專利名稱：骨生長促進性化合物的控釋聚合組合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及改進的骨生長促進性化合物的控釋體系和用于形成它的可流動組合物。該可流動組合物由熱塑性聚合物、骨生長促進性化合物和有機溶劑組成。該可流動組合物能夠形成生物可降解的和/或生物可侵蝕的、多微孔的固體聚合物基質。該基質可用作一種植入患者(人和動物)體內某些組織向其釋放骨生長促進性化合物的植入物。
背景技術：
生物可降解的聚合物可用于很多醫學應用，尤其是藥物釋放器件。很多所使用的生物可降解的聚合物是熱塑性類型的。由熱塑性樹脂制成的聚合物通常在高溫下液化或軟化，在冷卻后重新固化。這種類型的聚合物一般在插入體內之前一般形成使用所需的結構，例如作為縫合線、手術夾、鉤環、植入物等。植入體內后，這些聚合物保持它們的形狀。
用于釋放藥物的器件，一般在體外將藥物結合到聚合組合物中，并形成所需的形狀。然后將這種固體植入物通常通過切口插入人、動物、鳥等體內。或者，可以將由這些聚合物組成的小的離散粒子通過注射器注入到體內。但優選的是，可以將某些聚合物作為可流動的聚合物組合物經注射器注射。
用作生物可降解的控釋藥物釋放體系的可流動聚合組合物在專利文獻中作了描述，例如美國專利No.4,938,763；5,077,049；5,324,519；5,632,727；5,599,552；5,702,716；5,487,897；5,660,849；5,278,201；5,198,220；5,447,725；5,242,910；5,733,950；5,739,176；5,945,115；5,744,153；5,759,563；5,660,849和6,143,314。
通常經由注射器，以可流動的物理狀態將這些組合物施用到肌體。組合物一到體內就轉化為固體。有一類聚合物組合物是由溶解或分散在有機溶劑中的無反應性熱塑性聚合物或共聚物組成。將這種聚合溶液放置在體內，在那里聚合物隨著溶劑逸散或擴散至周圍肌體組織而發生膠凝化或沉淀性固化。而且，該專利文獻還描述了改進的聚合組合物，它就地形成固體基質，從而形成植入物，用于藥物在所需時間內持續釋放。
利用這種技術的商業上可得到的產品實例有ATRIDOXTM產品，它是一種齦下控釋產品，由兩種注射混合體系組成。注射器A含有450mgATRIGEL釋放體系，它是一種生物可吸收的可流動聚合制劑，由溶解在63.3％N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)中的36.7％聚(DL-丙交酯)(PLA)組成。注射器B含有抗菌鹽酸強力霉素，相當于42.5mg強力霉素。
K.P.Andriano et al.，J.Biomed.Mater.Res.(Appl.Biomater.)，5336-43(2000)公開了關于從可吸收的油灰樣聚合物基質中釋放的骨形態形成性蛋白質的成骨潛力的初步體內研究。R.L.Dunn et al.，Portland BoneSymposium 1999，Oregon Health Sciences University，522至528頁研究了從可吸收的油灰樣基質中釋放的骨形態形成性蛋白質的骨誘導性。
對于持續釋放的植入物(包括但不限于可流動組合物)中某些骨生長促進性化合物(尤其是某些小分子)釋放速率的最佳控制問題的探索是從來沒有終止過。為此，人們需要有一種能夠較容易地控制其中某些骨生長促進性化合物的釋放速率的可流動組合物，尤其需要該組合物能持續釋放化合物較長時間。
發明概述本發明的目的是提供改進的聚合組合物，其中骨生長促進性化合物的釋放速率與聚合物的降解速率之間達到平衡。本發明的另一目的是提供就地形成植入物的改進的聚合物組合物，它在所需部位足夠快地降解而不會阻礙骨的生長。
本發明提供下列各項適合于在患者內就地形成植入物的藥物組合物，包含(a)一種藥學上可接受的、生物可降解的熱塑性聚合物或共聚物，它不溶于水或體液；(b)一種生物可相容的有機溶劑，它增溶該熱塑性聚合物、可就地分散在體液中、易溶于水、并能夠從聚合物體系中逸散至周圍組織液使該熱塑性聚合物在那里形成植入物；和(c)一種治療有效量的化合物或其藥學上可接受的鹽，選自下面這組
(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸；7-[(4-丁基-芐基)-甲磺酰基-氨基]-庚酸；和7-{[2-(3，5-二氯-苯氧基)-乙基]-甲磺酰基-氨基}-庚酸組成的組。
更確切地，本發明提供上述組合物，其中該組合物在局部給藥部位或者附近形成控釋植入物。而且，本發明提供上述組合物，其中該組合物在骨折、骨損傷或骨缺損部位或者附近形成控釋植入物。
更確切地，本發明提供上述組合物，其中該化合物是(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸的鈉鹽。而且，本發明提供上述組合物，其中該化合物是(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸。
更確切地，本發明提供上述組合物，其中該化合物的量為該組合物的約5至約50mgA/ml之間。進而更確切地，本發明提供上述組合物，其中該化合物的量為該組合物的約5、10或50mgA/ml。
更確切地，本發明提供上述組合物，其中該聚合物選自由聚丙交酯、聚乙交酯及其共聚物組成的組。更確切地，本發明提供上述組合物，其中該共聚物具有約0.20dl/g至約0.40dl/g的特性粘度。進而更確切地，其中該共聚物具有約0.20dl/g的特性粘度。
更確切地，本發明提供上述組合物，其中該共聚物是聚-乳酸-共-乙醇酸(PLGH)。進而更確切地，本發明提供上述組合物，其中乳酸與乙醇酸之比為約1比約1。
更確切地，本發明提供上述組合物，其中該共聚物是聚乙二醇(PEG)封端的聚-乳酸-共-乙醇酸(PLGH)。進而更確切地，本發明提供上述組合物，其中PEG與PLGH的重量％在約3至約5％之間。
更確切地，本發明提供上述組合物，其中該溶劑是N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)。進而更確切地，本發明提供上述組合物，其中該共聚物是聚-乳酸-共-乙醇酸(PLGH)并且其中該溶劑是N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)。本發明提供這樣的組合物，其中在溶液中PLGH與NMP的重量百分比在約30％至約60％的PLGH比約70％至約40％的NMP之間。進而更確切地，本發明提供上述組合物，其中在溶液中PLGH與NMP的重量百分比選自如下約37％PLGH比約63％NMP；約45％PLGH比約55％NMP；約50％PLGH比約50％NMP；約55％PLGH比約45％NMP。最確切地，本發明提供上述組合物，其中在溶液中PLGH與NMP的重量百分比為約50％PLGH比約50％NMP。
另外，本發明提供適合于在患者體內就地形成生物可降解的植入物的藥物試劑盒，它包含A)一種器件，含有化合物或其藥學上可接受的鹽，選自下面這組(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸；7-[(4-丁基-芐基)-甲磺酰基-氨基]-庚酸；和7-{[2-(3，5-二氯-苯氧基)-乙基]-甲磺酰基-氨基}-庚酸；和B)一種器件，含有一種生物可降解的、生物可相容的、不溶于水或體液的藥學上可接受的熱塑性聚合物和一種可就地分散在體液中且易溶于水的藥學上可接受的溶劑的一種可流動組合物，其中該聚合物和該溶劑在該可流動組合物中的濃度和配比對于該可流動組合物接觸體液時就地形成植入物是有效的；C)其中這兩種器件均具有一個該化合物或該可流動組合物的出口、一個通過該出口排出該化合物或該可流動組合物的排出器和一個與該出口匹配的中空管；其中在將兩個器件的內容物混合在一起之后立即釋放含有該混合物的器件的內容物至患者體內。
更確切地，本發明提供上述藥物試劑盒，其中聚合物與溶劑的濃度和配方可有效地在患者體內形成空間填充性植入物。
更確切地，本發明提供上述藥物試劑盒，其中該聚合物選自由聚丙交酯及其與乙交酯的共聚物組成的組。進而更優選地，本發明提供上述藥物試劑盒，其中該共聚物是聚-乳酸-共-乙醇酸(PLGH)。進而更優選地，本發明提供上述藥物試劑盒，其中乳酸與乙醇酸之比為約1比約1。
更確切地，本發明提供上述藥物試劑盒，其中該溶劑是N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)。更確切地，本發明提供上述藥物試劑盒，其中該化合物是凍干的形式。
而且，本發明提供在活體內就地形成植入物的方法，包含下列步驟(a)將無反應性、水不溶的生物可降解的聚合物溶于生物可相容的水易溶性有機溶劑，它可就地分散在體液中形成可流動組合物；(b)向該可流動組合物加入有效量的化合物，產生一種藥物組合物；(c)將該藥物組合物放置在體內；和
(d)使該溶劑逸散，產生固體或凝膠植入物，隨著該植入物的生物降解通過擴散、侵蝕或擴散與侵蝕的組合方式釋放該化合物；其中該化合物或其藥學上可接受的鹽選自下面這組(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸；7-[(4-丁基-芐基)-甲磺酰基-氨基]-庚酸；和7-{[2-(3，5-二氯-苯氧基)-乙基]-甲磺酰基-氨基}-庚酸組成的組；其中該聚合物選自由聚丙交酯及其與乙交酯的共聚物組成的組；其中該溶劑是N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)。
更確切地，本發明提供上述方法，其中該共聚物是聚-乳酸-共-乙醇酸(PLGH)。更確切地，本發明提供上述方法，該方法進一步包含通過注射器就地釋放所述液體。更確切地，本發明提供上述方法，其中該植入物是在體內骨折、骨缺損或骨損傷部位或者附近形成的。而且，本發明提供按照上述方法產生的體用生物可降解的藥物釋放植入物。
另外，本發明提供用于在哺乳動物中達到治療效果的試劑盒，該哺乳動物被規定同時施用下列成分(1)和(2)，每種成分構成所述試劑盒的一部分，該試劑盒包括結合(1)一種治療有效量的活性成分，所述活性成分是(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸；7-[(4-丁基-芐基)-甲磺酰基-氨基]-庚酸；或7-{[2-(3，5-二氯-苯氧基)-乙基]-甲磺酰基-氨基}-庚酸；或者其藥學上可接受的鹽，和藥學上可接受的載體或稀釋劑，此為第一單元劑型；(2)一種生物可降解的、生物可相容的、不溶于水或體液的藥學上可接受的熱塑性聚合物和一種藥學上可接受的、易溶于水的可就地分散在體液中的溶劑的一種可流動組合物，其中該聚合物和該溶劑在該可流動組合物中的濃度和配比對于該可流動組合物接觸體液時就地形成植入物是有效的，此為第二單元劑型；和(3)施用成分(1)和(2)達到所需治療效果的方法的指導。
更確切地，本發明提供上述試劑盒，其中該活性成分是(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸的鈉鹽。更確切地，本發明提供上述試劑盒，其中該活性成分是(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸的游離酸。
更確切地，本發明提供上述試劑盒，其中該聚合物選自由聚丙交酯、聚乙交酯及其共聚物組成的組。進而更確切地，本發明提供上述試劑盒，其中該聚合物選自由聚丙交酯及其與乙交酯的共聚物組成的組。進而更確切地，本發明提供上述試劑盒，其中該共聚物是聚-乳酸-共-乙醇酸(PLGH)。進而更確切地，本發明提供上述試劑盒，其中乳酸與乙醇酸之比為約1比約1。
更確切地，本發明提供上述試劑盒，其中該溶劑是N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)。而且，本發明提供上述試劑盒，其中該化合物是凍干的形式。
本發明涉及一種用于特異性骨生長促進性化合物的聚合物體系、一種使用這類聚合物體系進行治療性處置的方法、和該聚合物體系的一種前體，一種可流動組合物。
本發明提供可流動組合物，它通過形成生物可降解的固體或凝膠植入物而在局部注射部位(例如骨折部位、骨缺損部位、骨損傷部位)提供持續釋放。更確切地，本發明提供組合物和方法，用于在緩釋生物可降解的以聚合物為基礎的釋放體系中釋放骨生長促進性化合物，它優選的是可注射的。
該聚合物體系是生物可相容的、生物可降解的熱塑性聚合物和骨生長促進性化合物的多微孔的固體或凝膠基質。
本發明的體系提供從基質中釋放骨生長促進性化合物的速率與程度的最佳控制。該可流動組合物含有有機溶劑、生物可相容的、生物可降解的熱塑性聚合物和骨生長促進性化合物。
該聚合物體系是通過對兩種膠凝介質的每一種均施用可流動組合物而形成a)肌體內部的體液，和b)肌體外部的含水介質。施用后，可流動組合物膠凝或凝固而形成聚合物體系。可流動組合物向肌體直接給藥就地形成聚合物體系。外部加可流動組合物至含水介質，在體外形成聚合物體系。在體外形成的固體可植入聚合物體系然后能夠經手術放置在體內。在所有實施方式和應用中，聚合物體系基本上不溶于水、水溶液和體液。
在形成聚合物體系的方法中有一部分是決定著產生釋放速率和改進釋放的控制。可流動組合物與體液在體內的就地相互作用使組合物凝固或膠凝成為聚合物體系，這至少在部分程度上控制所需的釋放方式使其成為下述參數和組分變化的函數。這些組分不通過可流動組合物的簡單聯合，將不會產生本發明的控制釋放方式。當可流動組合物與體液就地接觸時，有機溶劑擴散至周圍介質(體液)，聚合物凝固或膠凝成固體或凝膠基質(聚合物體系)。因為體液含有親脂性組分并且圍繞可流動組合物動態流動，所以當有機溶劑具有從易溶至不溶的水溶性時，發生凝固或膠凝。
在將本發明的組合物放置在體內時，它被保留在骨折、缺損或損傷的部位局部。所得聚合物體系可以采取的形狀是該組合物可在骨折、缺損或損傷處放入的形狀。
根據本發明的參數和條件，聚合物體系能夠控制骨生長促進性化合物的體內持續釋放。確切而言，從本發明聚合物體系中釋放骨生長促進性化合物的速率和程度被控制在狹窄的速度與量范圍內。這種控制是借助下列變化而實現的(a)聚合物類型和分子量，(b)聚合物的濃度，(c)骨生長促進性化合物的濃度，和(d)骨生長促進性化合物的形式。優選地，本發明骨生長促進性化合物從聚合物體系中釋放的速率和程度可以通過改變以下兩種條件來控制(1)聚合物的類型和分子量，和/或(2)聚合物的濃度。
更優選地，該控制是通過改變聚合物的分子量而實現的。在優選的實施方式中，釋放的速率隨著聚合物分子量降低而增加。
本發明的方法是以骨生長促進性化合物從聚合物體系中就地控制釋放的治療效果為基礎的。可流動組合物的植入發生在需要治療性處置的患者體內骨折、骨缺損或骨損傷的部位或附近。例如，它可以被植入在骨折處，使它適應和符合骨折的形狀。優選地，它被植入在骨折、缺損或損傷部位或附近的軟組織中，例如肌肉或脂肪。該組合物向植入部位給藥可以借助任意適合于施用可流動組合物的方法，例如借助注射器、針頭、套管或導管。可以借助已知的手術技術插入充當植入物的聚合物體系。
發明詳述本發明涉及一種用于控釋骨生長促進性化合物的聚合物體系、產生這類體系的可流動組合物、和在治療性處置中使用這樣一種體系的方法。本發明聚合物體系的優點在于能夠控制所釋放的骨生長促進性化合物的量和體內釋放的速率。
本發明提供一種可注射的可流動組合物，它通過形成生物可降解的固體或凝膠藥庫、基質或植入物，在局部注射部位(例如骨折部位、骨缺損部位、骨損傷部位)產生持續釋放。
更確切地，本發明提供一種組合物和方法，用于緩釋生物可降解聚合物基的釋放體系中釋放骨生長促進性化合物。
該聚合物基的釋放體系含有骨生長促進性化合物，它溶解或分散在生物可降解的熱塑性聚合物在有機溶劑中的溶液或分散體中。可流動組合物一經注射，有機溶劑從注射部位擴散開來，導致聚合物沉淀或膠凝；由此將化合物包埋在緩釋藥庫中。隨后通過從聚合基質中擴散以及該基質的侵蝕而釋放化合物。聚合基質被水解作用緩慢侵蝕，最終從給藥部位消失。聚合物的分子量和濃度能夠控制化合物的體內釋放以及基質的降解速率。
本發明的聚合物基釋放體系提供骨生長促進性化合物的體內持續釋放，持續一段時間，以減少突然釋放或使突然釋放達到最小，這樣能有效促進有此需要的患者的骨生長。化合物突然大量釋放將導致由于化合物的局部作用(例如刺激作用)而引起的局部耐受性差，并且將減少發揮功效的化合物量。本發明組合物的優點是，一經單次局部注射，它們一開始就減少或降低突然釋放，但是仍然保持在有效水平上釋放化合物持續一段時間。
該聚合物體系是這樣制備的，使可流動組合物與膠凝基質接觸，使組合物凝固或膠凝成為固體、多微孔的聚合基質或凝膠聚合基質。可流動組合物含有熱塑性聚合物或共聚物與適合溶劑的組合。構成基質實體的聚合物或共聚物實質上不溶于水和體液，優選基本上完全不溶于水和體液。基質實體的不溶性使其能夠充當骨生長促進性化合物的單一控釋部位。在動物、例如哺乳動物體內，該聚合物或共聚物也是生物可相容的和生物可降解的和/或生物可侵蝕的。生物降解性使患者能夠代謝聚合物基質，以便它能夠被患者排泄而無需進一步手術除去之。因為可流動組合物和聚合物體系是生物可相容的，插入過程和聚合物體系在體內的存在不會導致植入部位的實質性組織刺激作用或壞死。本發明組合物是作為可流動組合物直接給藥至肌體組織的，例如骨缺損或骨折部位或附近的軟組織，其中聚合物體系的植入物是就地形成的。
術語“患者”表示動物例如人，寵物例如狗、貓和馬，和牲畜例如牛、豬和羊。特別優選的患者是哺乳動物，包括雄性和雌性，人是進而更優選的。
本發明的骨生長促進性化合物如下(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸，包括它的游離酸和藥學上可接受的鹽，例如鈉鹽。這種化合物及其藥學上可接受的鹽可以按照已公布的國際專利申請WO 99/19300所述合成方法加以制備，引用在此作為參考文獻。
7-[(4-丁基-芐基)-甲磺酰基-氨基]-庚酸及其藥學上可接受的鹽。這種化合物及其藥學上可接受的鹽可以按照已公布的國際專利申請WO98/28264所述合成方法加以制備，引用在此作為參考文獻。
7-{[2-(3，5-二氯-苯氧基)-乙基]-甲磺酰基-氨基}-庚酸及其藥學上可接受的鹽。這種化合物及其藥學上可接受的鹽可以按照已公布的國際專利申請WO 98/28264所述合成方法加以制備，引用在此作為參考文獻。
上述三種化合物能夠促進骨細胞與組織的生長與生存，或者增加功能性骨細胞與組織和骨髓等的活性。
適合于結合到控釋聚合物體系的固體基質中的熱塑性聚合物是固體、藥學上可相容的和可由細胞作用和/或體液作用而生物降解的。適當的熱塑性聚合物的實例包括二醇與二元羧酸的聚酯或羥基羧酸的聚酯，例如聚丙交酯、聚乙交酯及它們的共聚物。更優選的聚合物是共聚物，聚-乳酸-共-乙醇酸(縮寫為PLGH)，它一經水解，產生乳酸和乙醇酸。加入聚乙二醇(PEG)可以進一步減少這種共聚物的爆發性釋放，生成PEG封端的PLGH。
優選用在本發明中的材料是聚丙交酯、聚乙交酯及其共聚物。這些聚合物能夠用于改進聚合物體系，部分原因是它們顯示優異的生物可相容性。它們的組織刺激作用、炎癥、壞死或毒性，即使有的話，也很少產生。在水的存在下，這些聚合物分別產生乳酸和乙醇酸，它們容易被肌體代謝。聚丙交酯還能結合乙交酯單體，以增強所得聚合物的降解。這些聚合物還能夠用于改進本發明的聚合物體系，因為它們有效控制骨生長促進性化合物從聚合物體系中釋放的速率，并且因為它們導致骨生長促進性化合物局部駐留在骨折、缺損或損傷的部位。這些聚合物是優選的，還因為它們足夠快地從骨折、缺損或損傷部位降解，不會阻礙骨折、缺損或損傷部位的骨生長。
熱塑性聚合物在組合物有機溶劑中的溶解性或混溶性將因多種因素而異，例如聚合物的結晶性、親水性、形成氫鍵的能力和分子量。所以，調節聚合物的分子量和在溶劑中的濃度，能達到結合骨生長促進性化合物所需的混溶性以及所需的釋放速率。
按照本發明的實踐，熱塑性聚合物、溶劑和骨生長促進性化合物的可流動組合物是一種穩定的可流動的物質。在本發明中，優選地得到骨生長促進性化合物在有機溶劑中的均勻溶液。熱塑性聚合物基本上可溶于有機溶劑。將可流動組合物一經放置在體內，溶劑將逸散，聚合物將固化或膠凝化，形成在固體或凝膠聚合基質內具有骨生長促進性化合物的聚合物體系。
盡管不希望將本發明限于具體作用機理，但已經發現，用在本發明中的聚合物的分子量明顯影響骨生長促進性化合物的釋放速率和聚合物從骨折、缺損或損傷部位降解的速率，只要使用可流動組合物作為中間體。
就某些優選用在本發明中的聚合物而言，調節聚合物或共聚物的分子量在約0.2至約0.4特性粘度(I.V.，以分升/g表示)范圍內，以有效持續釋放骨生長促進性化合物。所結合的骨生長促進性化合物的典型釋放速率發生在約0.2(約8,000至約16,000分子量)或約0.3(約23,000至約45,000分子量)的I.V.下，但是可以因組合物的特定組分而異。就大多數體系而言，優選的是調節聚合物的分子量至約0.2I.V.，以有效持續釋放骨生長促進性化合物。分子量的量度單位是道爾頓。
就聚(DL-丙交酯)或丙交酯-共-乙交酯聚合物體系而言，所需的分子量范圍為約0.2至約0.4I.V.，約0.2的I.V.是最優選的。可以借助任意多種方法改變聚合物的分子量。方法的選擇通常取決于聚合物組合物的類型。用在本發明中的優選聚合物是商業上可得到的。
用在本發明中非常優選的熱塑性聚合物如下PLGH共聚物，其中乳酸與乙醇酸之比為1∶1，特性粘度為約0.2dl/g(在商業上可從Boehringer Ingelheim得到，為Copolymer RESOMERRG 502H)(約12,000分子量)；PLGH共聚物，其中乳酸與乙醇酸之比為1∶1，特性粘度為約0.3dl/g(在商業上可從Boehringer Ingelheim得到，為Copolymer RESOMERRG 503H)(約37,000分子量)；PLGH共聚物，其中乳酸與乙醇酸之比為1∶1，特性粘度為約0.4dl/g(在商業上可從Boehringer Ingelheim得到，為Copolymer RESOMERRG 504H)(約47,000分子量)；和聚乙二醇(PEG)封端的PLGH共聚物，其中乳酸與乙醇酸之比為1∶1，特性粘度為約0.79dl/g(在商業上可從Boehringer Ingelheim得到，為PLG-PEG)(約52,000分子量)。
通過適當地選擇聚合物的分子量和粘度，從聚合物體系中釋放本發明骨生長促進性化合物的速率和程度可以從非常快到非常慢。例如，按照本發明，可以延緩骨生長促進性化合物(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸鈉鹽的釋放速率，以產生在約七天內基本上完全的化合物釋放。利用更大粘度的根據本發明的聚合物，可以延長時間至約十四天。骨生長促進性化合物的所需釋放速率將依賴于若干因素，例如所要處置的動物物種以及所要處置的具體病癥。
還可以改變聚合物在體系中的濃度，以調節所結合的骨生長促進性化合物的釋放速率。已經發現，聚合物濃度越稀，骨生長促進性化合物的釋放將越容易。這種效應可以與其他方法聯合使用，以更加有效地控制所結合的骨生長促進性化合物因需釋放。例如，如果需要的話，通過調節聚合物和骨生長促進性化合物的濃度，可以獲得寬泛的釋放速率。
用在本發明熱塑性組合物中的溶劑優選地是藥學上可接受的、生物可相容的并且就地逸散至體液中，以便它們在水中的溶解性可以從易溶至不溶。優選的是，它們在注射與植入部位引起的組織刺激作用或壞死，即使有的話，也相當少。優選地，溶劑可以具有至少最低程度的水溶性。如果有機溶劑是水不溶性的或者是微溶于水的，溶劑將從可流動聚合組合物中緩慢分散。結果將是這種植入物在其壽命期間，可以含有變化量的殘余溶劑。尤其優選地，有機溶劑具有中等至高度的水溶性，以便它容易從聚合組合物中分散至體液中。最優選地，溶劑從聚合組合物中迅速分散，以便快速形成固體植入物。伴隨溶劑的分散，熱塑性聚合物凝固或膠凝成為固體聚合物體系。優選地，隨著熱塑性聚合物凝固，溶劑的分散導致在聚合物體系內形成孔。其結果是，含有熱塑性聚合物、溶劑和骨生長促進性化合物的可流動組合物將形成多孔的固體聚合物體系。而且，當溶劑是微水溶性的或者是水不溶性的，溶劑的分散可以導致形成固體多孔植入物，或者如果植入物保留有一些溶劑，結果可以是形成凝膠植入物，很少有孔或者沒有孔。
適合的溶劑包括滿足上述標準的那些液體有機化合物。用在本發明中優選的溶劑是N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)，原因至少在部分程度上是它的溶劑化能力和它的生物可相容性。
根據聚合物和溶劑的相容性和適當的溶解性，選擇用于本發明熱塑性聚合物可流動組合物的溶劑。更低分子量的熱塑性聚合物通常將比高分子量聚合物更容易溶于溶劑。其結果是，溶解在不同溶劑中的熱塑性聚合物的濃度因聚合物的類型和它的分子量而異。相反，更高分子量的熱塑性聚合物往往比極低分子量熱塑性聚合物更快地凝固、膠凝或固化。而且，更高分子量的聚合物往往比低分子量材料產生更高的溶液粘度。因而，除了有利于釋放速率以外，也為了有利于注射效率，應對聚合物的分子量和在溶劑中的濃度加以控制。
一經從可流動組合物形成聚合物體系，骨生長促進性化合物就結合到聚合物基質中。插入可流動組合物就地形成聚合物體系之后，骨生長促進性化合物將通過擴散和聚合物降解機理從基質中釋放至鄰近的組織或體液。這些機理的運用還能夠影響骨生長促進性化合物以控制的速率釋放至周圍環境。例如，聚合物可以被配制成在從基質中釋放有效量和/或基本量的骨生長促進性化合物之后降解。因而，骨生長促進性化合物從基質中的釋放可以因骨生長促進性化合物在水中的溶解性、骨生長促進性化合物在基質內的分布或者聚合物基質的大小、形狀、多孔性、溶解性與生物可降解性等因素而異。通過改變聚合物分子量，相對于其固有速率控制骨生長促進性化合物從基質中的釋放，以提供所需的釋放持續時間和速率。
聚合物體系被配制成含有有效提供所需生物、生理和/或治療效果的量的骨生長促進性化合物。更確切地，本發明的聚合物體系被配制成含有有效促進骨細胞與組織生長與生存、和/或增加功能性骨細胞與組織和骨髓活性等的量的骨生長促進性化合物。
結合在本發明聚合組合物中的骨生長促進性化合物的“治療有效量”依賴于多種因素，例如所需的釋放、所需生物效果所要求的骨生長促進性化合物的濃度、和為所需處置需要釋放骨生長促進性化合物的歷經時間。最終，該劑量分別取決于人或動物患者的醫師或獸醫，他將應用他的經驗和智慧采用適當的骨生長促進性化合物的種類和劑量，為患者提供治療。關于結合在聚合物溶液中的骨生長促進性化合物的量，一般沒有關鍵的上限。唯一的限制是有利于施用的物理限制，也就是說，骨生長促進性化合物不應當以這樣一種高濃度存在，以致溶液或分散體的粘度太高而無法注射。結合在聚合物體系中的骨生長促進性化合物的下限通常僅依賴于骨生長促進性化合物的活性和治療所需的時間。
優選地，用于本發明骨生長促進性化合物的骨生長處置的治療有效量在約0.001至約100mg/kg/天之間，尤其優選的量為約0.01至約10mg/kg/天。
本發明可流動組合物的給藥最終將按照患者的主管專業健康護理人員、例如醫師或——如果適當的話——DVM的智慧和方案得以實現。特定組合物的選擇將依賴于所要處置的病癥，該選擇將由主管專業健康護理人員進行。例如，關于堅硬的組織，例如骨，含有骨生長促進性化合物的生物可降解的聚合物支持新骨細胞的生長。這些新骨細胞最終代替降解中的聚合物。
例如，骨生長促進性化合物(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸的優選劑型是鈉鹽的凍干物，在給藥前用PLGH的NMP溶液重組。由一支注射器(注射器A)中的凍干化合物和第二支注射器(注射器B)中的PLGH的NMP溶液組成的劑型被稱為A/B重組體系。在骨折部位或附近給藥之前將兩支注射器的內容物緊密混合在一起。重組后，將內容物轉移至有刻度的給藥注射器。給藥的劑型是溶液并使化合物以所需強度分散在PLGH的NMP溶液中，例如該強度為5和50mgA/ml(mgA/ml是指等價于化合物鈉鹽形式的游離酸)。該劑型是用于局部給藥的腸胃外(例如皮下、肌內或髓內)持續釋放的注射劑。這種緩釋聚合物基質中的化合物(藥庫注射劑)被設計成在骨折部位或骨缺損或損傷處或附近給藥，不打算用于靜脈內給藥。為了提供適當劑型的貨架壽命穩定性，可以使用如上所述的雙注射器體系(A/B)，并優選的是化合物的鈉鹽形式。單相制劑是優選的替代制劑，優選使用化合物的游離酸形式。根據化合物和聚合物的穩定性，該化合物的無菌過濾和聚合物溶液的照射可以是制造穩定無菌產品所優選的。在一種實施方式中，該劑型可以被制成單獨的鋁袋并運輸，其中在一個袋子內含有填充有化合物凍干物形式的注射器，另一個袋子內含有聚合物溶液。在此引用作為參考文獻的在2001年10月4日公布的國際專利申請WO 01/73363描述了用于制備藥物組合物和試劑盒的本發明骨生長促進性化合物的釋放容器、體系和凍干方法。
實施例下列實施例代表性地闡述本發明。這些實施例不被解釋為對發明范圍的限制，鑒于說明書和權利要求書的公開，其他等價的實施方式也將是顯而易見的。
實施例A為了得到強度為5和50mgA/ml的劑型，分別使用下列凍干物和聚合物注射器的組合A)和B)A)5mgA/ml(重組后)的(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸鈉鹽制劑藥物注射器A，在沒有刻度的1.25ml外注射器中含有4mgA鈉鹽凍干物；和載體注射器B，在沒有刻度的1.25ml內注射器中含有0.8ml 50％RG502H/50％NMP溶液。
B)50mgA/ml(重組后)(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸鈉鹽制劑藥物注射器A，在沒有刻度的1.25ml外(粗)B-D注射器中含有40mgA鈉鹽凍干物；和載體注射器B，在沒有刻度的1.25ml內(細)注射器中含有0.8ml 50％RG502H/50％NMP溶液。
mgA表示等價于化合物鈉鹽形式的游離酸；用在這些實施例中的百分比基于所示成分的重量；RG502H是一種PLGH共聚物，其中乳酸與乙醇酸之比為1∶1，特性粘度為0.2dl/gm，它是商業上可得到的，例如Boehringer Ingelheim的Copolymer RESOMERRG 502H。
實施例150％RG502H/50％NMP與5mgA/ml(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸的鈉鹽，混合型A/B(聚合物溶液壓熱滅菌，化合物冷凍干燥)。
實施例250％RG502H/50％NMP與10mgA/ml(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸的鈉鹽，混合型A/B(聚合物溶液照射滅菌，化合物冷凍干燥)。
實施例350％RG502H/50％NMP與50mgA/ml(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸的鈉鹽，混合型A/B(聚合物溶液照射滅菌，化合物冷凍干燥)。
實施例447％RG502H/3％PLG-PEG/50％NMP與50mgA/ml(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸的鈉鹽，單相實施例547％RG503H/3％PLG-PEG/50％NMP與50mgA/ml(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸的鈉鹽，單相實施例645％RG504H/55％NMP與50mgA/ml(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸的鈉鹽，單相實施例737％RG503H/63％NMP與50mgA/ml(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸的鈉鹽，混合型A/B(聚合物溶液壓熱滅菌，化合物冷凍干燥)。
實施例837％RG503H/63％NMP與50mgA/ml(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸的鈉鹽，混合型A/B(聚合物溶液照射滅菌，化合物冷凍干燥)。
實施例950％RG502H/50％NMP與5mgA/ml(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸，單相評價供試化合物的控釋制劑
I.大鼠股骨橫向骨折模型使用3至4月齡的雄性Sprague-Dawley大鼠。將動物用氯胺酮和賽拉嗪麻醉，劑量分別為100和10mg/kg。剪去每只大鼠右后肢的毛發，清潔之。在髕骨外側切開1cm，暴露股骨髁。向髓內管道引入Kirschner線(直徑0.045”)穿過髁間部分，起到內部穩定的作用。用Vicryl閉合肌肉切口，用不銹鋼傷口夾閉合皮膚切口。借助受下落重量驅動的三點彎曲器件使插釘股骨骨干中部骨折。從麻醉中蘇醒后，允許大鼠承受全部體重和無限制的活動。在手術后不同天數給以供試物，經皮注射至骨折部位。在處置后不同天數處死動物，收集股骨用于分析。利用放射照相法、組織形態測定法和生物力學試驗評價骨折的愈合(例如參見F.Bonnarens and T.A.Einhorn，″Production of a standard closed fracture in laboratory animalbone”，Journal of Orthopaedic Research 297-101(1984))。
II.大鼠股骨骨折模型中的研究方案和結果使3至4月齡雄性Sprague-Dawley大鼠右股骨骨折。向對照組大鼠注射各載體。處置組大鼠接受單一劑量本發明的供試化合物控釋制劑，在手術后立即經皮注射至骨折部位。藥物濃度為50mg/ml，注射體積為300μl，總劑量為15mg/大鼠。在第21天處死動物，收集股骨用于放射照相評估。根據放射照相法的評估，用供試化合物處置的股骨具有比用載體處置的那些更大和更密的骨痂。數據表明，供試化合物刺激骨痂形成，可以有效增強骨折愈合。
下面是一些聚合物制劑的實例，它們在大鼠股骨骨折模型中顯示陽性結果50％RG502H/50％NMP與50mgA/ml(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸的鈉鹽，混合型A/B(聚合物溶液照射滅菌，化合物冷凍干燥)；47％RG502H/3％PLG-PEG/50％NMP與50mgA/ml(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸的鈉鹽，單相；47％RG503H/3％PLG-PEG/50％NMP與50mgA/ml(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸的鈉鹽，單相。
MgA表示等價于化合物鈉鹽形式的游離酸；RG502H是一種PLGH共聚物，其中乳酸與乙醇酸之比為1∶1，特性粘度為0.2dl/gm，它是商業上可得到的，例如Boehringer Ingelheim的Copolymer RESOMERRG 502H；RG503H是一種PLGH共聚物，其中乳酸與乙醇酸之比為1∶1，特性粘度為0.3dl/gm，它是商業上可得到的，例如Boehringer Ingelheim的Copolymer RESOMERRG 503H。
III.大鼠骨膜注射模型使用3周齡雄性Sprague-Dawley大鼠。在位于煙罩中的傳導箱內，將大鼠用異氟烷吸入(2-3分鐘)麻醉。剪去每只大鼠右后肢的毛發，清潔之。使用25G針頭進行局部注射，針頭連接有預先充滿供試溶液的Hamilton注射器。將溶液注射至股骨前側骨干中區骨膜下，體積為5至10μl，歷時不同天數。在第15天，將大鼠處死，收集股骨進行分析(例如參見M.E.Joyce，A.B.Roberts，M.B.Sporn and M.Bolander，“Transforming growth factor-βand the intiation of chondrogenesis andosteogenesis in the rat femur”，The Journal of Cell Biology 1102195-2207(1990))。
IV.大鼠骨膜注射模型中的研究方案和結果在第1天，雄性Sprague-Dawley大鼠右股骨接受載體或供試化合物的聚合物制劑的單一注射。供試化合物是(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸的鈉鹽。在第15天，將全部大鼠處死，收集右股骨進行分析。利用放射照相法和雙能X-射線吸光分析法(DEXA)評估骨膜的骨誘導作用。放射照片顯示有新骨生成，位于用供試化合物處置的右股骨前面。根據DEXA的評估，股骨注射區(小轉子與股骨干中部之間的區域)的骨礦質含量(BMC)在用供試化合物處置的大鼠中顯著增加了，與用載體處置的那些相比(參見下表A中所列舉的這些制劑的一些實例)。
表A
供試化合物的緩釋基質制劑在狗中的功效節段缺損模型利用尺骨節段缺損模型測試單一劑量供試化合物(它是(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸的鈉鹽)的PLGH制劑(50％50∶50 PLGH(RG502H級)/50％ NMP)的功效。如下修改方案動物處于全身麻醉下，以無菌方式準備前肢并披蓋之。在外側切開大約10cm長，使尺骨暴露在骨膜外。切開骨膜，移至切口的近側和遠側部分。然后利用擺動鋸在尺骨中部造成1.5cm節段缺損。保持半徑和其余骨間膜完整。將缺損部位用鹽水沖洗，除去骨屑。然后向該部位填充供試化合物的緩釋基質制劑，如上所述。將狗分成下列幾組。
表1
在手術后立即獲得前肢的放射照片，之后每兩周一次，直至研究結束。放射照片分為0至6個級別(表2)。
表2放射照片分級
觀察到單一施用供試化合物的緩釋基質制劑誘導B、C和D組狗的完全重新橋接。第24周時，新生骨再造為與對側骨相同的形狀和大小。根據放射照相法的評估，即使在24周以后，用載體處置的尺骨沒有顯示任何愈合。
將狗用10mg的50mg/ml(最終體積0.2ml)供試化合物或者1ml的10mg/ml制劑處置(C和D組)，得到相似的結果。總之，經過處置的動物有70-75％愈合了，而載體處置對照則沒有(表3)。
表3狗階段缺損模型結果
當在上述模型中，在含有50％ 50∶50 PLGH(RG503H級)/50％ NMP的制劑中測試供試化合物(50mg/ml)時，沒有很好地發揮作用。有些狗出現連合，但是遲于用含有RG502H級PLGH的制劑處置的狗。
犬脛骨切開模型正常的骨折愈合通常代表生物學上的最佳愈合過程，其結果是在愈合迅速的臨床前期模型中檢測愈合的加速既困難又有爭議。在迅速愈合的犬骨切開模型中研究了供試化合物(它是(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸的鈉鹽)的PLGH制劑(50％ 50∶50 PLGH(RG502H級)/50％ NMP)，以測定它對加速愈合的作用。在這種模型中增強愈合，支持了供試化合物愈合人正常骨折的潛在應用，因為人趨于更加緩慢地愈合骨折。
使用12±3kg的14月齡Beagle雄性狗進行研究。將狗分為四組，每組三至四只動物。
表4
動物處于全身麻醉下，以無菌方式準備后肢并披蓋之。在外側切開大約4cm長。利用Gigli鋸在狗脛骨遠側部分進行骨切開術。利用AO平板使缺損處穩定。腓骨合其余骨間膜保持完整，將缺損部位用鹽水沖洗，除去骨屑。然后向該部位填充載體，如上所述。手術后，允許動物承受全身重量活動，自由飲水進食。在手術后立即獲得后肢的放射照片，之后每兩周一次，直至研究結束。放射照片分為0至6級。
表5狗脛骨切開研究結果
A和B組的四只狗沒有一只在8周的時間框架內重新橋接缺損區域。選擇這一時間結束研究，以獲得動物處置組之間的差異。C組四只動物全部在8周時間內顯示顯著的重新橋接。D組中，一只動物無響應，不過其余三只顯示顯著的愈合(表5)。
權利要求
1.一種適合于在患者中就地形成植入物的藥物組合物，包含(a)一種藥學上可接受的、生物可降解的熱塑性聚合物或共聚物，它不溶于水或體液；(b)一種生物可相容的有機溶劑，它增溶該熱塑性聚合物、可就地分散在體液中、易溶于水、并能夠從聚合物體系中逸散至周圍組織液使該熱塑性聚合物在那里形成植入物；和(c)一種治療有效量的化合物或其藥學上可接受的鹽，選自下面這組(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸；7-[(4-丁基-芐基)-甲磺酰基-氨基]-庚酸；和7-{[2-(3，5-二氯-苯氧基)-乙基]-甲磺酰基-氨基}-庚酸組成的組。
2.權利要求1的組合物，其中該化合物是(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸的鈉鹽或(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸的游離酸。
3.權利要求2的組合物，其中該化合物是(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸的鈉鹽的凍干物。
4.權利要求2的組合物，其中該化合物的量為該組合物的約5至約50mgA/ml之間。
5.權利要求4的組合物，其中該化合物的量為該組合物的約5、10或50mgA/ml。
6.權利要求1的組合物，其中該聚合物選自由聚丙交酯、聚乙交酯及其共聚物組成的組。
7.權利要求6的組合物，其中該共聚物具有約0.20dl/g至約0.40dl/g的特性粘度。
8.權利要求6的組合物，其中該共聚物是聚-乳酸-共-乙醇酸(PLGH)。
9.權利要求8的組合物，其中乳酸與乙醇酸之比為約1比約1。
10.權利要求1、2或3的組合物，其中該溶劑是N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)。
11.權利要求1、2或3的組合物，其中該共聚物是聚-乳酸-共-乙醇酸(PLGH)，并且其中該溶劑是N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)。
12.權利要求11的組合物，其中在溶液中PLGH與NMP的重量百分比在約30％至約60％PLGH比約70％至約40％NMP之間。
13.權利要求12的組合物，其中在溶液中PLGH與NMP的重量百分比為約50％PLGH比約50％NMP。
14.適合于在患者體內就地形成生物可降解的植入物的藥物試劑盒，它包含A)一種器件，含有化合物或其藥學上可接受的鹽，選自下面這組(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸；7-[(4-丁基-芐基)-甲磺酰基-氨基]-庚酸；和7-{[2-(3，5-二氯-苯氧基)-乙基]-甲磺酰基-氨基}-庚酸；和B)一種器件，含有一種生物可降解的、生物可相容的、不溶于水或體液的藥學上可接受的熱塑性聚合物和一種可就地分散在體液中且易溶于水的藥學上可接受的溶劑的一種可流動組合物，其中該聚合物和該溶劑在該可流動組合物中的濃度和配比對于該可流動組合物接觸體液時就地形成植入物是有效的；C)其中這兩種器件均具有一個該化合物或該可流動組合物的出口、一個通過該出口排出該化合物或該可流動組合物的排出器和一個與該出口匹配的中空管；其中在將兩個器件的內容物混合在一起之后立即釋放含有該混合物的器件的內容物至患者體內。
15.在活體內就地形成植入物的方法，包含下列步驟(a)將無反應性、水不溶的生物可降解的聚合物溶于生物可相容的水易溶性有機溶劑，它可就地分散在體液中形成可流動組合物；(b)向該可流動組合物中加入有效量的化合物，產生一種藥物組合物；(c)將該藥物組合物放置在體內；和(d)使該溶劑逸散，產生固體或凝膠植入物，隨著該植入物的生物降解，通過擴散、侵蝕或擴散與侵蝕的組合方式釋放該化合物；其中該化合物或其藥學上可接受的鹽選自下面這組(3-(((4-叔丁基-芐基)-(吡啶-3-磺酰基)-氨基)-甲基)-苯氧基)-乙酸；7-[(4-丁基-芐基)-甲磺酰基-氨基]-庚酸；和7-{[2-(3，5-二氯-苯氧基)-乙基]-甲磺酰基-氨基}-庚酸；其中該聚合物選自由聚丙交酯及其與乙交酯的共聚物組成的組；和其中該溶劑是N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)。
全文摘要
本發明涉及改進的骨生長促進性化合物的控釋體系和用于其形成的可流動組合物。該可流動組合物由熱塑性聚合物、骨生長促進性化合物和有機溶劑組成。該可流動組合物能夠形成生物可降解的和/或生物可侵蝕的、多微孔的固體聚合物基質。該基質可用作一種植入患者(人和動物)體內某些組織向其釋放骨生長促進性化合物的植入物。
文檔編號A61K9/00GK1599598SQ02823968
公開日2005年3月23日 申請日期2002年11月20日 優先權日2001年11月30日
發明者弗朗西斯·杜蒙, 理查德·W·科斯邁耶, 李梅, 維什沃斯·M·帕拉爾卡, 理查德·L·鄧恩, 斯科特·A·杰弗斯, 周明興 申請人:美國輝瑞有限公司