專利名稱：治療類風濕性關節炎的藥物及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種治療類風濕性關節炎的藥物，具體地說是以中草藥為原料制備的中成藥；本發明還涉及該藥物的制備方法。
背景技術：
現代醫學對類風濕性關節炎(Rheumatoid Arthritis，下簡稱RA)的發病機理尚不十分清楚，目前普遍認為是一極其復雜的自身免疫過程。中醫將本病歸屬于“痹病”(Arthralgia Syndrome)范疇。中醫認為寒冷、潮濕、疲勞、創傷及精神刺激、營養不良等均可成為本病的誘因。營血不足、氣血虛弱、肝腎虧損，復受風寒潮濕是本病的主要因素。
目前RA的發病率仍呈上升趨勢。RA病有反復發作，進行性病變的特點，致殘率很高，對人們的工作、生活影響極大。目前，現代醫學對RA尚無有效的根治辦法。美國的發生率約為成人的1％。我國患病率約為0.32-0.36％，可發生于青少年、成人及老人，女性多于男性。
由于本病的病因不明，目前臨床上，西醫主要采取減輕患者的病癥狀，控制疾病的發展，進行已破環的關節骨的修復，而缺乏根治本病的方案以及預防本病的措施。中醫按臨床病程分期、分型辯證治療。中藥復方治療RA具有獨特的優勢既能夠抗炎鎮痛，又具備免疫抑制及免疫調節效應，表現出整體調節、多層次、多環節、多靶點的作用，而且還有緩解和對抗西藥毒副作用的功效，易于長期服用。
但存在的問題是由于RA病情反復發作，病程長，不易治愈的特點，西藥治療常用非甾體抗炎藥(NSAIDS)、免疫抑制劑、糖皮質激素等進行長期治療，因此，臨床常出現西藥嚴重的不良反應，如胃腸道出血，骨髓抑制，腎功能損害，肺感染等并發癥。中醫中藥的治療雖然具有療效好、易于長期服用等優點，但同時也存在中醫療效可重復性差，缺乏標準化，規范化的藥理、藥化、藥效學的研究。更有中藥現有治療RA的處方及中成藥產品，多用毒副作用大的一些中藥，如附子、制川烏、制草烏、制馬錢子、麻黃、細辛、防己、雷公藤、全竭、蜈蚣、土鱉蟲、毒蛇等，于人體有害。

發明內容
本發明的目的在于改進現有技術之缺點而提供一種規范化、重復性好、無毒副作用、療效佳的治療類風濕性關節炎的藥物。
本發明的另一目的是提供該治療類風濕性關節炎的藥物的制備方法。
為實現上述目的，本發明采取下述設計方案該方案是基于祖國醫學對類風濕性關節炎癥狀的認識及治療原則，參考現代藥理研究成果，從祖國醫藥學寶庫中，篩選出活血祛風、消腫止痛、通利關節的中草藥，按中醫理論組方，提取精華，使其達消炎、鎮痛、通利關節而又無毒副作用的目的；另外，通過標準化的生產制備，使藥理、藥化、藥效規范化。
本發明藥物是由下列組分按重量比制成桑枝 2-6當歸 2-6防風 1-4川牛膝 1-4將上述各組分制成本發明藥物的生產方法是1、按上述重量比取桑枝、當歸、防風、川牛膝藥材，分別經凈選，去除雜質，清水淋洗干凈，切碎，容置于提取罐內，分別加各藥物質量8-16倍量的水，煮沸0.8-1.2小時，各藥液經200目篩網過濾，取濾液，在減壓條件下，各提取液濃縮至相對密度，為1.05-1.08(60℃熱測)的濃縮液，再經120目篩過濾；2、將濾后各藥材，按上述步驟、條件再分別提取濃縮過濾液兩次；3、把上述各藥材三次提取的濃縮液合并，進行噴霧干燥，分別制得桑枝提取物、當歸提取物、防風提取物、川牛膝提取物；4、將上述各藥材提取物經60目篩網過濾，置混合機內進行混合均勻，進行膠囊充填，即為本發明膠囊劑藥品。
本發明選用的桑枝性平，祛風濕，利關節，行水消腫；當歸性溫，補血活血，祛濕散寒，養血除痹；防風性溫，祛風散寒，勝濕止痛，消腫散結；川牛膝性平，活血祛瘀，通利關節。四藥提取物含有下述活血抗炎及止痛的活性成分桑枝黃酮，當歸阿魏酸，當歸多糖，防風香豆素，防風色原酮，防風多糖，川牛膝杯莧甾酮，川牛膝多糖等。四藥合伍，協同共達活血祛風，消腫止痛，通利關節的功能，其適用于類風濕性關節炎的治療及預防保健，如關節腫脹；關節呈對稱性、持續性的疼痛與壓痛；早晨或睡醒之后，關節出現僵硬、活動不靈，需活動或溫暖后方能緩解。實驗室檢查見血沉(ESR)增快；C反應蛋白(CRP)增高；類風濕因子(RF)呈陽性等。
本發明藥物使用方法每日兩次，每次2粒膠囊。
為表明本發明藥物對類風濕性關節炎病癥的治療效果，本發明藥物曾于2003-2004年進行了動物試驗。現把動物試驗設置方案與結果介紹如下1、實驗材料1.1試驗藥物本發明藥[藥品試驗代號生科健絡(JEF)]呈褐色細粉，易吸潮。
批號03001；生產日期2003.12.03；由香港生物科技研究院有限公司提供。
1.2陽性對照藥萬通筋骨片，國藥準字Z20025183號，通化萬通藥業股份有限公司生產，批號20031036。
1.3試驗動物NIH小鼠，由廣東省實驗動物中心提供，動物合格證號2002A022；實驗環境合格證粵檢證字2001C020號。
1.4試劑及藥品致炎劑二甲苯，分析純，廣州化學試劑廠生產。
冰醋酸，AR級，廣州化學試劑廠生產。
1.5劑量設置本發明藥及陽性對照藥的給藥劑量如下表1所示。
表1 按體表面積等效系數換算給藥劑量(g/kg表示克/千克，下同)

劑量設計依據本發明藥給70千克成人每日服用的劑量為1克，按體表積換算成小鼠的等效劑量為0.129克/千克。陽性對照藥均采用相當于成人服用劑量的3倍作為對照劑量，因此，萬通筋骨片成人(70千克)的每日服用劑量為3.077克，按體表面積換算成小鼠的等效劑量為0.397克/千克，3倍劑量為1.190克/千克。
2、實驗方法2.1本發明藥急性毒性試驗2.1.1本發明藥的一次經口最大耐受量試驗選用體重18-22克健康NIH小鼠40只，雌雄各半，實驗前禁食不禁水12小時以上，每只小鼠均一次大劑量給予本發明藥混懸液最大濃度和最大體積0.8毫升；給藥后連續觀察7天，判斷毒性反應，注意小鼠在7天觀察期內是否出現精神、活動、飲食異常情況及死亡情況。對于死亡的小鼠應立即解剖，肉眼觀察重要臟器心、肝、脾、肺、腎等是否有明顯病變。
2.1.2本發明藥的多次給藥的最大耐受量實驗選用體重18-22克健康NTH小鼠40只，雌雄各半，實驗前禁食不禁水12小時以上，然后每隔2小時給藥一次，給予本發明藥混懸液最大濃度進行灌胃0.5毫升/只；全天共給藥4次，給藥后連續觀察7天，判斷毒性反應。記錄小鼠給予受試樣品期間及觀察期內是否出現精神，活動，飲食異常情況及死亡情況，對于死亡的小鼠立即進行解剖觀察心、肝、脾、肺、腎等。計算受試樣品的最大耐受量。
2.2.本發明藥對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的作用選取成年健康NIH小鼠50只，體重25-30克，均為雄性。設置5個劑量組，分別為空白對照組、本發明藥低、中、高劑量組和陽性對照組，每組10只小鼠。
實驗開始前各組小鼠分別給藥3天，其中本發明藥低、中、高劑量組分別給藥劑量為0.129克/千克、0.387克/千克、1.161克/千克，相當于70千克成人臨床擬用劑量的1倍、3倍、9倍；空白對照組給藥等體積的生理鹽水；陽性對照組給予萬通筋骨片1.190克/千克，相當于70千克成人臨床服用劑量3.077克的3倍。于末次給藥30分鐘后開始進行致炎作用。將二甲苯0.05毫升滴于小鼠的右耳，以左耳作為對照。滴加致炎劑后30分鐘后將小鼠脫頸椎處死，沿耳廓基線剪下兩耳，用直徑9毫米的打孔器分別在左右兩耳同一部位打下圓耳片，稱重，求左、右耳片重量之差與左耳重量的比值作為腫脹度，比較組間差異。
腫脹度＝(右耳重-左耳重)/左耳重*100％抑制率％＝(空白組腫脹度-給藥組腫脹度)/空白組腫脹度×100％2.3本發明藥的鎮痛作用試驗(化學剌激法)取體重20±2克的小鼠50只，雌雄各半，隨機分成5組，即空白對照組，本發明藥低、中、高劑量組和陽性對照組，每組10只小鼠。實驗前連續給藥3天，其中本發明藥低、中、高劑量組小鼠灌胃劑量為0.129克/千克、0.387克/千克、1.161克/千克，相當于70千克的成年人每日服用本發明藥的1、3、9倍；陽性對照組給予萬通筋骨片1.190克/千克，相當于70千克成人臨床服用劑量的3倍，相當于70千克成人臨床服用劑量3.077克的3倍；空白對照組小鼠灌胃給予等體積的生理鹽水。于末次給藥1小時后，每鼠腹腔注射0.6％冰醋酸溶液0.1毫升/10克體重，記錄注射致痛劑后20分鐘內各鼠扭體次數，計算藥物的鎮痛百分率。
藥物的鎮痛抑制率％＝(空白組扭體數-給藥組扭體數)÷空白組扭體數×100％3.實驗結果3.1本發明藥急性毒性試驗結果3.1.1本發明藥的一次經口最大耐受量試驗結果小鼠灌胃給予本發明藥混懸液最大濃度(該樣品的最大溶解度為50％，為深褐色勻質溶液)和最大體積0.8毫升后，當天無出現動物死亡；連續觀察7天，小鼠毛色、活動、飲食均正常，無死亡發生。給藥后的第8天處死動物，解剖肉眼觀察心、肝、脾、肺、腎等均無異常發現。由于給藥體積及濃度不能再增大，按體表面積折算成70千克的成年人一次性口服本發明藥的總量不少于155.2克，相當于70千克的成年人每日服用劑量(1克/日)的155倍。
3.1.2本發明藥的多次給藥的最大耐受量試驗結果小鼠當天給予受試樣品最大濃度(該樣品的最大溶解度為50％；為深褐色勻質溶液)共計4次后無一例死亡，連續觀察7天見小鼠毛色光滑，活動良好，飲食正常，無死亡發生。給藥后的第8天處死動物，解剖肉眼觀察心、肝、脾、肺、腎等均無異常發現。提示小鼠給予本發明藥混懸液的總量為1克，即本發明藥對于小鼠的最大耐受量不少于1克，按體重表面積折算成70千克的成年人服用劑量不少于387.9克，相當于70千克的成年人每日服用劑量(1克/日)的約388倍，由此說明，本發明藥在此劑量下，未出現毒性反應。
3.2本發明藥的對二甲苯致小鼠耳腫脹的試驗結果二甲苯致小鼠耳腫脹的試驗結果見表2所示。
表2 對小鼠二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的作用(X±SD，n＝10)


與空白對照組相比，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001，△P＞0.05由以上實驗結果可得，小鼠經二甲苯滴耳后，引起毛細血管的通透性增加，使炎性物質滲出從而導致耳腫脹，本發明藥的抑制率分別為11.4％、33.8％、48.7％。其中本發明藥的中、高劑量組的腫脹度與同期空白對照相對，具有顯著性差異；陽性對照組的抑制率為41.1％，與同期空白組相比，具有顯著性差異；因此，初步認為本發明藥具有一定的抗炎作用，但二甲苯致炎癥模型僅為抗炎藥理作用的初篩，需進一步進行其它抗炎實驗綜合評價藥的作用效果。
3.3本發明藥對化學剌激引起小鼠扭體反應的鎮痛作用本發明藥對冰醋酸引起小鼠腹腔痛疼的鎮痛作用如表3所示。
表3本發明藥對化學剌激引起小鼠扭體的鎮痛作用(X±SD，n＝10)

與空白對照組相比，*P＜0.05，***P＜0.001。
由實驗結果可得，本發明藥的低、中、高劑量組鎮痛抑制率分別為30.3％、53.1％、56.5％；本發明藥的三個劑量組均能減少冰醋酸所致小鼠扭體次數，與同期空白對照組相比，均具有顯著性差異(*P＜0.05，***P＜0.01)；陽性對照組的鎮痛抑制率為41.6％，與同期空白對照組相比具有顯著性差異。
3.實驗結論綜合上述實驗結構提示，本發明藥經小鼠一次及一日多次口服給藥，其最大耐受量相當于70千克的成年人每日服用劑量(1克/日)的155倍和388倍，均未出現毒性反應；對小鼠二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹試驗，本發明藥的中、高劑量均具有顯著的消炎作用，抑制率分別為33.8％和48.7％；對化學剌激引致小鼠扭體試驗，本發明藥的三個劑量組均有顯著的鎮痛作用，抑制率分別為30.3％，53.1％和56.5％。以上試驗中，本發明藥的三個劑量之間有較好的量效關系。在以上試驗中，本發明藥高劑量組的給藥劑量(1.161克/千克)低于陽性對照藥萬通筋骨片的給藥劑量(1.190克/千克)，顯示本發明藥有較好的藥理活性。
具體實施例方式
實施例1本發明按重量比選取下列藥物成分桑枝2，當歸 6，防風1，川牛膝4將上述各組分制成本發明藥物的生產方法是1、按上述重量比取桑枝、當歸、防風、川牛膝藥材，分別經凈選，去除雜質，清水淋洗干凈，切碎，容置于提取罐內，分別加各藥物質量8倍量的水，煮沸0.8小時，各藥液經200目篩網過濾，取濾液，在減壓條件下，各提取液濃縮至相對密度，為1.05(60℃熱測)的濃縮液，再經120目篩過濾；
2、將濾后各藥材，按上述步驟、條件再分別提取濃縮過濾液兩次；3、把上述各藥材三次提取的濃縮液合并，進行噴霧干燥，分別制得桑枝提取物、當歸提取物、防風提取物、川牛膝提取物；4、將上述各藥材提取物經60目篩網過濾，置混合機內進行混合均勻，進行膠囊充填，即為本發明膠囊劑藥品。
5、將上述各藥材提取物經60目篩網過濾，置混合機內進行混合均勻，進行膠囊充填，即為本發明膠囊劑藥品。
實施例2本發明按重量比選取下列藥物成分桑枝6，當歸 2，防風4，川牛膝1；將上述各組分制成本發明藥物的生產方法是1、按上述重量比取桑枝、當歸、防風、川牛膝藥材，分別經凈選，去除雜質，清水淋洗干凈，切碎，容置于提取罐內，分別加各藥物質量16倍量的水，煮沸1.2小時，各藥液經200目篩網過濾，取濾液，在減壓條件下，各提取液濃縮至相對密度，為1.08(60℃熱測)的濃縮液，再經120目篩過濾；2、將濾后各藥材，按上述步驟、條件再分別提取濃縮過濾液兩次；3、把上述各藥材三次提取的濃縮液合并，進行噴霧干燥，分別制得桑枝提取物、當歸提取物、防風提取物、川牛膝提取物；4、將上述各藥材提取物經60目篩網過濾，置混合機內進行混合均勻，進行膠囊充填，即為本發明膠囊劑藥品。
5、將上述各藥材提取物經60目篩網過濾，置混合機內進行混合均勻，進行膠囊充填，即為本發明膠囊劑藥品。
實施例3本發明按重量比選取下列藥物成分桑枝3，當歸 4，防風2，川牛膝3；
將上述各組分制成本發明藥物的生產方法是1、按上述重量比取桑枝、當歸、防風、川牛膝藥材，分別經凈選，去除雜質，清水淋洗干凈，切碎，容置于提取罐內，分別加各藥物質量10倍量的水，煮沸1小時，各藥液經200目篩網過濾，取濾液，在減壓條件下，各提取液濃縮至相對密度，為1.07(60℃熱測)的濃縮液，再經120目篩過濾；2、將濾后各藥材，按上述步驟、條件再分別提取濃縮過濾液兩次；3、把上述各藥材三次提取的濃縮液合并，進行噴霧干燥，分別制得桑枝提取物、當歸提取物、防風提取物、川牛膝提取物；4、將上述各藥材提取物經60目篩網過濾，置混合機內進行混合均勻，進行膠囊充填，即為本發明膠囊劑藥品。
5、將上述各藥材提取物經60目篩網過濾，置混合機內進行混合均勻，進行膠囊充填，即為本發明膠囊劑藥品。
權利要求
1.一種治療類風濕性關節炎的藥物，其特征在于本發明藥物是由下述組分按重量比制成桑枝2-6，當歸2-6，防風1-4，川牛膝1-4。
2.如權利要求1所述的一種治療類風濕性關節炎的藥物的制備方法，其特征在于(1)、按重量比選取下列藥物成分桑枝2-6，當歸2-6，防風1-4，川牛膝1-4；(2)、將上述藥材分別經凈選，去除雜質，清水淋洗干凈，切碎，容置于提取罐內，分別加各藥物質量8-16倍量的水，煮沸0.8-1.2小時，各藥液經200目篩網過篩，取濾液，在減壓條件下，各提取液濃縮至相對密度為1.05-1.08(60℃熱測)的濃縮液，再經120目篩過篩；(3)、將濾后各藥材，按上述步驟、條件再分別提取濃縮過濾液兩次；(4)、把上述各藥材三次提取的濃縮液合并，進行噴霧干燥，分別制得桑枝提取物、當歸提取物、防風提取物、川牛膝提取物；(5)、將上述各藥材提取物經60目篩網過濾，置混合機內進行混合均勻，進行膠囊充填，即為本發明膠囊劑藥品。
全文摘要
一種治療類風濕性關節炎的藥物及其制備方法，其按重量比選用下述組分，桑枝(2－6)、當歸(2－6)、防風(1－4)、川牛膝(1－4)；其制備方法是，將上述藥材分別經洗凈、切碎、置于提取罐內，分別加各藥物質量8－16倍量的水，煮沸0.8－1.2小時，各藥液經200目篩網過篩，取濾液，在減壓條件下，各提取液濃縮至相對密度為1.05－1.08(60℃熱測)的濃縮液，再經120目篩過篩；將濾后各藥材，按上述步驟、條件再分別提取濃縮過濾液兩次；再把上述各藥材三次提取的濃縮液合并，噴霧干燥，分別得各提取物；將上述各藥材提取物經60目篩網過篩，置混合機內混合均勻，進行膠囊充填，即為本發明膠囊劑藥品；本發明藥適用于類風濕性關節炎的治療及預防保健。
文檔編號A61P19/00GK1820772SQ20051000738
公開日2006年8月23日 申請日期2005年2月16日 優先權日2005年2月16日
發明者何國強, 程新敏, 楊成安, 魏英偉, 陳志剛, 黃錦華, 游佩珊, 劉子蕓, 林壯大 申請人:香港生物科技研究院有限公司