專利名稱：一種含銀杏內酯藥物組合物及其制備方法與用途的制作方法
技術領域：
本發明屬于醫藥領域，具體涉及一種含銀杏內酯藥物組合物及其制備方法與用途，更具體地說，涉及一種由磷酸川芎嗪和銀杏內酯組合而成的藥物組合物，其制備方法以及在制備治療缺血性心腦血管疾病藥物方面的應用。
背景技術：
銀杏內酯為銀杏中的一類主要活性成分，可消除血小板聚集、抑制血栓形成，可防止動脈粥樣硬化，對心肌、大腦局部缺血具有很好的保護作用等，包括銀杏內酯A、B、C、M、J和白果內酯。
磷酸川芎嗪為2，3，5，6-四甲基吡嗪磷酸鹽一水合物(C8H12N2·H3PO4·H2O)，為白色或類白色結晶性粉末，具有抗血小板聚集作用，并對已聚集的血小板有解聚作用，擴張小動脈，改善微循環、增加腦血流和活血化瘀作用。磷酸川芎嗪吸收及排泄迅速，可以通過血腦脊液屏障。臨床用于缺血性腦血管疾病(如腦供血不足、腦血栓形成、腦栓塞)。
由于化學藥物和中藥的復方藥品不良反應報道較多，中國食品藥品監督管理局于2005年2月2日發布了“關于暫停受理銀杏達莫注射液等117個品種已有國家標準藥品注冊申請有關事宜的通知”，由此看來療效確切、質量穩定的化學藥物和中藥的復方藥品的研發和生產仍然具有一定的難度。
申請號為CN200410083882.9的專利文獻公開了一種銀杏藥物組合物、其制備方法與用途，用的原料藥為銀杏葉提取物和磷酸川芎嗪。其中所述的銀杏提取物是多種有效成分的混合物，而活性成分銀杏內酯只占其中的很少一部分。在以后的動物實驗和臨床應用中療效并不是非常的理想。
但目前，尚無將銀杏內酯提純后和磷酸川芎嗪以一定比例進行組配后，制成藥品進行臨床使用的報導。

發明內容
針對以上現有技術的不足，本發明研究人員經過大量的試驗，制備出以銀杏內酯和磷酸川芎嗪為主要活性成分，按一定重量配比，療效更好的含銀杏內酯藥物組合物。
本發明的一個目的是公開一種含銀杏內酯藥物組合物，它以銀杏內酯和磷酸川芎嗪為主要活性成分。
本發明的另一個目的是公開上述含銀杏內酯藥物組合物的制備方法。
本發明的又一目的是公開上述含銀杏內酯藥物組合物的用途。
本發明所述的含銀杏內酯藥物組合物可制備成各種藥劑學上的可用劑型，因此可使用該組合物還可含有一種或多種輔劑；比如氯化鈉、淀粉、滑石粉和硬脂酸鎂等，藥學領域可接受的輔劑。
本發明所述的磷酸川芎嗪可采用符合藥用標準的原料。
本發明所述的銀杏內酯提取物，其中所含的銀杏內酯重量百分含量在85％以上。銀杏內酯提取物可以是任何方法制備的，只要其中銀杏內酯的重量百分含量達到85％以上，都可以用來制備本發明含銀杏內酯藥物組合物。
本發明含銀杏內酯藥物組合物中，磷酸川芎嗪含量為銀杏內酯的1-100倍；優選為磷酸川芎嗪含量為銀杏內酯的5-20倍；更優選為磷酸川芎嗪含量為銀杏內酯的10倍。
本發明所述的銀杏內酯提取物也可以采用以下方法制備將申請號為CN200410083882.9的專利文獻中的銀杏提取物或符合《中國藥典》標準的銀杏葉提取物作為起始原料，將原料用水溶解，石油醚脫脂，醋酸乙酯萃取，碳酸氫鈉溶液洗滌，醋酸乙酯液濃縮，稀釋，超濾，濾液濃縮，干燥，粉碎的方法得到本發明銀杏內酯提取物。
具體的說，本發明銀杏內酯提取物是經過下述步驟制備而成的將原料用5倍量的水溶解，用石油醚脫脂后，水溶液用等體積的醋酸乙酯萃取5次，合并醋酸乙酯萃取液，用0.1mol/L的碳酸氫鈉溶液洗滌4次，洗滌后的醋酸乙酯液用水洗滌至中性；將醋酸乙酯液濃縮，濃縮液加水稀釋至相對密度為1.05，用截留分子量為200和600的超濾膜過濾，收集富含分子量為200-600的溶液，濃縮，干燥，粉碎，即得本發明銀杏內酯提取物。
本發明所述的含銀杏內酯藥物組合物可以制備成各種藥劑學上的可用劑型，如凍干粉針劑、片劑、膠囊劑、小容量注射劑、大容量注射劑，優選的劑型為小容量注射劑、大容量注射劑。本發明所述的含銀杏內酯藥物組合物的各種劑型可以按照藥學領域的常規生產方法制備。比如使用磷酸川芎嗪、銀杏內酯與一種或多種載體混合，然后將其制成所需的劑型。
本發明所述的含銀杏內酯藥物組合物當制備成大容量注射劑時，需加入適量氯化鈉作為等滲調節劑。
本發明研究人員進行大量實驗發現，當銀杏藥物組合物中磷酸川芎嗪重量為銀杏內酯重量的10倍配比時協同作用最好、療效最佳。實驗結果見表1。
表1 活性成分配比優選實驗


注±表示藥理作用差；+表示藥理作用一般；++表示藥理作用較好；+++表示藥理作用最好。
本發明最優選銀杏藥物組合物大容量注射劑的規格為250ml/瓶，每瓶含有磷酸川芎嗪100mg，銀杏內酯10mg。
用法如下靜脈滴注，一次一瓶，10～15天為一療程。
本發明所述的含銀杏內酯藥物組合物通過銀杏內酯和磷酸川芎嗪相互補充協同作用，可起到意想不到的效果。銀杏內酯可消除血小板聚集、抑制血栓形成，可防止動脈粥樣硬化，對心肌、大腦局部缺血具有很好的保護作用；磷酸川芎嗪吸收及排泄迅速，可以通過血腦脊液屏障發揮作用。
本發明所述的含銀杏內酯藥物組合物為銀杏內酯和磷酸川芎嗪按特定比例組配而成的復方制劑，其吸收及排泄迅速，可以通過血-腦脊液屏障。通過二者相互補充協同作用于機體，充分發揮活血化瘀，有抗血小板凝集，擴張血管，改善微循環作用，適用于缺血性心腦血管疾病的冶療，如腦供血不足、腦血栓形成、腦栓塞、腦血管痙攣、腦功能不全、老年性癡呆、帕金森氏綜合癥、腦中風、高血壓、高血脂、動脈硬化、冠心病、心絞痛、心肌梗塞。也可用于肝纖維化、糖尿病引起的微循環病變，脈管炎等。
具體實施例方式
下面用實施例進一步描述本發明，有利于對本發明及其優點、效果更好的了解，但所述實施例僅用于說明本發明而不是限制本發明。
下述的用于制備本發明銀杏內酯提取物的原料藥是將市售的銀杏葉采用申請號CN200410083882.9專利文獻中的方法制備成的銀杏提取物或直接為市售的銀杏葉提取物。
實施例1將原料用5倍量的水溶解，用石油醚脫脂后，水溶液用等體積的醋酸乙酯萃取5次，合并醋酸乙酯萃取液，用0.1mol/L的碳酸氫鈉溶液洗滌4次，洗滌后的醋酸乙酯液用水洗滌至中性；將醋酸乙酯液濃縮，濃縮液加水稀釋至相對密度為1.05，用截留分子量為200和600的超濾膜過濾，收集富含分子量為200-600的溶液，濃縮，干燥，粉碎，即得本發明銀杏內酯提取物；其中銀杏內酯含量大于85％。
實施例2稱取上述(含銀杏內酯4g)銀杏內酯提取物、磷酸川芎嗪40g，可配成100000ml藥液，最終制成大容量注射劑400瓶(規格為250ml/瓶)。在濃配罐中加適量85℃注射用水，向濃配罐中投入900g氯化鈉、充分攪拌使完全溶解，按配制總體積的0.04％加入活性炭，加熱90℃，保溫20分鐘，降溫至50℃，將藥液脫炭過濾至稀配罐中，在稀配罐中加入磷酸川芎嗪和銀杏內酯提取物，充分攪拌使完全溶解，按配制總體積的0.02％加入活性炭，靜置20分鐘，補加注射用水至配液量，調PH為4.8±0.2，將藥液脫炭過濾，藥液再經終端過濾，灌封于輸液瓶中，灌封時逐瓶充氮，滅菌，即得輸液產品。
實施例3稱取上述(含銀杏內酯8g)銀杏內酯提取物、磷酸川芎嗪40g，可配成2000ml藥液，最終制成小容量注射劑1000支。在配制罐中加適量48℃注射用水，再加入磷酸川芎嗪和銀杏內酯提取物，充分攪拌使完全溶解，按配制總體積的0.02％加入活性炭，靜置20分鐘，補加注射用水至配液量，調PH為4.5，將藥液脫炭過濾，藥液再經終端過濾，灌封于安瓿中，灌封時安瓿逐支充氮，滅菌，即得小容量注射劑。
實施例4稱取上述(含銀杏內酯2.5g)銀杏內酯提取物、磷酸川芎嗪50g，可配成1000ml藥液，最終制成小容量注射劑1000支。在配制罐中加適量48±2℃注射用水，再加入磷酸川芎嗪和銀杏內酯提取物，充分攪拌使其完全溶解，加入右旋糖酐40賦形劑，按配制總體積的0.02％加入活性炭，靜置20分鐘，補加注射用水至配液量，調PH為4.8，將藥液脫炭過濾，藥液再經終端過濾，藥液經終端過濾后灌裝(裝量1.0ml/支)，半加塞后凍干，制成凍干粉針產品。
實施例5稱取上述(含銀杏內酯1g)銀杏內酯提取物、磷酸川芎嗪100g，可最終制成片劑1000片。將銀杏內酯提取物、磷酸川芎嗪混合與80克淀粉混勻后用淀粉漿制粒，過20目篩整粒，干燥，加1克硬脂酸鎂壓制成片，即得含銀杏內酯藥物組合物片劑。
實施例6稱取上述(含銀杏內酯2g)銀杏內酯提取物、磷酸川芎嗪16g，可最終制成膠囊劑。將銀杏內酯提取物、磷酸川芎嗪與80克淀粉、80克滑石粉混勻后，過100目篩，裝膠囊，得含銀杏內酯藥物組合物膠囊劑。
實驗例1本實驗例為本發明實施例2的含銀杏內酯藥物組合物大容量注射劑(每瓶含有磷酸川芎嗪(C8H12N2·H3PO4·H2O)100mg，銀杏內酯10mg，2.25g氯化鈉)外觀性狀、pH值、重金屬及其它規定的注射劑檢查項目的檢測。
√性 狀 本品為微黃色至淺黃色的澄明液體。
√pH 值 pH值應為3.5-5.5(中國藥典2000年版二部附錄VI)。
√重金屬 精密量取本品25ml，置坩堝中，水浴蒸干，依法檢查(中國藥典2000年版二部附錄VIII H第二法)，含重金屬不得過百萬分之五。
√熱 原取本品，依法檢查(中國藥典2000年版二部附錄XI D)，劑量按家兔體重每1kg緩緩注射10ml，應符合規定。
√其 他應符合注射劑項下有關各項規定(中國藥典2000版二部附錄IB)。
實驗例2本實驗例為本發明實施例2的含銀杏內酯藥物組合物大容量注射劑(每瓶含有磷酸川芎嗪(C8H12N2·H3PO4·H2O)100mg，銀杏內酯10mg，2.25g氯化鈉)中主要組分的定性測定。
取本品2ml，加碘化鉍鉀2滴，即生成橙紅色沉淀。
在銀杏內酯和磷酸川芎嗪含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品峰的保留時間應與對照品相對應的峰保留時間一致。
本品顯鈉鹽與氯化物的鑒別反應(中國藥典2000年版二部附錄III)。
以上3種實驗為本發明含銀杏內酯藥物組合物所含組份的定性反應，說明本發明含銀杏內酯藥物組合物中含有確定的組份。
實驗例3本實驗例為本發明實施例2的含銀杏內酯藥物組合物大容量注射劑(每瓶含有磷酸川芎嗪(C8H12N2·H3PO4·H2O)100mg，銀杏內酯10mg，2.25g氯化鈉)中組份的定量檢測。每ml含銀杏內酯應為36-44μg，磷酸川芎嗪(C8H12N2·H3PO4·H2O)應為0.36-0.44mg。
銀杏內酯含量測定照《中國藥典》2000年版一部銀杏提取物項下含量測定中萜類內酯下的高效液相色譜法進行測定。
磷酸川芎嗪含量測定按照申請號CN200410083882.9中的含量測定方法進行測定。
按照本發明實施例2通過小試制備通過三批，每批200瓶，測定如下，每ml含量結果見表2。
表2 含量測定結果

陽性對照藥按照申請號為CN200410083882.9的專利文獻中的方法制備；本發明藥物按照實施例2方法制備，均為大容量注射劑。
藥理實施例1對小鼠缺氧耐力的影響實驗取健康昆明種小鼠30只，體重20～24g。隨機分成正常對照組，陽性對照組、本發明藥物組。每組10只，雌雄各半，分籠飼養。各組分別靜脈注射給予相應藥物，對照組給相應體積的生理鹽水，1次/d，連續7d。于末次給藥后1小時，將小鼠分別置于體積為150ml磨口瓶中，內放15g鈉石灰，密閉觀察其存活時間。結果見表3。
表3 對小鼠常壓缺氧的影響(X±S)

注與正常對照組比較**P＜0.01；與陽性對照組比較#P＜0.05。
藥理實施例2對小鼠心肌缺氧的保護作用實驗取健康昆明種小鼠30只，體重18～22g，隨機分成3組，隨機分成正常對照組，陽性藥物組、本發明藥物組。每組雌雄各半，分籠飼養。各組分別靜脈注射給予相應藥物，對照組給相應體積的生理鹽水。給藥方法1次/天，連續7天。于末次給藥后1小時用烏拉坦1.2g/kg腹腔注射麻醉，背部固定，分離氣管，以動脈夾夾閉氣管，用心電儀觀察心電，并用秒表記下小鼠夾閉氣管后至心電消失的時間。結果見表4。
表4 對小鼠心肌缺氧的影響(X±S)


注與正常對照組比較**P＜0.01；與陽性對照組比較#P＜0.05。
藥理實施例3對大鼠體內血栓形成的影響將大鼠隨機分成3組，每組10只，分別為正常對照組，陽性藥物組、本發明藥物組。各組分別靜脈給予相應藥物，對照組給相應體積的生理鹽水，對照組給生理鹽水。每日1次，連續給藥7天，末次給藥后1小時，將大鼠用10％水合氯醛，按0.3g/kg體重麻醉后固定，分離左頸總動脈，在血栓儀上以2mA電流刺激血管7min后，記錄血栓形成時間。結果見表5。
表5 對大鼠體內血栓形成的影響(X±S)

注與正常對照組比較**P＜0.01；與陽性對照組比較#P＜0.05。
由上述藥理實驗可以看出，本發明含銀杏內酯藥物組合物比現有制劑的療效有提高。
權利要求
1.一種含銀杏內酯藥物組合物，其特征在于，所述的藥物組合物含有磷酸川芎嗪和銀杏內酯提取物，磷酸川芎嗪含量為銀杏內酯的1～100倍。
2.根據權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，其中磷酸川芎嗪含量為銀杏內酯的5～20倍。
3.根據權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，其中磷酸川芎嗪含量為銀杏內酯的10倍。
4.權利要求1～3之一所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于，其中銀杏內酯提取物是通過將原料用水溶解，石油醚脫脂，醋酸乙酯萃取，碳酸氫鈉溶液洗滌，醋酸乙酯液濃縮，稀釋，超濾，濾液濃縮，干燥，粉碎的方法得到的。
5.根據權利要求4所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于，其中銀杏內酯提取物的制備方法為將原料用5倍量的水溶解，用石油醚脫脂后，水溶液用等體積的醋酸乙酯萃取5次，合并醋酸乙酯萃取液，用0.1mo1/L的碳酸氫鈉溶液洗滌4次，洗滌后的醋酸乙酯液用水洗滌至中性；將醋酸乙酯液濃縮，濃縮液加水稀釋至相對密度為1.05，用截留分子量為200和600的超濾膜過濾，收集富含分子量為200-600的溶液，濃縮，干燥，粉碎，即得。
6.根據權利要求1～3之一所述的藥物組合物，其特征在于，所述的藥物組合物可以制備成各種藥劑學上的可用劑型，如粉針劑、凍干粉針劑、片劑、膠囊劑、小容量注射劑、大容量注射劑，優選的劑型為小容量注射劑、大容量注射劑。
7.根據權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述的制劑為大容量注射劑，大容量注射劑中含有適量氯化鈉作為等滲調節劑。
8.權利要求1～3之一所述的藥物組合物在制備治療缺血性心腦血管疾病，如腦供血不足、腦血栓形成、腦栓塞、腦血管痙攣、腦功能不全、老年性癡呆、帕金森氏綜合癥、腦中風、高血壓、高血脂、動脈硬化、冠心病、心絞痛、心肌梗塞各疾病藥物方面的應用。
9.權利要求1～3之一所述的藥物組合物在制備治療肝纖維化、糖尿病引起的微循環病變，脈管炎各疾病藥物方面的應用。
全文摘要
本發明屬于醫藥技術領域，具體公開了一種含銀杏內酯藥物組合物，其中含有磷酸川芎嗪和銀杏內酯提取物，藥物組合物中所含磷酸川芎嗪重量為銀杏內酯重量的1～100倍，還公開了該藥物組合物的制備方法，本發明藥物組合物為磷酸川芎嗪和銀杏內酯組成的復方制劑，通過二者相互補充協同作用于機體，充分發揮活血化瘀、抗血小板凝集、擴張血管、改善微循環作用，可應用于制備缺血性心腦血管疾病的藥物。
文檔編號A61K9/19GK1771957SQ20051010959
公開日2006年5月17日 申請日期2005年10月28日 優先權日2005年10月28日
發明者張玉梅 申請人:阿爾貝拉醫藥控股(通化)有限公司