④中間提取液A液以NaOH洗滌后的正丁醇液，回收溶劑，濃縮物真空干燥，粉碎，即 為酸棗仁總皂苷粉末；⑤將酸棗仁有效部位酸棗仁總皂苷16-200份，酸棗仁總生物堿4-30份，酸棗仁總黃酮 0-50份混合均勻，加入適宜藥用輔料，按常規方法制成各種制劑。
7.根據權利要求6所述酸棗仁解郁安神組合物的制備方法，其特征在于，所述步驟①為酸棗仁粉碎，通過40目篩，以石油醚脫脂后，加入8質量倍的體積百分濃度為70%的乙 醇水溶液，加熱回流提取2次，每次2小時，濾過，合并提取液，濾液濃縮乙醇至無醇味后用 4倍量水溶解，18% HC1調pH 5，用正丁醇萃取5次，得正丁醇液1及酸水液。
8.根據權利要求6所述酸棗仁解郁安神組合物的制備方法，其特征在于，所述步驟② 中酸水液先以正丁醇萃取5次，得正丁醇液2，然后酸水液加氨水調pH12，用3倍量乙酸乙 酯萃取5次，回收溶劑，濃縮物真空干燥，粉碎，即為酸棗仁總生物堿粉末。
9.根據權利要求6所述酸棗仁解郁安神組合物的制備方法，其特征在于，所述步驟③ 中將正丁醇液1與正丁醇液2合并，得正丁醇中間提取液A液，中間提取液A液以1 % NaOH 洗滌8次，合并堿水層，用5% HC1調pH 5，再以正丁醇萃取5次，回收溶劑，濃縮物真空干 燥，粉碎，即為酸棗仁總黃酮粉末。
10.根據權利要求1-3任意一項所述酸棗仁解郁安神組合物在制備治療失眠癥、抑郁 癥藥物的應用。
全文摘要
本發明公開了一種酸棗仁解郁安神組合物及其制備方法，包括酸棗仁總皂苷16-200份，酸棗仁總生物堿4-30份，酸棗仁總黃酮0-50份。根據酸棗仁各部位的極性與酸堿性不同，采用酸堿和溶液萃取法分離純化的工藝制得，制備方法簡單，產品價格適中。在現有制備工藝中未見同時分離酸棗仁中三種有效部位的報道。與現有技術相比，以本發明制備的酸棗仁各有效部位組合而成的組合物，其解郁安神藥理活性超過酸棗仁藥材，且進一步制成的制劑可減少服用量，增強藥物的順應性，無毒副作用。
文檔編號A61P25/20GK101926865SQ20101027872
公開日2010年12月29日 申請日期2010年9月11日 優先權日2010年9月11日
發明者喬衛, 劉婧姝, 周晶, 李陸, 楊奕, 段宏泉, 符敬偉 申請人:天津醫科大學