專利名稱：凝血酶抑制劑的噴霧干燥的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種恒重的凝血酶抑制劑的制備方法，特別是所述抑制劑的噴霧干燥。本發明還涉及凝血酶抑制劑的新鹽、含所述鹽的藥物以及這些鹽用于制備具有抗血栓形成的藥物的用途。
本發明特別涉及通式I的新鹽、其制備方法和用途，其中式I具有以下含義 其中，n是0、1、2，以及其互變體。
優選環己基丙氨酸的R構型和脫氫脯氨酸的S構型。
在WO96/25426(實施例93，第128頁)中描述了凝血酶抑制劑I的乙酸鹽的制備。在使用乙酸緩沖液操作的RP柱分離活性物質的過程中(參見PCT申請第65頁，25/26行)，產物以乙酸鹽的形式得到，與其在先來歷無關。在貯存過程中，乙酸鹽吸濕并形成大量的副產物。
式I定義的化合物可通過用氨水滴定活性物質的酸性溶液得到。在此過程中，活性物質的內銨鹽沉淀出來，并可通過過濾或離心并干燥，以純的方式得到。通式I的氫氯化物可通過向內銨鹽中加入化學計算量的HCl而得到。適合的溶劑是水、C1-C6醇、C1-C6醚、C1-C6酯、甲苯、二甲苯、DMF、DMSO、THF。通過過濾或離心分離產物然后干燥。
活性物質易于不可逆地吸附有機溶劑。有機溶劑的殘余物對于藥物制劑是不利的。從水中分離將是一種有吸引力的方法。這不會產生恒重的產物，因為活性物質是高度吸濕的。吸濕的程度取決于相對空氣濕度。
為了測量吸濕率，將干燥的活性物質的試樣貯存在干燥器中，其中使用飽和的鹽溶液在恒定溫度下設定好恒定濕度。通過在幾天間隔后稱重來測量重量的變化。通過下式測量重量增加。
重量增加＝(吸附后的重量-干重)×100/干重例如，n＝1的真空干燥的活性物質樣品的重量增加如表1所示。
表1
其中活性物質從制備經貯存至制藥過程均要求在恒定的溫度下的工藝過程的建立是非常耗費的。
本發明的一個目的是制備一種易加工的恒重的活性物質。我們已經令人驚奇地發現，對比所有其它的真空干燥技術，通過噴霧干燥活性物質I可得到恒定的殘余水分含量，并且因此其可在進一步的操作中保持恒重。
此外由于結晶對生物利用率的影響，得到的無定形形式對制藥是特別有意義的。
通過雙組分噴嘴將待干燥的活性物質的水溶液霧化。使用并流的氣流，優選氮氣將分散的液滴干燥為無定形的固體顆粒。通常在旋風分離器中將這些固體顆粒移去。將廢氣過濾并通入滌氣塔中。
待干燥的溶液的濃度在5-40重量％的范圍內，優選15-25重量％范圍。
氣體的入口溫度在80-150℃的范圍內，優選110-130℃的范圍內。
氣體的出口溫度在30-70℃的范圍內，優選50-60℃的范圍內。
霧化氣體的壓力在1.1-10巴的范圍內，優選2-5巴。
這種方法制備的產物是致密的，且其易于進行藥物加工。
這種方法制備的產物可以在敞開的空氣中加工，而其重量不會快速變化。
通式I的噴霧干燥產物在噴霧干燥后的數天后，即使在75％的相對濕度中表現出的重量增加仍小于1％。
通式I的真空干燥和凍干產物在75％的相對濕度中表現出的重量增加大于6％。
此外，比較本發明式I的鹽和富馬酸鹽及乙酸鹽的貯存穩定性，令人驚奇地顯示，本發明的活性物質比相應的有機酸鹽在貯存中更穩定。
表2在開放的容器中于70℃，1巴下貯存。數據為開放容器中基于初始活性物質含量的活性物質含量，以HPLC中的％面積表示。
表3以％面積表示的活性物質HPLC含量，式I中n＝1的活性物質
式I的化合物是凝血酶抑制劑，可用于以下癥狀-其致病機理直接或非直接基于凝血酶的蛋白分解作用的疾病，-其致病機理基于凝血酶依賴的受體活化和信號轉導的疾病，-與體細胞基因表達的刺激[例如通過PAI-1、PDGF(血小板衍生的生長因子)、P-選擇蛋白、ICAM-1、組織因子]或抑制(例如平滑肌細胞中的NO合成)有關的疾病，-基于凝血酶的促有絲分裂作用的疾病，-基于上皮細胞(例如血管內皮細胞)的收縮性和滲透性的凝血酶依賴性變化的疾病。
-凝血酶依賴的血栓栓塞現象，例如深度靜脈血栓形成、肺栓塞、心肌或大腦梗塞、房顫、旁路閉塞，-播散性血管內凝血(DIC)，-再閉塞和用于縮短與溶栓劑(諸如鏈激酶、尿激酶、尿激酶原、t-PA、APSAC、從動物的唾液腺中得到的纖維蛋白溶酶原活化劑以及所有這些物質的重組和變異形式)聯合用藥的再灌注時間，-在PTCA之后早期再閉塞和后期再狹窄的發生，-凝血酶依賴的平滑肌細胞增生，-CNS(例如在阿耳茨海默氏癥中)中活性凝血酶的累積，-腫瘤生長，以及預防腫瘤細胞的粘連和轉移。
新化合物可特別用于治療和預防凝血酶依賴性血栓栓塞現象，例如深度靜脈血栓形成、肺栓塞、心肌或大腦梗塞和不穩定性心絞痛、也可用于播散性血管內凝血(DIC)。它們還進一步適用于與溶栓劑(諸如鏈激酶、尿激酶、尿激酶原、t-PA、APSAC、以及其它纖維蛋白溶酶原活化劑)的聯合藥物治療，以減少再灌注時間和延長再閉塞時間。
其它優選的用途為預防經皮經腔的冠狀血管形成術之后的凝血酶依賴的早期再閉塞和后期再狹窄、預防凝血酶誘導的平滑肌細胞增生、預防CNS(例如在阿耳茨海默氏癥中)中活性凝血酶的累積、控制腫瘤并預防導致腫瘤細胞粘連和轉移的機理。
新化合物還可用于涂覆人造表面，諸如血液透析膜及其所需的導管體系和管線，以及用于血管外循環的充氧器、斯騰特式印模(Stents)和心臟瓣膜。
新化合物還可用于其致病機理是直接或非直接基于激肽原酶，特別是激肽釋放酶的蛋白分解作用的疾病，例如炎性疾病，諸如哮喘、胰腺炎、鼻炎、關節炎、蕁麻疹和其它內部的炎性疾病。
本發明的化合物可采用常規方法，通過口服或非經腸(皮下的、靜脈內、肌內的、腹膜內、直腸內)給藥。也可使用蒸汽或噴霧方式，通過鼻咽腔給藥。所述化合物可特別用于口服。
劑量根據病人的年齡、狀態和體重，以及根據給藥方式而變化。活性物質的每人每日用量通常為口服約10-2000mg，非經腸給藥為約1-200mg。該劑量可以以2-4次單獨給藥或作為緩釋形式每日一次給藥。
新化合物可以常規的固體或液體藥用劑型使用，例如不包或包膜片劑、膠囊、粉末、顆粒、丸劑、栓劑、溶液、軟膏、乳膏和噴霧劑。上述劑型可采用常規方法生產。為此活性物質可與常規藥物助劑一起加工，所述藥物助劑為諸如片劑粘合劑、填充劑、防腐劑、片劑崩解劑、流動調節劑、增塑劑、濕潤劑、分散劑、乳化劑、溶劑、緩釋劑、抗氧化劑和/或推進氣體(參見H.Sucker等Pharmazeutische Technologie，Thieme-Verlag，Stuttgart，1978)。上述方法得到的給藥劑型通常含有0.1-99重量％的活性物質。
實施例實施例1N-((羥基羰基)亞甲基)-(R)-環己基丙氨酰-(S)-3，4-脫氫脯氨酸-(6-脒基-3-甲代吡啶基)酰胺(內銨鹽)將90g(0.116摩爾)化合物N-Boc-N-((叔丁氧基羰基)亞甲基-(R)-環己基丙氨酰-(S)-3，4-脫氫脯氨酸-(6-脒基-3-甲代吡啶基)酰胺-N-乙酰基-(S)-半胱氨酸鹽(WO98/09950的實施例3所述)、360g水和44.56g(濃度38％，0.464摩爾)鹽酸在65℃下加熱2小時。冷卻至室溫后用乙酸乙酯萃取一次，分離相并用25％氨水溶液105g調節pH值為8.2。產物沉淀出來。隨后攪拌1小時、抽濾、冰水洗滌然后在真空烘箱中干燥。得到無色固體形式的N-((羥基羰基)亞甲基)-(R)-環己基丙氨酰-(S)-3，4-脫氫脯氨酸-(6-脒基-3-甲代吡啶基)酰胺41.66g(0.091摩爾，79％)。
實施例2N-((羥基羰基)亞甲基)-(R)-環己基丙氨酰-(S)-3，4-脫氫脯氨酸-(6-脒基-3-甲代吡啶基)酰胺鹽酸鹽將溶于100kg水的29.4KgN-((羥基羰基)亞甲基)-(R)-環己基丙氨酰-(S)-3，4-脫氫脯氨酸-(6-脒基-3-甲代吡啶基)酰胺(純度88％，57摩爾)與5.45Kg(濃度38％，57摩爾)鹽酸混合，通過過濾澄清并噴霧干燥。得到無色粉末狀的27.1kgN-((羥基羰基)亞甲基)-(R)-環己基丙氨酰-(S)-3，4-脫氫脯氨酸-(6-脒基-3-甲代吡啶基)酰胺鹽酸鹽(純度93％，51摩爾，89％)。
實施例3N-((羥基羰基)亞甲基)-(R)-環己基丙氨酰-(S)-3，4-脫氫脯氨酸-(6-脒基-3-甲代吡啶基)酰胺二鹽酸鹽將3.2g(6.1毫摩爾)N-((羥基羰基)亞甲基)-(R)-環己基丙氨酰-(S)-3，4-脫氫脯氨酸-(6-脒基-3-甲代吡啶基)酰胺鹽酸鹽加入40ml水中，且在加入1M鹽酸6.1g之后，將溶液冷凍干燥。得到無色粉末狀的3.25g N-((羥基羰基)亞甲基-(R)-環己基丙氨酰-(S)-3，4-脫氫脯氨酸-(6-脒基-3-甲代吡啶基)酰胺二鹽酸鹽(6.1毫摩爾，100％)。
權利要求
1.恒重的式I凝血酶抑制劑及其互變體的制備方法 其中，n是0、1、2，其中，噴霧干燥活性物質的水溶液。
2.權利要求1的方法，其中待干燥的溶液的濃度在5-40重量％的范圍內。
3.權利要求1或2中的方法，其中氣體入口溫度在30-70℃的范圍內。
4.式I的化合物及其互變體和立體異構體， 其中，n是0、1、2。
5.無定形形式的權利要求4的化合物。
6.一種藥物，除了含有常規的載體和助劑之外，還含有權利要求4或5的式I化合物。
7.權利要求4或5的式I化合物用于制備治療或預防以下疾病的藥物的用途·其致病機理直接或非直接基于凝血酶的蛋白分解作用的疾病，·其致病機理基于凝血酶依賴的受體活化和信號轉導的疾病，·與體細胞基因表達的刺激或抑制有關的疾病，·基于凝血酶的促有絲分裂作用的疾病，·基于上皮細胞的凝血酶依賴的收縮性和滲透性的變化的疾病。·凝血酶依賴的血栓栓塞現象，·播散性血管內凝血，·再閉塞和用于縮短與溶栓劑聯合用藥的再灌注時間，·在PTCA之后早期再閉塞和后期再狹窄的發生，·凝血酶依賴的平滑肌細胞增生，·CNS中活性凝血酶的累積，·腫瘤生長，以及預防腫瘤細胞的粘連和轉移。
8.用于涂覆表面的權利要求4或5中的式I化合物。
全文摘要
本發明涉及恒重的式I凝血酶抑制劑及其互變體的制備方法,其中,n是0、1、2,其中,噴霧干燥活性物質的水溶液。
文檔編號A61P35/00GK1350545SQ00807276
公開日2002年5月22日 申請日期2000年5月3日 優先權日1999年5月10日
發明者B·沙菲爾, G·哈姆斯, H·阿舍爾, G·A·克雷 申請人:巴斯福股份公司