專利名稱：一種天然蠶絲無絲膠絲纖蛋白芯的制備方法
技術領域：
本發明涉及一種天然蠶絲的處理工藝，特別涉及一種天然蠶絲無絲膠絲纖蛋白芯的制備方法，本發明方法所制備的產品的用途也于同日遞交了專利申請。
背景技術：
目前，在臨床上使用的人體體內手術用補片、支撐物或植入物等醫用器材，都是由不同的原料制備的，因為它們使用部位不同，要求的條件不同，沒有一種原料能夠同時滿足所有的條件可以用來制備這類醫用器材。如疝修補所用的人造網狀補片，制備這類器理想的材材料是強度高、柔韌性好。目前臨床上制備這類補片采用聚丙烯和膨化聚四氟乙烯為原材料，這種原材料強度好、修補牢固、不易復發、無毒性及異物反應，但質地柔性不佳、 比較堅硬。由于疝修補手術需要圍繞男患者精索周圍進行固定且修補部位臨近皮下，因而常常導致精索受到壓迫，血液循環不暢，以致于導致缺血性睪丸炎，睪丸萎縮及射精障礙綜合癥等；且患者從皮膚表面即可觸及補片，會有異物感及不適感；另外由于這種材料不可吸收，這種不適感會伴隨患者終身。再如，肌腱損傷損傷手術修補所使用的外固定補片，需要質地堅韌，這樣才能保證其能夠在術后耐受高強度拉力以免造成手術后的再撕裂；而目前臨床使用的補片是以去細胞的豬皮為原料制備的，這種補片低免疫原性、排斥反應小、力學性能好，能夠在術后耐受高強度拉力，可以滿足臨床肌腱補片所需要求，但是制作工藝繁瑣，成本高昂，且會出現外源性異種異體產品的免疫反應。人造血管及血管搭橋、支架植入作為大血管替代品或擴張梗塞動脈的常規治療方式已廣泛應用于臨床，有明確的治療效果，但繼之產生的問題是血栓形成、擴張部位的再狹窄，因為制造這些醫用器材的原料，是尼龍、滌綸、聚四氟乙稀或鈦，鈦合金、不銹鋼等，這些材料無法附著人內皮細胞形成內皮保護層，因而會導致血栓形成及再次狹窄梗塞。經查閱，雖然臨床上也曾以未處理的蠶絲作為傷口縫線，但由于其容易引起縫合部位嚴重的的炎癥反應，表現為局部組織的紅腫痛熱，滲出，積液，所以并沒有以其作為制備醫療器材原料的記載。

發明內容
本發明人經過大量的實驗研究，終于找到了一種優良的、可制備多種人體體內手術醫用器材的原料及其制備方法。本發明的目的是提供一種天然蠶絲無絲膠絲纖蛋白芯的制備方法。本發明方法通過以下技術方案實現，步驟包括
1)將天然蠶絲生絲編織成體內手術所需任意大小形態的醫用器材；
2)用碳酸鈉和十二烷基硫酸鈉按所述比例配制混合液；之后將醫用器材放入混合液中，在40-80°C的條件下震蕩脫膠30-40分鐘，棄去混合液，混合液各組分的質量比為碳酸鈉去離子水=0.01-0. 10 100，十二烷基硫酸鈉去離子水=0.01-0. 3:100 ；
3)加入與混合液等量的重量百分比濃度為1%的檸檬酸，中和殘留；然后用去離子水將醫用器材震蕩清洗3次，每次10-30分鐘；
4)將步驟3)處理后的醫用器材浸入0.IM含鏈霉蛋白酶磷酸鹽緩沖溶液中，在40-60°C 的條件下震蕩60-120分鐘，進行進一步脫膠；所述0. IM含鏈霉蛋白酶磷酸鹽緩沖溶液的質量比為鏈霉蛋白酶0. IM磷酸鹽緩沖液=1:200-500 ；
5)酶脫膠完畢后，將溶液加熱至40-85°C，滅酶活性10分鐘；
6)將醫用器材用去離子水中清洗3次，每次10分鐘；
7)將醫用器材取出，晾干，用環氧乙烷滅菌，包裝。本發明的優點和特點
1.本發明方法制備的產品具有良好的力學性能和柔韌性，適合制備多種體內醫用器材；且由于蠶絲需要很長一段時間才能徹底降解吸收，所以在本產品降解之前創面已經可以牢固愈合。2.本發明方法制備的產品經動物測試，體內無炎癥反應，免疫排斥反應，毒性反應；體外(力學，細胞學)，獲得了滿意的效果。3.本發明方法制備的產品可作為制備多數醫用器材的原料，如可以制備人體體內手術補片、人造血管或血管支架等。4.通過個性化對待每一位患者，可望很好地解決人造血管及血管搭橋、支架植入后存在的血栓形成及擴張部位的再狹窄問題。實驗證明，本發明產品非常適合細胞的粘附， 生長，增生及分化；使用患者自體上皮細胞，用組織工程的方法在編織人造血管內層添加一層患者本人的內皮組織，即可望解決上述再栓塞及血栓形成的問題。5.本方法所需原料在我國存在廣泛，制備工藝簡單，產品制造成本低；與人工合成相比較，本法方法采用的試劑均無毒，且無廢物殘留，對操作人員及環境無任何毒性傷害。本申請中所采用的名詞具有以下含義
天然蠶絲無絲膠絲纖蛋白芯是指將天然蠶絲經處理后得到的、絲膠蛋白已被徹底去除、且應用于人體時不會引起炎癥反應但仍然保持天然蠶絲力學性能的蠶絲。
具體實施例方式為了理解本發明，下面以實施例做進一步的說明，但不限制本發明。實施例1 制備人體體內手術用補片
將天然蠶絲單根或雙根生絲編織成為尺寸規格為6X7. 5cm、6X7. 5cm、6X13. 8cm、 15 X 15cm、25 X 35cm、網孔直徑為l_2mm的幾種長方形補片。取0. 10克碳酸鈉和3克十二烷基硫酸鈉，溶于1000克去離子水中，充分攪拌，制成混合液；將補片放入混合液中，在60°C 的條件下震蕩脫膠30分鐘；棄去混合液，加入1000克的重量百分比濃度為1%的檸檬酸充分洗滌；再用去離子水震蕩清洗3次，每次20分鐘。將清洗后的補片浸入含鏈霉蛋白酶的 0. IM磷酸鹽緩沖溶液(PH=S)中，在40°C的條件下震蕩90分鐘進行酶脫膠，完畢后，將溶液加熱至85°C，滅酶活性10分鐘；最后，將蠶絲補片在去離子水中清洗3次，每次10分鐘；取出，晾干，用環氧乙烷滅菌，包裝。含鏈霉蛋白酶的0. IM磷酸鹽緩沖溶液(PH=S)的制備取0. IM的磷酸鹽緩沖溶液 (PH=8) 500克，加入1克鏈霉蛋白酶，即得。
實施例2 制備人造血管
將天然蠶絲編織成所需形態的補片；取去離子水1000克，加入1克碳酸鈉和3克十二烷基硫酸鈉，充分攪拌溶解配成混合液；將補片放入混合液中，在80°C的條件下震蕩脫膠 30分鐘；棄去混合液，加入1000毫升重量百分比濃度為1%的檸檬酸充分洗滌；再用去離子水震蕩清洗3次，每次20分鐘。之后將補片浸入含鏈霉蛋白酶的0. IM磷酸鹽緩沖溶液 (PH=S)中，按實施例1繼續操作，即得以天然蠶絲無絲膠絲纖蛋白芯制備的人體體內手術用補片。含鏈霉蛋白酶的0. IM磷酸鹽緩沖溶液(PH=S)的制備取0. IM的磷酸鹽緩沖溶液 (PH=8) 200克，加入1克鏈霉蛋白酶，即得。實施例3 制備人體體內手術用補片
取去離子水1000克，加入0. 5克碳酸鈉和2. 9克十二烷基硫酸鈉，充分攪拌溶解得混合液。取0. IM的磷酸鹽緩沖溶液(PH=S) 300克，加入1克鏈霉蛋白酶，得含鏈霉蛋白酶的0. IM磷酸鹽緩沖溶液(PH=8)。將天然蠶絲編織成所需血管形態，按實施例1進行操作，即得以天然蠶絲無絲膠絲纖蛋白芯制備的人造血管。實施例4 制備血管支架
取去離子水1000克，溶入1克碳酸鈉和1. 5克十二烷基硫酸鈉，充分攪拌溶解得混合液。取0. IM的磷酸鹽緩沖溶液(PH=S) 300克，加入1克鏈霉蛋白酶，得含鏈霉蛋白酶的0. IM磷酸鹽緩沖溶液(PH=8)。將天然蠶絲編織的血管支架，按實施例1的操作進行處理，即得以天然蠶絲無絲膠絲纖蛋白芯制備的血管支架。
權利要求
1. 一種天然蠶絲無絲膠絲纖蛋白芯的制備方法，其特征在于步驟包括1)將天然蠶絲生絲編織成體內手術所需任意大小形態的醫用器材；2)用碳酸鈉和十二烷基硫酸鈉按所述比例配制混合液；之后將醫用器材放入混合液中，在40-80°C的條件下震蕩脫膠30-40分鐘，棄去混合液，混合液各組分的質量比為碳酸鈉去離子水=0.01-0. 10 100，十二烷基硫酸鈉去離子水=0.01-0. 3:100 ；3)加入與混合液等量的重量百分比濃度為1%的檸檬酸，中和殘留；然后用去離子水將醫用器材震蕩清洗3次，每次10-30分鐘；4)將步驟3)處理后的醫用器材浸入0.IM含鏈霉蛋白酶磷酸鹽緩沖溶液中，在40-60°C 的條件下震蕩60-120分鐘，進行進一步脫膠；所述0. IM含鏈霉蛋白酶磷酸鹽緩沖溶液的質量比為鏈霉蛋白酶0. IM磷酸鹽緩沖液溶液=1:200-500 ；5)酶脫膠完畢后，將溶液加熱至40-85°C，滅酶活性10分鐘；6)將醫用器材用去離子水中清洗3次，每次10分鐘；7)將醫用器材取出，晾干，用環氧乙烷滅菌，包裝。
全文摘要
本發明公開了一種天然蠶絲無絲膠絲纖蛋白芯的制備方法，本發明方法制備方法所需原料存在廣泛，工藝簡單；所得產品制造成本低；同時經測試所得產品具有良好的力學性能和柔韌性，無炎癥反應，免疫排斥反應，毒性反應，可作為制備多數醫用器材的材料，如可用于制備人體體內手術補片、人造血管或血管支架等。
文檔編號A61L27/22GK102304812SQ201110263438
公開日2012年1月4日 申請日期2011年9月7日 優先權日2011年9月7日
發明者邱軼偉 申請人:邱軼偉